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1、生物化学期末考试试题A注: 1. 本试卷总分100分;2. 学生的总成绩 平时30 + 期末70一、 名词解释(12分,每个1.5分)1. Bohr效应:具有氧传递能力的血红蛋白在水溶液或血液中时,如果CO2分压升高或pH降低,此时即使O2分压没有变化,O2饱和度也会减少,O2易从传递体上脱离,这种现象称为波耳效应,是由波耳(NHDBohr)发现的。这些效应有利于载运O2的血红蛋白在CO2多的体内组织中放出O2,在肺部与血红蛋白的氧合相配合而适于放出CO2。 2. 增色效应:指DNA在变性后在紫外260nm处吸光值增加的现象,增色效应与DNA解链程度有一定的比例关系,是观察DNA是否发生变性的
2、一个重要指标。 3. H-DNA:又叫tsDNA,三链DNA的缩写符号。两种类型:嘌呤嘌呤嘧啶 (Pu-Pu-Py)型和嘧啶嘌呤嘧啶(Py-Pu-Py)型。中间一条链必须是多聚嘌呤。三链中,双螺旋的两条正常配对,而第三条链与中间链碱的配对为Hoogsteen配对,即Pu-Pu-Py中形成A-A-T和G-G-C配对,在Py-Pu-Py中形成C+-G-C和T-A-T配对。4. 必需氨基酸:指人体自己不能合成或合成效率较低的aa,必需从外界食物所获取的aa。主要有异亮、亮、色、苏、苯丙、赖、甲硫(蛋)、缬、精、组。 5. 活性中心:指在一级结构相距甚远,或者是位于不同肽链上的AA残基通过盘绕折叠而在
3、三级结构上相互靠近,形成一个能与底物结合并起催化作用的位于酶表面的特化的空间区域。6. 核酸的变性与复性:在某些理化因素作用下,核酸分子的互补碱基对间的氢键断裂,变成单链结构而导致理化性质及生物学性质发生改变的过程为核酸的变性。在外界因素被去除后,核酸分子有可恢复其双链结构的过程。7. 三羧酸循环的回补反应:在有氧情况下,葡萄糖酵解产生的丙酮酸氧化脱羧形成乙酰CoA。乙酰CoA经一系列氧化、脱羧,最终生成CO2和H2O并产生能量的过程,又称TCA循环。8. 酶原的激活:酶原在一定条件下转化为有活性的酶的过程称为酶原的激活。二、填空(30分,每空0.5分)1. 在SDS-PAGE电泳中,蛋白质的
4、迁移率与其_等电点_无关,只与其_分子量_有关。 2. 稳定蛋白质胶体的因素是_表面水化膜_和_表面电荷_。3. 鉴定蛋白质多肽链氨基末端常用的方法有_ FDNB法(2,4-二硝基氟苯法)_和_Edman降解法(苯异硫氢酸酯法)_。4. 在糖异生途径中,催化3个不可逆反应的酶分别为:_葡萄糖-6-磷酸酶_、_果糖-1,6-二磷酸酶_和_丙酮酸羧化酶_和_磷酸烯醇式丙酮酸羧基酶 _。5. 单糖与强酸共热脱水而生成_糠醛_类化合物,后者与萘酚可生成紫色物,此为糖类的共同显色反应称为_萘酚(Molisch)_反应。6. 植物细胞壁骨架的主要成分是_纤维素_,细菌细胞壁骨架的主要成分是_肽聚糖_,虾壳
5、的主要成分是_壳聚糖(几丁质)_。7. 磷脂的基本骨架是_甘油_,鞘脂的基本骨架是_鞘氨醇_。8. 糖酵解过程中有3个不可逆的酶促反应,这些酶是_己糖激酶 _、 _果糖磷酸激酶_ 和_丙酮酸激酶_。9. 磷酸戊糖途径可分为2阶段,分别称为_氧化脱羧阶段_和_非氧化阶段_,其中两种脱氢酶是_6-磷酸葡萄糖脱氢酶_和_6-磷酸葡萄糖酸脱氢酶_,它们的辅酶是_ NADP _。10. 乙醛酸循环中不同于TCA循环的两个关键酶是_异柠檬酸裂解酶_和_苹果酸合成酶_。11. B型DNA双螺旋的螺距为_ 3.4nm _,每匝螺旋有_10_对碱基,每对碱基的转角是_36_。12. 影响酶促反应速度的因素有 E
6、、 S、pH、T(温度)、I(抑制剂)和 A(激活剂)。13. 酶促动力学的双倒数作图(Lineweaver-Burk作图法),得到的直线在横轴的截距为-1/Km ,纵轴上的截距为1/Vmax 。14. 根据国际系统分类法,所有的酶按所催化的化学反应的性质可分为六类氧化还原酶类 、转移酶类 、水解酶类 、裂合酶类 、异构酶类 和合成酶类 。15. 两类核酸在细胞中的分布不同,DNA主要位于_细胞核_中,RNA主要位于_细胞质_中。16. 核酸的基本结构单位是_核苷酸_,其特征元素为_P_。17. 生物膜的组成主要包括_脂类_和_蛋白质_,此外还有少量的糖类,无机盐,水和金属离子等。脂类是构成生
7、物膜总体结构的主要成分,其中以_磷脂_为主,其次是糖脂和胆固醇。18. 在DNA分子中,一般来说G-C含量高时,比重_大_,Tm(熔解温度)则_高_,分子比较稳定。19. DNA样品的均一性愈高,其熔解过程的温度范围愈_窄_。20. 与酶催化的高效率有关的因素有 邻近效应和定向效应、 共价催化、活性中心酸碱催化、张力学说、酶活性部位的低介电区等。21. GSH的中文名称是_谷胱甘肽 _,它的活性基团是_巯基_。22. 谷氨酸的pK1(-COOH)2.19, pK2 (-NH+3 ) = 9.67, pKR(R基)= 4.25,谷氨酸的等电点为_3.22_。三、选择题(21分,每个1.5分)1.
8、 双链DNA的Tm较高是由于下列哪组核苷酸含量较高所致:AA+G BC+T CA+T DG+C EA+C2. 在生理条件下,下列哪种基团既可以作为H+的受体,也可以作为H+的供体:AHis的咪唑基 BLys的氨基 CArg的胍基 DCys的巯基 3. DNA变性后理化性质有下述改变:A对260nm紫外吸收减少 B溶液粘度下降 C磷酸二酯键断裂 D核苷酸断裂4. 含有稀有碱基比例较多的核酸是:A胞核DNA B线粒体DNA CtRNA D mRNA5. hnRNA是下列哪种RNA的前体?AtRNA BrRNA CmRNA DSnRNA6. 竞争性抑制剂作用特点是:A与酶的底物竞争激活剂 B与酶的底
9、物竞争酶的活性中心 C与酶的底物竞争酶的辅基 D与酶的底物竞争酶的必需基团; 7. 哪一种情况可用增加S的方法减轻抑制程度:A不可逆抑制作用 B竞争性可逆抑制作用 C非竞争性可逆抑制作用D反竞争性可逆抑制作用 E无法确定8. 糖的有氧氧化的最终产物是:ACO2+H2O+ATP B乳酸 C丙酮酸 D乙酰CoA9. SDS凝胶电泳测定蛋白质的分子量是根据各种蛋白质_A.在一定pH下所带净电荷的不同 B.分子量大小不同C.分子极性不同 D.溶解度不同10. 下列哪一项不是蛋白质的性质之一?A处于等电状态时溶解度最小 B加入少量中性盐溶解度增加C变性蛋白质的溶解度增加 D有紫外吸收特性11. 下列氨基
10、酸中哪一种是非必需氨基酸?A亮氨酸 B酪氨酸 C赖氨酸 D蛋氨酸12. 在下列检测蛋白质的方法中,哪一种取决于完整的肽链?A凯氏定氮法 B双缩尿反应 C紫外吸收法 D茚三酮法13. 在有氧条件下,线粒体内下述反应中能产生FADH2步骤是:A琥珀酸延胡索酸 B异柠檬酸-酮戊二酸C.-戊二酸琥珀酰CoA D.苹果酸草酰乙酸 14. TCA循环中发生底物水平磷酸化的化合物是?A-酮戊二酸 B琥珀酰 C琥珀酸CoA D苹果酸四、是非题(10)(对) 1. 糖酵解过程在有氧无氧条件下都能进行。(对) 2. Km是酶的特征常数,只与酶的性质有关,与酶浓度无关。(错) 3. 从鼠脑分离的己糖激酶可以作用于葡
11、萄糖(Km=610-6mol/L)或果糖(Km=210-3mol/L),则己糖激酶对果糖的亲和力更高。(对) 4. 当底物处于饱和水平时,酶促反应的速度与酶浓度成正比。 (错) 5. mRNA是细胞内种类最多、含量最丰富的RNA。(对) 6. DNA复性(退火)一般在低于其Tm值约20的温度下进行的。(错) 7脱氧核糖核苷中的糖环3位没有羟基。(错) 8磷脂是中性脂。(对) 9多数氨基酸有D-和L-两种不同构型,而构型的改变涉及共价键的破裂。(错) 10氨基酸与茚三酮反应都产生蓝紫色化合物。五、. 完成反应式(6分,每空0.5分) 1丙酮酸 + CoASH + NAD+ 乙酰CoA + CO2
12、 +( NADH )+ H+ 催化此反应的酶和其它辅因子:( 丙酮酸脱氢酶 );TPP、FAD+、Mg22-酮戊二酸 + NAD+ + CoASH (琥珀酰-S-CoA )+ NADH + CO2 催化此反应的酶和其它辅因子:(-酮戊二酸脱氢酶 );TPP、FAD+、Mg237-磷酸景天庚酮糖 + 3-磷酸甘油醛 6-磷酸-果糖 + (4-磷酸赤藓糖 ) 催化此反应的酶:(转醛酶)4丙酮酸 + CO2 + (ATP ) + H2O (草酰乙酸 ) + ADP + Pi + 2H 催化此反应的酶:(丙酮酸羧化酶 )5(UDPG ) + F-6-P 磷酸蔗糖 + UDP催化此反应的酶是:(蔗糖磷酸
13、合酶 )6. 异柠檬酸 ( 乙醛酸 )+ 琥珀酸催化此反应的酶是:异柠檬酸裂解酶六、简答题(21分)1. 八肽组成为Asp、Ser、Gly、Ala、Met、Phe、Lys2。 (4分)(1)FDNB与之反应再酸水解,得DNP-Ala;(2)胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽,其组成为Asp、Gly、Lys、Met,此四肽与FDNB反应生成DNP-Gly;(3)胰蛋白酶消化八肽后,得到组成为Lys、Ala、Ser及Phe、Lys、Gly的两个三肽及一个二肽,此二肽别CNBr处理游离出Asp。 请写出八肽的顺序及推理过程。答:由结果(1)得知此肽N端是Ala;由结果(2)得知此肽C端四肽分别是GlyL
14、ysMetAsp;由结果(3)得知N端的三肽序列为AlaSerLys;中间的肽段序列为PheGlyLys,二肽被CNBr处理后游离出自由Asp,提示这二肽的顺序为MetAsp,且没有碱性残基。因此,八肽的完整顺序为:AlaSerLysPheGlyLysMetAsp2. 请例举三种蛋白质分子量的测定方法,并简要说明其原理。 (6分)答:方法很多:如渗透、扩散速率、沉降分析法、凝胶过滤法、SDS-PAGE法等。3. 下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中:CNBr、异硫氰酸苯酯、丹黄酰氯、脲、6mol/L HCl、-巯基乙醇、水合茚三酮、过甲酸、胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶。其中哪一个最适合完成以下各项任
15、务? (6分)(1)测定小肽的氨基酸序列。 (a)异硫氢酸苯酯;(2)鉴定肽的氨基末端残基。 (b)丹黄酰氯;(3)不含二硫键的蛋白质的可逆变性;如有二硫键存在时还需加什么试剂?(c)脲、-巯基乙醇;(4)在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。 (d)胰凝乳蛋白酶;(4)在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。 (e)CNBr;(5)在赖氨酸和精氨酸残基羧基侧水解肽键。 (f)胰蛋白酶。4. 在pH7.0,0.165mol/L NaCl条件下,测得某一DNA样品的Tm为89.3。求出四种碱基百分组成。(5分)答: (G + C)% = (Tm 69.3) 2.44 %= (89.3-69.3) 2.44 % = 48.8%G = C = 24.4%(A + T)% = 1 48.8% =51.2%A = T = 25.6%