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1、1 绪论1生物化学探讨的对象和内容是什么？解答：生物化学主要探讨:（1）生物机体的化学组成、生物分子的构造、性质及功能；（2）生物分子分解与合成及反响过程中的能量变更；（3）生物遗传信息的储存、传递和表达；（4）生物体新陈代谢的调整与限制。2你已经学过的课程中哪些内容与生物化学有关。提示：生物化学是生命科学的根底学科，留意从不同的角度，去理解并运用生物化学的学问。3说明生物分子的元素组成和分子组成有哪些相像的规侓。解答：生物大分子在元素组成上有相像的规侓性。碳、氢、氧、氮、磷、硫等6种是蛋白质、核酸、糖和脂的主要组成元素。碳原子具有特殊的成键性质，即碳原子最外层的4个电子可使碳与自身形成共价单
2、键、共价双键和共价三键，碳还可与氮、氧和氢原子形成共价键。碳与被键合原子形成4个共价键的性质,使得碳骨架可形成线性、分支以及环状的多种多性的化合物。特殊的成键性质适应了生物大分子多样性的须要。氮、氧、硫、磷元素构成了生物分子碳骨架上的氨基（-NH2）、羟基（-OH）、羰基（）、羧基（-COOH）、巯基（-SH）、磷酸基（-PO4 ）等功能基团。这些功能基团因氮、硫和磷有着可变的氧化数及氮和氧有着较强的电负性而与生命物质的很多关键作用亲密相关。生物大分子在构造上也有着共同的规律性。生物大分子均由一样类型的构件通过肯定的共价键聚合成链状，其主链骨架呈现周期性重复。构成蛋白质的构件是20种根本氨基酸
3、。氨基酸之间通过肽键相连。肽链具有方向性（N 端C端）,蛋白质主链骨架呈肽单位重复；核酸的构件是核苷酸,核苷酸通过3, 5-磷酸二酯键相连，核酸链也具有方向性(5、3 ),核酸的主链骨架呈磷酸-核糖（或脱氧核糖）重复；构成脂质的构件是甘油、脂肪酸和胆碱，其非极性烃长链也是一种重复构造；构成多糖的构件是单糖，单糖间通过糖苷键相连，淀粉、纤维素、糖原的糖链骨架均呈葡萄糖基的重复。2 蛋白质化学1用于测定蛋白质多肽链N端、C端的常用方法有哪些？根本原理是什么？解答：（1） N-末端测定法：常采纳二硝基氟苯法、Edman降解法、丹磺酰氯法。二硝基氟苯(DNFB或FDNB)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基
4、与二硝基氟苯（DNFB）反响（Sanger反响），生成DNP多肽或DNP蛋白质。由于DNFB与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNP多肽经酸水解后，只有N末端氨基酸为黄色DNP氨基酸衍生物，其余的都是游离氨基酸。 丹磺酰氯(DNS)法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与与丹磺酰氯（DNSCl）反响生成DNS多肽或DNS蛋白质。由于DNS与氨基形成的键对酸水解远比肽键稳定，因此DNS多肽经酸水解后，只有N末端氨基酸为剧烈的荧光物质DNS氨基酸，其余的都是游离氨基酸。 苯异硫氰酸脂（PITC或Edman降解）法：多肽或蛋白质的游离末端氨基与异硫氰酸苯酯（PITC）反响（Edman反响），生成苯氨基
5、硫甲酰多肽或蛋白质。在酸性有机溶剂中加热时，N末端的PTC氨基酸发生环化，生成苯乙内酰硫脲的衍生物并从肽链上掉下来，除去N末端氨基酸后剩下的肽链仍旧是完好的。 氨肽酶法：氨肽酶是一类肽链外切酶或叫外肽酶，能从多肽链的N端逐个地向里切。根据不同的反响时间测出酶水说明放的氨基酸种类和数量，按反响时间和残基释放量作动力学曲线，就能知道该蛋白质的N端残基序列。（2）C末端测定法：常采纳肼解法、复原法、羧肽酶法。肼解法：蛋白质或多肽与无水肼加热发生肼解，反响中除C端氨基酸以游离形式存在外，其他氨基酸都转变为相应的氨基酸酰肼化物。 复原法：肽链C端氨基酸可用硼氢化锂复原成相应的氨基醇。肽链完全水解后，代表
6、原来C末端氨基酸的氨基醇，可用层析法加以鉴别。 羧肽酶法：是一类肽链外切酶，专一的从肽链的C末端开场逐个降解，释放出游离的氨基酸。被释放的氨基酸数目与种类随反响时间的而变更。根据释放的氨基酸量（摩尔数）与反响时间的关系，便可以知道该肽链的C末端氨基酸序列。2测得一种血红蛋白含铁0.426%，计算其最低相对分子质量。一种纯酶按质量计算含亮氨酸1.65%和异亮氨酸2.48%，问其最低相对分子质量是多少？3指出下面pH条件下，各蛋白质在电场中向哪个方向挪动，即正极，负极，还是保持原点？（1）胃蛋白酶（pI 1.0），在pH 5.0；（2）血清清蛋白（pI 4.9），在pH 6.0；（3）-脂蛋白（p
7、I 5.8），在pH 5.0和pH 9.0；解答：（1）胃蛋白酶pI 1.0环境pH 5.0，带负电荷，向正极挪动；（2）血清清蛋白pI 4.9环境pH 6.0，带负电荷，向正极挪动；（3）-脂蛋白pI 5.8环境pH 5.0，带正电荷，向负极挪动；-脂蛋白pI 5.8环境pH 9.0，带负电荷，向正极挪动。4何谓蛋白质的变性与沉淀？二者在本质上有何区分？解答：蛋白质变性的概念：自然蛋白质受物理或化学因素的影响后，使其失去原有的生物活性，并伴随着物理化学性质的变更，这种作用称为蛋白质的变性。变性的本质：分子中各种次级键断裂，使其空间构象从严密有序的状态变成松散无序的状态，一级构造不破坏。蛋白质
8、变性后的表现：生物学活性消逝； 理化性质变更：溶解度下降，黏度增加，紫外汲取增加，侧链反响增加，对酶的作用敏感，易被水解。蛋白质由于带有电荷和水膜，因此在水溶液中形成稳定的胶体。假设在蛋白质溶液中参加适当的试剂，破坏了蛋白质的水膜或中和了蛋白质的电荷，则蛋白质胶体溶液就不稳定而出现沉淀现象。沉淀机理：破坏蛋白质的水化膜，中和外表的净电荷。蛋白质的沉淀可以分为两类：（1）可逆的沉淀：蛋白质的构造未发生显著的变更，除去引起沉淀的因素，蛋白质仍能溶于原来的溶剂中，并保持自然性质。如盐析或低温下的乙醇（或丙酮）短时间作用蛋白质。（2）不行逆沉淀：蛋白质分子内部构造发生重大变更，蛋白质变性而沉淀，不再能
9、溶于原溶剂。如加热引起蛋白质沉淀，与重金属或某些酸类的反响都属于此类。蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍旧存在，并不析出。因此变性蛋白质并不肯定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已经变性。5下列试剂和酶常用于蛋白质化学的探讨中：CNBr，异硫氰酸苯酯，丹磺酰氯，脲，6mol/L HCl -巯基乙醇，水合茚三酮，过甲酸，胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，其中哪一个最合适完成以下各项任务？（1）测定小肽的氨基酸序列。（2）鉴定肽的氨基末端残基。（3）不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？（4）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。（5）在甲硫氨酸残基羧基侧水解肽键。（6）在赖氨
10、酸和精氨酸残基侧水解肽键。解答：（1）异硫氰酸苯酯；（2）丹黄酰氯；（3）脲；-巯基乙醇复原二硫键；（4）胰凝乳蛋白酶；（5）CNBr；（6）胰蛋白酶。 6由下列信息求八肽的序列。（1）酸水解得 Ala，Arg，Leu，Met，Phe，Thr，2Val。（2）Sanger试剂处理得DNP-Ala。（3）胰蛋白酶处理得Ala，Arg，Thr 和 Leu，Met，Phe，2Val。当以Sanger试剂处理时分别得到DNP-Ala和DNP-Val。（4）溴化氰处理得 Ala，Arg，高丝氨酸内酯，Thr，2Val，和 Leu，Phe，当用Sanger试剂处理时，分别得DNP-Ala和DNP-Leu。
11、解答：由（2）推出N末端为Ala；由（3）推出Val位于N端第四，Arg为第三，而Thr为第二；溴化氰裂解，得出N端第六位是Met，由于第七位是Leu，所以Phe为第八；由（4），第五为Val。所以八肽为：Ala-Thr-Arg-Val-Val-Met-Leu-Phe。7一个螺旋片段含有180个氨基酸残基，该片段中有多少圈螺旋？计算该-螺旋片段的轴长。解答：180/3.6=50圈，500.54=27nm，该片段中含有50圈螺旋，其轴长为27nm。8当一种四肽与FDNB反响后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val及其他3种氨基酸；当这四肽用胰蛋白酶水解时发觉两种碎片段；其中一片用LiB
12、H4（下标）复原后再进展酸水解，水解液内有氨基乙醇和一种在浓硫酸条件下能与乙醛酸反响产生紫（红）色产物的氨基酸。试问这四肽的一级构造是由哪几种氨基酸组成的？解答：（1）四肽与FDNB反响后，用5.7mol/LHCl水解得到DNP-Val，证明N端为Val。（2）LiBH4复原后再水解，水解液中有氨基乙醇，证明肽的C端为Gly。（3）水解液中有在浓H2SO4条件下能与乙醛酸反响产生紫红色产物的氨基酸，说明此氨基酸为Trp。说明C端为GlyTrp.（4）根据胰蛋白酶的专一性，得知N端片段为ValArg（Lys）.，以（1）、（2）、（3）结果可知道四肽的依次：NValArg（Lys）TrpGlyC
13、。9概述测定蛋白质一级构造的根本步骤。解答：（1）测定蛋白质中氨基酸组成。（2）蛋白质的N端和C端的测定。（3）应用两种或两种以上不同的水解方法将所要测定的蛋白质肽链断裂，各自得到一系列大小不同的肽段。（4）分别提纯所产生的肽，并测定出它们的序列。（5）从有重叠构造的各个肽的序列中推断出蛋白质中全部氨基酸排列依次。假设蛋白质含有一条以上的肽链，则需先拆开成单个肽链再按上述原则确定其一级构造。如是含二硫键的蛋白质，也必需在测定其氨基酸排列依次前，拆开二硫键，使肽链分开，并确定二硫键的位置。拆开二硫键可用过甲酸氧化，使胱氨酸部分氧化成两个半胱氨磺酸。3 核酸1 电泳分别四种核苷酸时，通常将缓冲液调
14、到什么pH？此时它们是向哪极挪动？挪动的快慢依次如何 将四种核苷酸吸附于阴离子交换柱上时，应将溶液调到什么pH？ 假设用渐渐降低pH的洗脱液对阴离子交换树脂上的四种核苷酸进展洗脱分别，其洗脱依次如何？为什么？ 解答： 电泳分别4种核苷酸时应取pH3.5 的缓冲液，在该pH时，这4种单核苷酸之间所带负电荷差异较大，它们都向正极挪动，但挪动的速度不同，依次为：UMPGMPAMPCMP； 应取pH8.0，这样可使核苷酸带较多负电荷，利于吸附于阴离子交换树脂柱。虽然pH 11.4时核苷酸带有更多的负电荷，但pH过高对分别不利。 当不考虑树脂的非极性吸附时，根据核苷酸负电荷的多少来确定洗脱速度，则洗脱依
15、次为CMPAMP GMP UMP，但事实上核苷酸和聚苯乙烯阴离子交换树脂之间存在着非极性吸附，嘌呤碱基的非极性吸附是嘧啶碱基的3倍。静电吸附与非极性吸附共同作用的结果使洗脱依次为：CMP AMP UMP GMP。2为什么DNA不易被碱水解，而RNA简单被碱水解解答：因为RNA的核糖上有2(-OH基，在碱作用下形成2(,3(-环磷酸酯，接着水解产生2(-核苷酸和3(-核苷酸。DNA的脱氧核糖上无2(-OH基，不能形成碱水解的中间产物，故对碱有肯定抗性。3一个双螺旋DNA分子中有一条链的成分A = 0.30，G = 0.24， 请推想这一条链上的T和C的状况。 互补链的A，G，T和C的状况。解答：
16、 T + C = 1-0.30-0.24 = 0.46； T = 0.30，C = 0.24，A + G = 0.46。4对双链DNA而言， 若一条链中(A + G)/(T + C)= 0.7，则互补链中和整个DNA分子中(A+G)/(T+C)分别等于多少？ 若一条链中(A + T)/(G + C)= 0.7，则互补链中和整个DNA分子中(A + T)/(G + C)分别等于多少 ？ 解答： 设DNA的两条链分别为和则： A= T，T= A，G= C，C= G，因为：(A+ G)/（T+ C）= (T+ C)/（A+ G）= 0.7， 所以互补链中（A+ G）/（T+ C）= 1/0.7 =1
17、.43；在整个DNA分子中，因为A = T， G = C，所以，A + G = T + C，（A + G）/（T + C）= 1； 假设同（1），则A+ T= T+ A，G+ C= C+ G，所以，（A+ T）/（G+ C）=（A+ T）/（G+ C）= 0.7 ；在整个DNA分子中，（A+ T+ A+ T）/（G+C+ G+C）= 2（A+ T）/2（G+C）= 0.75T7噬菌体DNA(双链B-DNA)的相对分子质量为2.5107，计算DNA链的长度(设核苷酸对的平均相对分子质量为640)。 解答：0.34 （2.5107/640）= 1.3 104nm = 13m。6假设人体有1014个
18、细胞，每个体细胞的DNA含量为6.4 109个碱基对。试计算人体DNA的总长度是多少？是太阳地球之间间隔 (2.2 109 km)的多少倍？已知双链DNA每1000个核苷酸重1 10-18g，求人体DNA的总质量。 解答：每个体细胞的DNA的总长度为：6.4 109 0.34nm = 2.176 109 nm = 2.176m，人体内全部体细胞的DNA的总长度为：2.176m1014 = 2.1761011km，这个长度与太阳地球之间间隔 （2.2109 km）相比为：2.176 1011/2.2 109 = 99倍，每个核苷酸重1 10-18g/1000 = 10-21g，所以，总DNA 6
19、.4 1023 10-21 = 6.4 102 = 640g。7有一个X噬菌体突变体的DNA长度是15m，而正常X噬菌体DNA的长度为17m，计算突变体DNA中丧失掉多少碱基对？解答：（17-15） 103/0.34 = 5.88 103bp8概述超螺旋DNA的生物学意义。解答： 超螺旋DNA比松弛型DNA更严密，使DNA分子的体积更小，得以包装在细胞内； 超螺旋会影响双螺旋分子的解旋实力,从而影响到DNA与其他分子之间的互相作用； 超螺旋有利于DNA的转录、复制及表达调控。9为什么自然界的超螺旋DNA多为负超螺旋？解答：环状DNA自身双螺旋的过度旋转或旋转缺乏都会导致超螺旋，这是因为超螺旋将
20、使分子可以释放由于自身旋转带来的应力。双螺旋过度旋转导致正超螺旋，而旋转缺乏将导致负超螺旋。虽然两种超螺旋都能释放应力，但是负超螺旋时，假设发生DNA解链（即氢链断开，部分双螺旋分开）就能进一步释放应力，而DNA转录和复制须要解链。因此自然界环状DNA实行负超螺旋，这可以通过拓扑异构酶的操作实现。10真核生物基因组和原核生物基因组各有哪些特点解答： 不同点: 真核生物DNA含量高，碱基对总数可达10 11，且与组蛋白稳定结合形成染色体，具有多个复制起点。原核生物DNA含量低，不含组蛋白，称为类核体，只有一个复制起点。 真核生物有多个呈线形的染色体；原核生物只有一条环形染色体。 真核生物DNA中
21、含有大量重复序列，原核生物细胞中无重复序列。 真核生物中为蛋白质编码的大多数基因都含有内含子(有断裂基因)；原核生物中不含内含子。 真核生物的RNA是细胞核内合成的，它必需运输穿过核膜到细胞质才能翻译，这样严格的空间间隔在原核生物内是不存在的。 原核生物功能上亲密相关的基因互相靠近，形成一个转录单位，称操纵子，真核生物不存在操纵子。 病毒基因组中普遍存在重叠基因，但近年发觉这种状况在真核生物也不少见。一样点:都是由一样种类的核苷酸构成的的双螺旋构造，均是遗传信息的载体，均含有多个基因。11如何对待RNA功能的多样性它的核心作用是什么 解答：RNA的功能主要有: 限制蛋白质合成； 作用于RNA转
22、录后加工与修饰； 参与细胞功能的调整； 生物催化与其他细胞持家功能；遗传信息的加工；可能是生物进化时比蛋白质和DNA更早出现的生物大分子。其核心作用是既可以作为信息分子又可以作为功能分子发挥作用。12什么是DNA变性？DNA变性后理化性质有何变更？解答：DNA双链转化成单链的过程称变性。引起DNA变性的因素很多，如高温、超声波、强酸、强碱、有机溶剂和某些化学试剂（如尿素，酰胺)等都能引起变性。 DNA变性后的理化性质变更主要有： 自然DNA分子的双螺旋构造解链变成单链的无规则线团，生物学活性丧失； 自然的线型DNA分子直径与长度之比可达110，其水溶液具有很大的黏度。变性后，发生了螺旋-线团转
23、变，黏度显著降低； 在氯化铯溶液中进展密度梯度离心，变性后的DNA浮力密度大大增加，故沉降系数S增加； DNA变性后，碱基的有序积累被破坏，碱基被暴露出来，因此，紫外汲取值明显增加，产生所谓增色效应。 DNA分子具旋光性，旋光方向为右旋。由于DNA分子的高度不对称性，因此旋光性很强，其a = 150。当DNA分子变性时，比旋光值就大大下降。13哪些因素影响Tm值的大小？解答：影响Tm的因素主要有： G-C对含量。G-C对含3个氢键，A-T对含2个氢键，故G-C对相对含量愈高，Tm亦越高（图3-29）。在0.15mol/L NaCl,0.015mol/L柠檬酸钠溶液(1SSC)中，阅历公式为：（
24、G+C）% =（Tm - 69.3） 2.44。 溶液的离子强度。离子强度较低的介质中，Tm较低。在纯水中，DNA在室温下即可变性。分子生物学探讨工作中需核酸变性时，常采纳离子强度较低的溶液。 溶液的pH。高pH下，碱基广泛去质子而丧失形成氢键的有力，pH大于11.3时，DNA完全变性。pH低于5.0时，DNA易脱嘌呤，对单链DNA进展电泳时，常在凝胶中参加NaOH以维持变性关态。 变性剂。甲酰胺、尿素、甲醛等可破坏氢键，阻碍碱积累，使Tm下降。对单链DNA进展电泳时，常运用上述变性剂。14哪些因素影响DNA复性的速度？解答：影响复性速度的因素主要有： 复性的温度，复性时单链随机碰撞，不能形成
25、碱基配对或只形成部分碱基配对时，在较高的温度下两链重又分别，经过屡次摸索性碰撞才能形成正确的互补区。所以，核酸复性时温度不宜过低，Tm-25是较适宜的复性温度。 单链片段的浓度，单链片段浓度越高，随机碰撞的频率越高，复性速度越快。 单链片段的长度，单链片段越大，扩散速度越慢，链间错配的概率也越高。因面复性速度也越慢，即DNA的核苷酸对数越多，复性的速度越慢，若以 C0为单链的初始浓度，t为复性的时间，复性达一半时的C0t值称C0t1/2，该数值越小，复性的速度越快。 单链片段的困难度，在片段大小相像的状况下，片段内重复序列的重复次数越多，或者说困难度越小，越简单形成互补区，复性的速度就越快。真
26、核生物DNA的重复序列就是复生动力学的探讨发觉的，DNA的困难度越小，复性速度越快。15概述分子杂交的概念和应用领域。解答：在退火条件下，不同来源的DNA互补区形成双链，或DNA单链和RNA单链的互补区形成DNA-RNA杂合双链的过程称分子杂交。通常对自然或人工合成的DNA或RNA片段进展放射性同位素或荧光标记，做成探针，经杂交后，检测放射性同位素或荧光物质的位置，找寻与探针有互补关系的DNA或RNA。干脆用探针与菌落或组织细胞中的核酸杂交，因未变更核酸所在的位置，称原位杂交技术。将核酸干脆点在膜上，再与探针杂交称点杂交，运用狭缝点样器时，称狭缝印迹杂交。该技术主要用于分析基因拷贝数和转录程度
27、的变更，亦可用于检测病原微生物和生物制品中的核酸污染状况。杂交技术较广泛的应用是将样品DNA切割成大小不等的片段，经凝胶电泳分别后，用杂交技术找寻与探针互补的DNA片段。由于凝胶机械强度差，不合适于杂交过程中较高温度和较长时间的处理，Southern 提出一种方法，将电泳分别的DNA片段从凝胶转移到适当的膜（如硝酸纤维素膜或尼龙膜）上，在进展杂交操作，称Southern印迹法，或Southern杂交技术。随后，Alwine等提出将电泳分别后的变性RNA吸印到适当的膜上再进展分子杂交的技术，被戏称为 Northern印迹法，或Northern杂交。分子杂交广泛用于测定基因拷贝数、基因定位、确定生
28、物的遗传进化关系等。Southern杂交和Northern杂交还可用于探讨基因变异，基因重排，DNA多态性分析和疾病诊断。杂交技术和PCR技术的结合，使检出含量极少的DNA成为可能。促进了杂交技术在分子生物学和医学领域的广泛应用。DNA芯片技术也是以核酸的分子杂交为根底的。16概述核酸序列测定的方法和应用领域。解答：DNA的序列测定目前多采纳Sanger提出的链终止法，和Gilbert提出的化学法。其中链终止法经不断改良，运用日益广泛。链终止法测序的技术根底主要有： 用凝胶电泳分别DNA单链片段时，小片段挪动，大片段挪动慢，用适当的方法可分别分子大小仅差一个核苷酸的DNA片段。 用适宜的聚合酶
29、可以在试管内合成单链DNA模板的互补链。反响体系中除单链模板外，还应包括适宜的引物，4种脱氧核苷三磷酸和若干种适量的无机离子。假设在4个试管中分别进展合成反响，每个试管的反响体系能在一种核苷酸处随机中断链的合成，就可以得到4套分子大小不等的片段，如新合成的片段序列为-CCATCGTTGA-，在A处随机中断链的合成，可得到-CCA和-CCATCGTA两种片段，在G处中断合成可得到-CCATCG和-CCATCGTTG两种片段。在C和T处中断又可以得到相应的2套片段。用同位素或荧光物质标记这4套新合成的链，在凝胶中置于4个泳道中电泳，检测这4套片段的位置，即可干脆读出核苷酸的序列。 在特定碱基处中断
30、新链合成最有效的方法，是在上述4个试管中按肯定比例分别参加一种相应的2(,3(-双脱氧核苷三磷酸（ddNTP），由于ddNTP的3(位无-OH，不行能形成磷酸二酯键，故合成自然中断。如上述在A处中断的试管内，既有dATP，又有少量的ddATP，新合成的-CCA链中的A假设是ddAMP,则链的合成中断，假设是dAMP，则链仍可延长。因此，链中有几个A，就能得到几种大小不等的以A为末端的片段。假设用放射性同位素标记新合成的链，则4个试管中新合成的链在凝胶的4个泳道电泳后，经放射自显影可检测带子的位置，由带子的位置可以干脆读出核苷酸的序列。采纳T7测序酶时，一次可读出400多个核苷酸的序列。近年采纳
31、4种射波长不同的荧光物质分别标记4种不同的双脱氧核苷酸，终止反响后4管反响物可在同一泳道电泳，用激光扫描搜集电泳信号，经计算机处理 可将序列干脆打印出来。采纳毛细管电泳法测序时，这种技术一次可测定700个左右核苷酸的序列，一台仪器可以有几十根毛细管同时进展测序，且电泳时间大大缩短，自动测序技术的进步加快了核酸测序的步伐，现已完成了包括人类在内的几十个物种的基因组测序。RNA序列测定最早采纳的是类似蛋白质序列测定的片段重叠法，Holley用此法测定酵母丙氨酸tRNA序列耗时达数年之久。随后开展了与DNA测序类似的直读法，但仍不如DNA测序简单，因此，常将RNA反转录成互补DNA（cDNA），测定
32、cDNA序列后推断RNA的序列，目前16S rRNA 1 542 b的全序列测定，23S rRNA 2 904 b的全序列测定，噬菌体MS2 RNA 3 569 b的全序列测定均已完成。4 糖类的构造与功能1书写-D-吡喃葡萄糖，L- (-)葡萄糖，-D- (+)吡喃葡萄糖的构造式，并说明D、 L；+、-；、各符号代表的意义。解答：书写单糖的构造常用D、L；d 或(+)、l或(-)；、表示。D-、L-是人为规定的单糖的构型。是以D-、L-甘油醛为参照物,以距醛基最远的不对称碳原子为准, 羟基在左面的为L构型, 羟基在右的为D构型。单糖由于具有不对称碳原子,可使平面偏振光的偏振面发生肯定角度的旋
33、转，这种性质称为旋光性。其旋转角度称为旋光度,偏振面对左旋转称为左旋,向右则称为右旋。d 或(+)表示单糖的右旋光性,l或(-)表示单糖的左旋光性。 2写出下列糖的构造式：-D-葡萄糖-1-磷酸，2-脱氧-D-呋喃核糖，-D-呋喃果糖，D-甘油醛-3-磷酸，蔗糖，葡萄糖醛酸。 解答：略。 3已知某双糖能使本尼地(Benedict)试剂中的Cu2+氧化成Cu2O的砖红色沉淀,用-葡糖糖苷酶可将其水解为两分子-D-吡喃葡糖糖,将此双糖甲基化后再水解将得到2,3,4,6-四氧甲基-D-吡喃葡糖糖和1,2,3,6-四氧甲基-D-吡喃葡糖糖,试写出此双糖的名称和构造式。 解答：蔗糖双糖能使本尼地(Ben
34、edict)试剂中的Cu2+氧化成Cu2O的砖红色沉淀,说明该双糖具复原性，含有半缩醛羟基。用葡糖苷酶可将其水解为两分子-D-吡喃葡糖, 说明该双糖是由-糖苷键构成的。将此双糖甲基化后再水解将得到2,3,4,6-四氧甲基-D-吡喃葡糖糖和1,2,3,6-四氧甲基-D-吡喃葡糖, 糖基上只有自由羟基才能被甲基化，说明-葡糖(14)葡糖构成的为纤维二糖。 4根据下列单糖和单糖衍生物的构造： (A) (B) (C) (D) (1)写出其构型(D或L)和名称；(2)指出它们能否复本来尼地试剂；(3) 指出哪些能发生成苷反响。解答：(1) 构型是以D-,L-甘油醛为参照物,以距醛基最远的不对称碳原子为准
35、, 羟基在左面的为L构型, 羟基在右的为D构型。A、B、C为D构型，D为L构型。 (2) B、C、D均有醛基具复原性，可复本来尼地试剂。A为酮糖，无复原性。 (3) 单糖的半缩醛上羟基与非糖物质(醇、酚等)的羟基形成的缩醛构造称为糖苷, B,C,D均能发生成苷反响。5透亮质酸是细胞基质的主要成分，是一种黏性的多糖,分子量可达100000，由两单糖衍生物的重复单位构成,请指出该重复单位中两组分的构造名称和糖苷键的构造类型。 解答：透亮质酸的两个重复单位是由D葡萄糖醛酸和N-乙酰氨基葡萄糖通过-1,3糖苷键连接而成。6纤维素和淀粉都是由14糖苷键连接的D葡萄糖聚合物，相对分子质量也相当，但它们在物
36、理性质上有很大的不同，请问是什么构造特点造成它们在物理性质上的如此差异 说明它们各自性质的生物学优点。解答：淀粉是葡萄糖聚合物，既有1，4 糖苷键，也有1，6糖苷键，为多分支构造。直链淀粉分子的空间构象是卷曲成螺旋形的,每一回转为6个葡萄糖基,淀粉在水溶液中混悬时就形成这种螺旋圈。支链淀粉分子中除有-(1,4)糖苷键的糖链外,还有-(1,6)糖苷键连接的分支处,每一分支平均约含2030个葡萄糖基,各分支也都是卷曲成螺旋。螺旋构象是碘显色反响的必要条件。碘分子进入淀粉螺旋圈内，糖游离羟基成为电子供体，碘分子成为电子受体，形成淀粉碘络合物，呈现颜色。其颜色与糖链的长度有关。当链长小于6个葡萄糖基时
37、,不能形成一个螺旋圈,因此不能呈色。当平均长度为20个葡萄糖基时呈红色,红糊精、无色糊精也因此得名。大于60个葡萄糖基的直链淀粉呈蓝色。支链淀粉相对分子质量虽大，但分支单位的长度只有 2030个葡萄糖基,故与碘反响呈紫红色。纤维素虽然也是由D-吡喃葡萄糖基构成，但它是以-(1,4)糖苷键连接的一种没有分支的线性分子，它不卷曲成螺旋。纤维素分子的链与链间，能以众多氢键像麻绳样拧在一起，构成坚硬的不溶于水的纤维状高分子（也称纤维素微晶束），构成植物的细胞壁。人和哺乳动物体内没有纤维素酶(cellulase),因此不能将纤维素水解成葡萄糖。虽然纤维素不能作为人类的养分物,但人类食品中必需含纤维素。因
38、为它可以促进胃肠蠕动、促进消化和排便。7说明下列糖所含单糖的种类、糖苷键的类型及有无复原性 （1）纤维二糖 （2）麦芽糖（3）龙胆二糖 （4）海藻糖（5）蔗糖 （6）乳糖解答：（1）纤维二糖含葡萄糖，1，4 糖苷键，有复原性。 （2）麦芽糖含葡萄糖，1，4 糖苷键，有复原性。 （3）龙 胆二糖含葡萄糖，1，6 糖苷键，有复原性。 （4）海藻糖含葡萄糖，1，1 糖苷键， 无复原性。 （5）蔗糖含葡萄糖和果糖，1，2糖苷键，无复原性。 （6）乳糖含葡萄糖和半乳糖，1，4糖苷键，有复原性。8人的红细胞质膜上结合着一个寡糖链,对细胞的识别起重要作用。被称为抗原确定基团。根据不同的抗原组合,人的血型主要
39、分为A型、B型、AB型和O型4类。不同血型的血液互相混合将发生凝血,危及生命。已知4种血型的差异仅在X位组成成分的不同。请指出不同血型（A型、B型、AB型、O型）X位的糖基名称。解答：A型X位是N-乙酰氨基-D-半乳糖；B型X位是-D-半乳糖；AB型X位蒹有A型和B型的糖；O型X位是空的。9请写出下列构造式：(1) L岩藻糖 (2)D半乳糖(3) N乙酰氨基D葡萄糖 (4) N乙酰氨基D半乳糖胺解答：略。10随着分子生物学的飞速开展，生命的奇妙正在渐渐被提醒。大量的探讨已说明，各种错综困难的生命现象的产生和疾病的形成过程均与糖蛋白的糖链有关。请阅读相关资料，列举你感爱好的糖的生物学功能。解答：
40、略。5 脂类化合物和生物膜1简述脂质的构造特点和生物学作用。 解答：(1)脂质的构造特点：脂质是生物体内一大类不溶于水而易溶于非极性有机溶剂的有机化合物，大多数脂质的化学本质是脂肪酸和醇形成的酯及其衍生物。脂肪酸多为4碳以上的长链一元羧酸，醇成分包括甘油、鞘氨醇、高级一元醇和固醇。脂质的元素组成主要为碳、氢、氧，此外还有氮、磷、硫等。 (2)脂质的生物学作用：脂质具有很多重要的生物功能。脂肪是生物体贮存能量的主要形式，脂肪酸是生物体的重要代谢燃料，生物体外表的脂质有防止机械损伤和防止热量散发的作用。磷脂、糖脂、固醇等是构成生物膜的重要物质，它们作为细胞外表的组成成分与细胞的识别、物种的特异性以
41、及组织免疫性等有亲密的关系。有些脂质（如萜类化合物和固醇等）还具有重要生物活性，具有维生素、激素等生物功能。脂质在生物体中还常以共价键或通过次级键与其他生物分子结合形成各种复合物，如糖脂、脂蛋白等重要的生物大分子物质。2概述脂肪酸的构造和性质。 解答：(1)脂肪酸的构造：脂肪酸分子为一条长的烃链（尾）和一个末端羧基（头）组成的羧酸。烃链以线性为主，分枝或环状的为数甚少。根据烃链是否饱和，可将脂肪酸分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。 (2)脂肪酸的性质： 脂肪酸的物理性质取决于脂肪酸烃链的长度和不饱和程度。烃链越长，非极性越强，溶解度也就越低。 脂肪酸的熔点也受脂肪酸烃链的长度和不饱和程度的影响。
42、脂肪酸中的双键极易被强氧化剂，如H2O2、超氧阴离子自由基（）、羟自由基（OH）等所氧化，因此含不饱和脂肪酸丰富的生物膜简单发生脂质过氧化作用，从而继发引起膜蛋白氧化，严峻影响膜的构造和功能。 脂肪酸盐属于极性脂质，具有亲水基（电离的羧基）和疏水基（长的烃链），是典型的两亲性化合物，属于离子型去污剂。 必需脂肪酸中的亚油酸和亚麻酸可干脆从植物食物中获得，花生四烯酸则可由亚油酸在体内转变而来。它们是前列腺素、血栓噁烷和白三烯等生物活性物质的前体。3概述磷脂、糖脂和固醇类的构造、性质和生物学作用 解答： . 磷脂包括甘油磷脂和鞘磷脂两类，它们主要参与细胞膜系统的组成，少量存在于其他部位。 (1)甘
43、油磷脂的构造：甘油磷脂是由sn-甘油-3-磷酸衍生而来，分子中甘油的两个醇羟基与脂肪酸成酯，第三个醇羟基与磷酸成酯或磷酸再与其他含羟基的物质(如胆碱、乙醇胺、丝氨酸等醇类衍生物)结合成酯。 (2)甘油磷脂的理化性质： 物理性质：甘油磷脂脂双分子层构造在水中处于热力学的稳定状态，构成生物膜的构造根本特征之一 化学性质：a. 水解作用：在弱碱溶液中，甘油磷脂水解产生脂肪酸的金属盐。假设用强碱水解，甘油磷脂水解生成脂肪酸盐、醇（XOH）和磷酸甘油。b. 氧化作用：与三酰甘油相像，甘油磷脂中所含的不饱和脂肪酸在空气中能被氧化生成过氧化物，最终形成黑色过氧化物的聚合物。c. 酶解作用：甘油磷脂可被各种磷
44、脂酶（PLA）专一水解。 (3)鞘磷脂即鞘氨醇磷脂，在高等动物的脑髓鞘和红细胞膜中特殊丰富，也存在于很多植物种子中。鞘磷脂由鞘氨醇、脂肪酸和磷脂酰胆碱（少数磷脂酰乙醇胺）组成。 . 糖脂是指糖基通过其半缩醛羟基以糖苷键与脂质连接的化合物。糖脂可分为鞘糖脂、甘油糖脂以及由固醇衍生的糖脂，其中鞘糖脂和甘油糖脂是膜脂的主要成分。(1)鞘糖脂是神经酰胺的1位羟基被糖基化形成的糖苷化合物。根据糖基是否含有唾液酸或硫酸基成分，鞘糖脂又可分为中性鞘糖脂和酸性鞘糖脂。 中性鞘糖脂：又称脑苷脂，是由神经酰胺的C1上的羟基与一单糖分子（半乳糖、葡萄糖等）以糖苷键结合而成，不含唾液酸成分。中性鞘糖脂一般为白色粉状物
45、，不溶于水、乙醚，溶于热乙醇、热丙酮、吡啶及苯等，性质稳定，不被皂化。它们不仅是血型抗原，而且与组织和器官的特异性，细胞之间的识别有关。 酸性鞘糖脂：糖基部分含有唾液酸或硫酸基的鞘糖脂称为酸性鞘糖脂。糖基部分含有唾液酸的鞘糖脂常称神经节苷脂，是最困难的一类甘油鞘脂，由神经酰胺与构造困难的寡糖结合而成，是大脑灰质细胞膜的组分之一，也存在于脾、肾及其他器官中。 (2)甘油糖脂是糖基二酰甘油，它是二酰甘油分子sn-3位上的羟基与糖基以糖苷键连接而成。甘油糖脂主要存在于植物和微生物中。植物的叶绿体和微生物的质膜含有大量的甘油糖脂。它可能在神经髓鞘形成中起作用。 . 固醇类也称甾类，全部固醇类化合物都是以环戊烷多氢菲为核心构造，因羟基的构型不同，可有及两型。 胆固醇(也称胆甾醇)是一种重要的甾醇类物质，一种环戊烷多氢菲的衍生物。是动物组织中含量最丰富的固醇类化合物，有游离型和酯型两种形式。存在于一切动物细胞中，以脑、神经组织及肾上腺中含量特殊丰富，其次为肝、肾、脾和皮肤及脂肪组织。4生物膜由哪些脂质化合物组成的？各有何理化性质？ 解答：组成生物膜的脂质主要包括磷脂、固醇及糖脂。 （1）磷脂： 甘油磷脂，是生物膜的主要成分。是由sn-甘油-3-磷酸分子中甘油的两个醇羟基与脂肪酸成酯，第三个醇羟基与磷酸成酯或磷酸再与其他含羟基的物质(如胆碱、乙醇胺、丝氨酸等醇类衍