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1、葡萄糖肉浸液肉汤Dextrose Meat Infusion Broth 用途:用于溶血性链球菌的增菌培养配方:( g/L) 牛肉粉 3.0 氯化钠 5.0 蛋白胨 10.0 磷酸氢二钾2.0 葡萄糖10.0 pH 值 7.5 0.1 25原理:蛋白胨、牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钾为缓冲剂;葡萄糖提供碳源。用法:称取本品30.0g, 煮沸溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121高压 灭菌15 分钟 ,备用。质量控制:在 36 1培养24 小时。质控菌株溶血性链球菌单增李斯特氏菌大肠杆菌 沙门氏菌27853 25922 14028 生长情况(10-8 )+
2、(10-8)+ +/+/ 匹克氏肉汤基础A Pick s Broth BaseA用途:用于溶血性链球菌的增菌培养配方:( g/L)胰蛋白胨10.0 牛心浸粉 20.0 叠氮钠 0.065 结晶紫0.002 pH 值 7.3-7.5 原理: 25胰蛋白胨、牛心浸粉提供碳氮源、维生素和生长因子;脱纤维兔血(或羊血)为溶血性链球菌提供大量生长因子;结晶紫和叠氮钠为选择性抑菌剂。用法:称取本品30.0g, 加热溶于1000ml 蒸馏水中 ,分装 , 121 高压灭菌15 分钟 , 冷至50左右时 ,加入脱纤维羊血 ,混匀。质量控制:在 36 1培养 18-24 小时。肉浸液肉汤培养基Meat Infu
3、sion Broth 用途:用于溶血性链球菌、蜡样芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌的增菌培养(GB 标准)配方:( g/L) 牛肉粉3.0 氯化钠5.0 蛋白胨 12.0 磷酸氢二钾2.0 pH 值 7.5 0.1 原理:蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;磷酸氢二钾为缓冲剂;氯化钠可维持均衡的渗透压。用法:称取本品20.0g, 溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制:在 36 1培养 18-24 小时。25质控菌株溶血性链球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希氏菌沙门氏菌菌株编号ATCC32210 ATCC25923 ATCC25922 ATCC14028 生长情
4、况+ + + + 浑浊浑浊浑浊浑浊叠氮钠葡萄糖肉汤Azide Dextrose Broth用途:用于链球菌的增菌培养配方:(g/L) 胰蛋白胨 15.0 牛肉浸粉4.5 氯化钠 7.5 葡萄糖7.5 叠氮钠 0.2 pH 值7.0 - 7.4 原理:胰蛋白胨和牛肉浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;葡萄糖提供碳源;叠氮化名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 1 页,共 8 页 - - - - - - - - - 钠可抑制革兰氏阴性菌。用法:称取本品34.7g, 加热搅拌溶解
5、于1000ml 蒸馏水中 ,分装,121 高压灭菌15 分钟,备用。质量控制:在 36 1培养 18-24 小时。质控菌株肠球菌大肠埃希氏菌粪肠球菌金黄色葡萄球菌ATCC25922 ATCC29212 乙基紫叠氮钠肉汤用途:用于链球菌的增菌培养配方:( g/L) 酪蛋白胨13.5 酵母浸粉 6.5 葡萄糖 5.0 氯化钠 5.0 磷酸氢二钠2.7 磷酸二氢钠 2.7 叠氮钠0.4 乙基紫0.00083 pH 值 7.0 0.2 原理:酪蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠和磷酸二氢钠做缓冲剂;乙基紫作为指示剂
6、。用法:取本品35.8g, 溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制:25KF 链球菌琼脂KF Streptococcus Agar用途:用于链球菌的选择性分离及计数(GB 、SN 标准)配方: (g/L) 月示蛋白胨10.0 酵母粉10.0 甘油磷酸钠10.0 氯化钠5.0 麦芽糖20.0 乳糖 1.0 叠氮钠0.4 琼脂 13.0 溴甲酚紫 0.015 pH 值 7.2 0.2 原理:月示胨和酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;麦芽糖和乳糖为可发酵糖类;氯化钠维持均衡的渗透压;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;琼脂是培养基的凝固剂;溴甲酚紫为指示剂染料。用法:称
7、取本品69.4g, 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压 灭菌15 分钟 ,冷却至50-60 时,加入无菌1%TTC 溶液10ml, 混匀 ,倾入无菌平皿 ,备用。质量控制:在 36 0.5下培养48h 。菌 名 菌 号 生长状况良好被抑制培养特征红色或粉红色中心粪性链球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC25922 肠球菌琼脂 (胆盐七叶苷叠氮钠琼脂) Enterococcus Agar(Bile Esculin Azide Agar)用途:用于食品和水中肠球菌的计数货号:HB0133-3 配方: (g/L) 牛肉浸粉3.0 胰酪蛋白胨17.0 酵母粉5.0 牛胆粉
8、10.0 氯化钠5.0 七叶苷1.0 柠檬酸铁铵0.5 叠氮化钠0.25 柠檬酸钠 1.0 琼脂13. pH 值7.1 0.2 原理:胰酪蛋白胨和牛肉浸粉、酵母粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压; 细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7- 二羟基香豆素; 柠檬名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 2 页,共 8 页 - - - - - - - - - 酸钠、牛胆粉和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。用法:称取
9、本品56.3g, 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压灭菌15 分钟 ,冷至45 1,倾入含1ml 样品液平皿中约15ml 培养基,混匀,凝固。35 2倒置培养基培养 24 2h。注:从保温开始至做成平板时间不要超过4h。质量控制:在 36 0.5培养 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况良好被抑制被抑制培养特征棕黑色,具有棕色晕轮 粪链球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922 CATC 琼脂 CATC Agar 用途:用于食品和饮料肠球菌的分离培养配方: (g/L ) 胰酪蛋白胨15.0 酵母浸粉 5.0 磷酸二氢钾5.0 柠
10、檬酸钠15.0 吐温 80 1.0 碳酸钠 2.0 叠氮钠0.4 红四氮唑 (TTC)0.1 琼脂15.0 pH 值 7.0 0.2 原理:胰酪蛋白胨、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,磷酸二氢钾是缓冲剂。琼脂是培养基凝固剂。用法:称取本品58.5g , 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压灭菌15 分钟 ,冷至5055 时,倾入无菌平皿,备用。质量控制:25胆盐七叶苷琼脂Bile Esculin Agar 用途:用于肠球菌和肠道致病菌的分离培养配方:( g/L)蛋白胨8.0 牛胆盐 20.0 柠檬酸铁0.5 七叶苷1.0 琼脂 15.0 pH 值 7.1 0.2 原理:蛋白胨提供
11、氮源、维生素和生长因子;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁中铁离子反应形成黑色的6,7- 二羟基香豆素; 牛胆盐为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。用法:称取本品44.5g, 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制:在 36 1培养 22-24 小时。质控菌株肠球菌大肠杆菌金黄色葡萄球菌25922 25923 生长情况 (10-7 ) + (10-7 )+ 黑色 + / 哥伦比亚血琼脂基础Columbia Blood Agar Base 用途:营养非常丰富,用于各种细菌的基础培养基配方:( g/L) 酪蛋白胰酶消化物10.0g 心胰酶消化物3
12、.0g 玉米淀粉1.0g 肉胃酶消化物5.0g 酵母浸出粉5.0g 氯化钠5.0g 琼脂 10.0g PH 值 7.3 0.2 原理:酪蛋白胰酶消化物、肉胃酶消化物、心胰酶消化物和酵母浸出粉提供碳氮源、维生素和氨基酸;淀粉能促进奈瑟氏菌的生长和增强链球菌的溶血特性;氯化钠维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 3 页,共 8 页 - - - - - - - - - 用法: 称取本品39 克,加热溶解于1000ml 蒸馏水中, 分装, 1
13、21高压灭菌15 分钟,冷至 45-50 左右时,加入相当于20mg 庆大霉素的无菌硫酸庆大霉素,混匀,倾入无菌平皿。质量控制:在 30-35 培养18-24 小时。 质控菌株金黄色葡萄球菌单增李斯特氏菌大肠埃希氏菌沙门氏菌铜绿假单胞菌菌株编号ATCC 25923 ATCC 19114 ATCC 25922 ATCC 14028 CMCC 10104 生长情况良好良好良好 良好 良好有黄色色素无色透明小菌落无色透明大菌落无色大菌落有绿色色素其它特征LIM 培养基 LIM Medium 用途:用于链球菌的分离培养(Japan 方法)配方:( g/L) 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨20.0 葡萄糖2
14、.0 碳酸氢钠2.0 氯化钠 2.0 磷酸氢二钠0.4 pH 值 7.8 0.1 原理:胰蛋白胨和牛肉粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖提供碳源;氯化钠维持均衡的渗透压磷酸氢二钠作为缓冲剂。用法:取本品36.4g, 溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压灭菌15 分钟 ,待培养基冷至45-50 时,加入多粘素 E10mg 和萘啶酮酸15mg , 混匀质量控制:25BETA-SSA 琼脂 BETA-SSA Agar 用途:用于链球菌的选择性分离培养配方:( g/L) 蛋白胨 15.0 大豆蛋白胨5.0 氯化钠5.0 麦芽糖 0.25 琼脂 13.0 抑菌剂0.0262 pH 值 7.1
15、- 7.5 原理:蛋白胨和大豆蛋白胨提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠可维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。用法:取本品38.3g, 溶解于1000ml 蒸馏水中 ,115高压灭菌20 分钟 ,冷至50左右时,无菌加入5-10% 的脱纤维羊血,混匀,倾入无菌平皿。质量控制:25粪肠球菌琼脂Enterococcus faecalis Agar 用途:用于粪肠球菌的选择性分离配方: (g/L ) 月示胨 0.1 麦芽糖 13.0 酵母浸粉 10.0 甘油磷酸钠20.0 氯化钠 10.0 乳糖 10.0 溴甲酚紫5.0 叠氮钠 1.0 TTC0.015 琼脂 0.4 pH 值 7.2 0.2
16、 原理:月示胨和酵母浸粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;乳糖是大肠菌群可发酵的糖类;叠氮化钠可抑制革兰氏阴性菌;溴甲酚紫和TTC 作为指示剂;琼脂是培养基的凝固剂。用法:取本品70.0g , 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,煮沸5 分钟 ,冷至 50 左右,倾入无菌平皿,备用。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 4 页,共 8 页 - - - - - - - - - 质量控制: 25缓冲蛋白胨水Buffered Peptone Water 用途:用于阪崎杆菌前增菌培养
17、(GB2008 标准)配方: (g/L) 蛋白胨 10.0 氯化钠5.0 磷酸氢二钠 (含 12 个结晶水 )9.0 磷酸二氢钾1.5 pH 值 7.2 0.2 25原理:白胨提供碳源和氮源满足细菌生长的需求;氯化钠可维持均衡的渗透压;磷酸二氢钾和磷酸氢二钠是缓冲剂用法:称取本品20.0g , 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121 高压灭菌15 分钟备用。质量控制:在 36 1培养 18-24 小时。质控菌株单增李斯特氏菌沙门氏菌菌株编号 ATCC19114 ATCC14028 生长情况+ + 浑浊 浑浊其它特征胆汁液态培养基Bile broth 用途:用于粪链球菌的胆汁耐受试验。配方:
18、( g/L) 猪胆粉 20.0 脑心浸液肉汤23.1 pH 值 7.4 0.1 用法: 称取本品43.1g, 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,分装试管 ,121 高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制:在 36 1培养 18-24 小时。M-肠道菌琼脂M-Enterococcus Agar 用途:用于水中或其它物质中肠球菌分离培养和计数(滤膜法或划线法)配方:( g/L) 胰酪蛋白胨15.0 大豆蛋白胨5.0 酵母浸粉5.0 葡萄糖2.0 磷酸氢二钾 4.0 叠氮化钠 0.4 TTC 0.1琼脂10.0 pH 值 7.2 0.2 原理: 胰酪蛋白胨、 大豆蛋白胨、 酵母浸粉提供氮源、维生素和
19、矿物质,葡萄糖提供碳源,磷酸盐是缓冲剂,琼脂是培养基凝固剂。用法:称取本品42g,加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,煮沸1 分钟 ,冷至45-50 左右时 , 倾入无菌平皿。无需高压灭菌。质量控制:25THB 培养基 THB Medium 用途:用于链球菌增菌培养配方: (g/L) 牛肉粉 10.0 胰蛋白胨20.0 葡萄糖2.0 碳酸氢钠2.0 氯化钠2.0 磷酸氢二钠0.4 pH 值 7.8 0.1 原理:牛肉粉、胰蛋白胨提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,氯化钠维持均衡的渗透压,磷酸盐是缓冲剂。用法:称取本品36.4 g, 溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌15 分钟
20、 ,待培养基冷至名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 5 页,共 8 页 - - - - - - - - - 45-50 时, 加入多粘素 E 10mg 和萘啶酮酸15mg , 混匀。25 PS 琼脂 PS Agar 用途:用于消化球菌的培养配方:(g/L) 蛋白胨10.0 牛肉浸粉3.0 酵母浸粉3.0 葡萄糖2.0 半胱氨酸盐酸盐0.5 氯化钙0.008 硫酸镁 0.008 磷酸氢二钾0.04 磷酸二氢钾0.04 碳酸氢钠0.4 氯化钠0.08 吐温 80 1.0 琼脂
21、 13.0 原理:蛋白胨、牛肉浸粉、酵母浸粉提供氮源、维生素和矿物质,葡萄糖提供碳源,磷酸氢二钾和磷酸二氢钾是缓冲剂。氯化钠维持均衡的渗透压,琼脂是培养基凝固剂。用法:称取本品33.1g, 加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中,分装, 121 高压灭菌15 分钟,备用。质量控制:肠球菌肉汤Enterococcus Broth 用途:用于肠球菌增菌培养配方: (g/L) 胰蛋白胨 17.0 牛肉浸粉3.0 酵母浸粉5.0 牛胆粉 10.0 氯化钠5.0 柠檬酸钠 1.0 七叶苷 1.0 柠檬酸铁铵0.5 叠氮化钠0.25 pH 值 7.1 0.2 原理:胰蛋白胨和酵母浸粉、牛肉浸粉提供氮源、维生
22、素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压; 细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7- 二羟基香豆素; 柠檬酸钠、牛胆盐和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌。用法:称取本品42.8g, 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,分装 ,121 高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制:在 36 0.5培养 24 小时。 菌 名 菌 号 生长状况良好被抑制被抑制培养特征棕黑色,具有棕色晕轮 粪链球菌金黄色葡萄球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 ATCC6538 ATCC25922 脑心浸液肉汤( BHI) Brain Heart Infusion Broth 用途:用于细菌的增菌培
23、养配方:( g/L) 蛋白胨 10.0 脱水小牛脑浸粉12.5 脱水牛心浸粉5.0 氯化钠5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠2.5 pH 值 7.4 0.2 25原理:蛋白胨、脱水小牛脑浸粉、脱水牛心浸粉提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。用法: 称取本品38.5g, 加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制: 质控菌株接种后于35 0.5培养 24h , 结果如下:菌 名 菌 号 生长状况良好 良好良好 培养特征肉汤混浊肉汤混浊肉汤混浊粪性链球菌乙型溶血性链球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)
24、32223 CMCC(B)32210 ATCC25922 名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 6 页,共 8 页 - - - - - - - - - 脑心浸萃液肉汤Brain Heart Infusion Broth 用途:用于营养苛求细菌的增菌培养配方: (g/L) 月示(shi) 蛋白胨 10.0 牛脑浸出粉10.0 牛心浸出粉9.0 氯化钠5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠2.5 pH 值 7.4 0.2 25原理:月示蛋白胨、牛脑浸出粉、牛心浸出粉提供氮源、维生素
25、和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂。用法:称取本品38.5g, 加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中 , 121 高压灭菌15 分钟 ,备用。质量控制: 在 35 0.5 培养24h,菌 名 菌 号 生长状况良好 良好 良好培养特征肉汤混浊肉汤混浊肉汤混浊粪性链球菌乙型溶血性链球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CMCC(B)32210 ATCC25922 脑心浸液琼脂( BHIA) Brain Heart infusion Agar 用途:用于营养苛求细菌的增菌培养配方:( g/L) 牛脑浸粉 4.0 牛心浸粉 4.0 蛋白胨 5.0 酪
26、蛋白胨16.0 氯化钠5.0 葡萄糖 2.0 磷酸氢二钠2.5 琼脂 13.5 pH 值 7.4 0.2 原理:牛脑浸粉、牛心浸粉、蛋白胨、酪蛋白胨提供氮源、维生素和生长因子;葡萄糖可为多种细菌提供能源;氯化钠维持均衡的渗透压;磷酸氢二钠为缓冲剂,琼脂为凝固剂。用法: 称取本品52.0g, 加热搅拌溶解于1000ml 蒸馏水中 ,121高压灭菌15 分钟 ,备用。25质量控制:控菌株接种后于35 0.5培养 24h 菌 名 菌 号 生长状况良好 良好 良好粪性链球菌乙型溶血性链球菌大肠埃希氏菌CMCC(B)32223 CMCC(B)32210 ATCC25922 Pfizer 肠球菌选择性琼脂
27、( PSE 琼脂) Pfizer Enterococcus Selective Agar 用途:用于粪链球菌的选择性分离和计数(SN 标准)配方: (g/L )蛋白胨 20.0g 酵母浸粉5.0g 牛胆汁物 10.0g 氯化钠5.0g 柠檬酸钠1.0g柠檬酸铁铵0.5g 叠氮化钠0.25g 七叶苷 1.0g 琼脂 15.0g pH 值 7.1 0.2 原理:蛋白胨和酵母浸粉提供氮源、维生素和生长因子;氯化钠维持均衡的渗透压;细菌水解七叶苷与柠檬酸铁铵中铁离子反应形成黑色的6,7- 二羟基香豆素; 柠檬酸钠、 牛胆汁物和叠氮化钠为选择性抑菌剂,抑制非链球菌的细菌;琼脂是培养基的凝固剂。用法: 称
28、取本品57.75 克,加热溶解于1000ml 蒸馏水中, 分装, 121 高压灭菌15 分钟,备用。质量控制:质控菌株接种后,于 35 0.5培养24h, 菌 名 菌 号 生长状况良好 培养名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 7 页,共 8 页 - - - - - - - - - 特征棕黑色,具有棕色晕轮粪链球菌CMCC(B)32223 金黄色葡萄球菌大肠埃希氏菌ATCC6538 ATCC25922 被抑制被抑制 MEI 培养基 MEI Medium 用途:用于一步滤膜法
29、显色检测或计数水中的肠球菌配方:(g/L ) 10.0 蛋白胨15.0 氯化钠1.0 七叶苷0.05 放线菌酮0.15 叠氮化钠30.0 酵母浸粉0.75 显色剂15.0 琼脂pH 值 7.1 0.2 原理:用法:称取本品72.0g , 加热溶解于1000ml 蒸馏水中 ,分装三角瓶 ,每瓶200ml,121 高压灭菌 15 分钟 ,冷 至 50左右时 ,每瓶加入4.8% 萘啶酮酸溶液1ml( 加入几滴0.1N NaOH 溶液溶解 )和 0.4%TTC 溶液 1ml, 混 匀,倾入无菌平皿,备用。名师资料总结 - - -精品资料欢迎下载 - - - - - - - - - - - - - - - - - - 名师精心整理 - - - - - - - 第 8 页,共 8 页 - - - - - - - - -