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1、高二生物 SW-16-XX01-005专题二 课题1 微生物的实验室培养导学案（二）编写人：张勇 审核人：肖鸿 编写时间： 2016-02-26班级： 组别： 姓名： 等级：_【学习目标】掌握无菌技术的操作过程及分析与评价；【学法指导】1、认真阅读学习目标，牢牢把握学习要求。导学案完成后一定要再回头看学习目标，检测自已是否能达成学习目标。导学案的落实在课堂,而不是在课后,在预习课和展示课中都要进行知识的落实。2、预习时注意分析图提拱的信息，一定要结合课本中的图来记,做到心中有图。3、将预习中遇到的疑难点问题标识出来以备课堂小组计论、突破。【知识探究】：实验操作 - 大肠杆菌的纯化培养：本实验所
2、用的培养基是 ，本实验可分成 和 两个阶段进行。一、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 1制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是 、 、 、 、 。思考5在制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的称量操作中，动作要迅速，原因是什么？溶化操作中需要不断用玻璃棒搅拌的目的是什么？思考6牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？2 倒平板：待培养基冷却至 左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：在火焰旁右手拿 ，左手 ；使锥形瓶的瓶口 ；左手将培养皿 ，右手 ，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板 。思考7锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？思考8倒平板的目的是什么？思考9若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否
3、培养微生物？为什么？思考10配制斜面培养基作用是什么？试管为什么要加塞棉塞？ 二、纯化大肠杆菌 微生物接种：最常用的是 法和 法。另外还有穿刺接种和斜面接种等。1平板划线法是 的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是：将 在酒精灯火焰上灼烧直至 。在酒精灯火焰旁冷却接种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到 的目的。将冷却的接种环伸入到 。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环 ，盖上皿盖，不要划破培养基。灼烧接种环，冷却后从 划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将 相连。将平板 培养。思考11取菌种前灼烧接
4、种环的目的是什么？ 为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？ 取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？最后灼烧接种环的目的是？ 。在第1次划线后都从上次划线末端开始的目的是？ 。2稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将_进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的标准菌落。3.系列稀释操作：取盛有 mL水的无菌试管6支 ，编号101、102、103、104、105、106。用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3次使之混匀。从101倍稀释液中吸取 mL菌液注入到编号为102 倍稀释液试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。思考12系列稀释操作的注意事项是什么？思考13涂布平板操作的步骤是什么？结果分析与评价1培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？2在琼脂固体培养基上，大肠杆菌菌落颜色？形态？3培养12h和24h后的菌落大小？ ；菌落分布位置？ 原因？思考14在某培养基上出现了3种特征不同的菌落是什么原因？频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什么？