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1、高二生物 编号：SWXX115教师批阅定等血红蛋白的提取和分离导学案（一）班级： 组别： 姓名： 【学习目标】1、能记住色谱法、电泳法等分离生物大分子的基本原理； 2、能知道缓冲溶液的作用及配制；【学习重难点】重点：凝胶色谱法的原理和方法 难点：凝胶色谱法的原理【学习过程】引入：蛋白质是生命活动不可缺少的物质。对蛋白质的研究与应用，首先需要获得纯度较高的蛋白质。因此，从复杂的细胞混合物中提取、分离高纯度的蛋白质是生物科学研究中经常要做的工作。知识点一：知识回顾（查阅资料，小组讨论）1、蛋白质的基本组成单位是 。其基本组成元素是 。2、氨基酸的结构通式为： 。3、蛋白质结构多样性的原因： 、 、
2、 、 。 知识点二：基础知识凝胶色谱法（阅读教材P6465相关内容）1、蛋白质的物理性质： 、大小、 、 、吸附性质、 等千差万别，由此提取和分离各种蛋白质。2、概念：凝胶色谱法也称作 ，是根据 分离蛋白质的有效方法。3、原理：大多数凝胶是由 构成的小球体，内部有许多贯穿的通道，当不同的蛋白质通过凝胶时， 的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程 ，移动速度 ；而 的蛋白质无法进入凝胶内部的通道，只能在 移动，路程 。相对分子质量不同的蛋白质因此得以分离。4、凝胶材料：多孔性，多糖类化合物，如葡聚糖、琼脂糖。5、分离过程： 混合物上柱洗脱大分子流动快、小分子流动慢收集大分子收集小分子 洗脱：从色谱
3、柱上端不断注入缓冲液，促使蛋白质分子的差速流动。6、作用： 分离蛋白质，测定生物大分子分子量，蛋白质的脱盐等。想一想2： 凝胶色谱柱的直径大小会影响分离的效果吗? 2、凝胶色谱法分离度与凝胶色谱柱的高度有关吗?练一练2： 用凝胶色谱法分离蛋白质时，分子量大的蛋白质（ ）A、路程较长，移动速度较慢 B、路程较长，移动速度较快C、路程较短，移动速度较慢 D、路程较短，移动速度较快知识点三：基础知识缓冲溶液（阅读教材P65相关内容）1、作用：在一定范围内，缓冲溶液能抵制 对溶液 的影响，维持pH基本不变。2、由弱酸和相应的强碱弱酸盐组成（如H2CO3 ，NaH2PO4 等），调节酸和盐的用量，可配制
4、不同pH的缓冲液。3、配制：通常由 种缓冲剂溶解于水中配制而成，调节缓冲剂的 就可以制得 缓冲液。4、生物体内进行的各种生物化学反应都是在一定的PH下进行的，因此，缓冲溶液的 和 ，在生物化学的研究工作中有着极其重要的意义。想一想3： 某人喝入大量的食醋后是否会引起内环境中的pH明显下降？为什么？练一练3： 人体剧烈运动，当肌肉细胞缺氧时，pH是降低还是升高？pH的这种变化是由哪种物质引起的？需何种缓冲物质进行调节（ ）A、降低、CO2、NaHCO3 B、升高、CO2、H2CO3C、降低、乳酸、NaHCO3 D、升高、乳酸、NaHCO3 知识点四：基础知识电泳（阅读教材P55相关内容）1、概念
5、：带电粒子在 的作用下发生 的过程。2、原理：许多重要的生物大分子，如 、 等都具有 的基团，在一定pH下，这些基团会带上 或 。在电场的作用下，这些带电分子会向着 移动。电泳利用了分离样品中各种分子 以及分子本身的 、 不同，使带电分子产生不同的 ，从而实现样品中各种分子的分离。3、常用的分离方法： 、 。4、分离过程：在一定pH下，使蛋白质基团带上正电或负电；加入带负电荷多的SDS，形成“蛋白质SDS复合物”，使蛋白质迁移速率仅取决于 。想一想4： 1、多数蛋白质的等电点近于5，一般含碱性基团较多的蛋白质的等电点 （“偏高”还是“偏低”）。2、根据等电点的不同，你能用 方法将不同种类的蛋白
6、质分子分开。 3、简述根据等电点分离不同种类的蛋白质分子的原理。练一练4： 电泳是指带电粒子在电场的作用下向着与其所带电荷 的电极移动。（）A、相同 B、相反 C、相对 D、相向【课堂小结】【当堂检测】1、凝胶色谱法分离蛋白质的依据是（ ）A、对其他分子的亲和力 B、溶解度C、所带电荷多少 D、相对分子质量的大小2、凝胶色谱法中所用的凝胶的化学本质大多是（ ）A糖类化合物 B脂质 C蛋白质 D核酸3、缓冲液的作用是：在一定范围内，抵制外界的影响来维持 基本不变。（）A、温度 B、pH C、渗透压 D、氧气浓度4、凝胶色谱分离法分离蛋白质时，凝胶的种类较多，但其作用的共同点是（ ）A、改变蛋白质
7、分子通过凝胶时的路径B、吸附一部分蛋白质，从而影响蛋白质分子的移动速度C、将酶或纽胞固定在凝胶中D、与蛋白质分子进行化学反应，从而影响其移动速度5、下列各项中，一般不影响凝胶色谱法分离蛋白质中的分离度的是（ ）A、层析柱高 B、层析柱的直径C、缓冲溶液 D、样品的分布 6、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳中决定蛋白质或多肽移动速度的主要因素是 ( )A、蛋白质分子所带的电荷 B、蛋白质分子的形状C、蛋白质分子的相对分子质量 D、缓冲溶液的pH7、下面说法不正确的是（ ）A、在一定范围内，缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液pH的影响，维持pH基本不变B、缓冲溶液通常由12种缓冲剂溶解于水中配制而成C、
8、电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程D、透析袋能使大分子自由进出，而将小分子保留在袋内【课后反思】本节课我最大的收获是 我还存在的疑惑是 我对导学案的建议是 高中生物答题技巧有哪些高中生物答题技巧：选择题做题的速度不宜过快对于没有把握的题要随时标记，以便复查。（1）读题，标出关键词：如“正确或错误”“可或可能”“一定”“主要”等。（2）读完所有的选项：一是防止遗漏，一是进一步验证所选答案。（3）不确定的先随意选一个，做需要做标记：一防涂卡出现错误，二是有时间后可以快速找到不确定的试题重新检查。（4）做完所有选择题，就转涂好答题卡。这一点特别重要，因为理综选择21个共126分，若最后涂卡
9、，可能会因为心急造成的紧张导致涂卡出现严重的错误。高中生物答题技巧：图表题1、借助示意图这一截体，能让学生更深刻的理解某些生物学原理，同时可以有效地考查学生识图、分析和综合等方面的能力。因此解答此类题目时要注意:(1)首先要读懂题干文字，要充分利用题干文字给予的提示和说明;(2)要仔细审读图示中的各个细节部分包括图示标题、计量单位、指示线及标注名称、箭头或连线、题注说明等;(3)严密分析设问，有针对性的从图示中寻找有关信息，并应用生物学基本概念和基本原理回答问题。2、表格是标书生物学内容的常用方式，它具有信息密集、比较性和条理性强的特点。在解答此类是提示要注意一下技巧：(1)弄清楚表格材料的描
10、述对象或范围，包括看清题干的文字说明，看清表格名称，看清表格的第一行和第一列，看清有关说明等;(2)筛选信息，就是根据解决问题的需要，有选择的注意表格中的相关内容;(3)信息的处理和转换，即对表格中的数据进行整理，包括求总和、平均值、最大值、最小值、处理频率的高或低的数值等，有时可对表格中数据进行信息转换，如作图等，以便使结果更加清晰。高中生物答题技巧：简答类大题(1)文字信息迁移题：解题时要认真阅读材料，针对材料提出的设问认真推敲，把握有效信息，找出真实内涵，揭示材料与设问之间的关系。答题时要紧扣题意，观点准确，要点全面。(2)曲线信息迁移题：解题时要通过阅读和分析图像，正确识标、明点和析线，理解图像中所表达的生物学内涵，将提取的有效信息转换为可利用的信息，最终迁移到新情境中去回答问题。(3)图示信息迁移题：一要认真阅读，弄清图示的内涵和外延;二要挖掘图示中的隐含条件，找出解题所需条件;三要运用已有生物学知识进行辨析，以获得准确答案。(4)表格信息迁移题：首先要看表格的名称、数据和备注等内容，明确解题所需的知识要点;再通过对表格中列举的数据进行全方位的比较，找到解决问题的突破口;最后分析原因，找到解决问题的方法。解答此类试题的关键在于分析表格中已存在的文字信息，然后根据所示信息，利用设问中的关键语句，搜索相应的信息，提取问题的答案。6