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1、药剂教研室张娜第六节第六节 脂质体脂质体 Liposomes本节要求本节要求 1. 1. 脂质体的基本概念脂质体的基本概念 2. 2. 脂质体的组成与结构、与胶团的区别脂质体的组成与结构、与胶团的区别 3 3 脂质体的剂型特点和体内作用特点脂质体的剂型特点和体内作用特点 4 4 脂质体的制备方法、质量标准脂质体的制备方法、质量标准Main Contents 脂质体脂质体 脂质体的应用概况脂质体的应用概况 脂质体的组成和结构特点脂质体的组成和结构特点 脂质体的剂型特点脂质体的剂型特点 Microparticles drug delievey systems Macromolecular conj
2、ugates 脂质体脂质体 脂质体（脂质体（liposomesliposomes）是将药物）是将药物 包封于类脂质双分子层内形成的微型泡囊。包封于类脂质双分子层内形成的微型泡囊。 脂质体的应用概况脂质体的应用概况 19711971年英国莱门等人开始将脂质体用于药物载体。年英国莱门等人开始将脂质体用于药物载体。 我国自我国自8080年代开始进行脂质体的研究工作年代开始进行脂质体的研究工作 抗癌药物脂质体抗癌药物脂质体 20002000年，世界脂质体产品销售额为年，世界脂质体产品销售额为1212亿美元。预亿美元。预测至测至20052005年将达年将达3333亿美元，增长率为亿美元，增长率为175%
3、175%。 国外已上市的脂质体药物品种有两性霉素、多柔国外已上市的脂质体药物品种有两性霉素、多柔比星和柔红霉素，均为抗癌药物。抗癌药物脂质比星和柔红霉素，均为抗癌药物。抗癌药物脂质体是脂质体最重要的应用。目前还有约体是脂质体最重要的应用。目前还有约3030种脂质种脂质体抗癌药物正在临床试验或等待批准上市。体抗癌药物正在临床试验或等待批准上市。脂质体抗癌药物产品及研究进展情况脂质体抗癌药物产品及研究进展情况药药品品名名 商商品品名名 进进展展情情况况 阿阿霉霉素素 M My yo oc ce et t 2 20 00 01 1 年年上上市市 D Do ox xi il l 1 19 99 95
4、5 年年上上市市 C Ca ae el ly yx x 2 20 00 02 2 年年上上市市 D Do ox x- -s sl l 临临床床 I II I L LE ED D 临临床床 I I/ /I II I M MC CC C- -4 46 65 5（免免疫疫脂脂质质体体） 临临床床 I I/ /I II I 柔柔红红霉霉素素 D Da au un no oX Xo om me e 1 19 99 96 6 年年上上市市 长长春春新新碱碱 O On nc co o T TC CS S 临临床床 I II I/ /I II II I V Vi in nc ca aX Xo om me e
5、临临床床 I II I 紫紫杉杉醇醇 L LE EP P 临临床床 I II I/ /I II II I 顺顺铂铂 S SP PI I- -7 77 7 临临床床 I II II I 维维甲甲酸酸 A AT TT TA A- -I IV V 临临床床 I II I 羟羟基基喜喜树树碱碱 临临床床 I I 氨氨基基喜喜树树碱碱 临临床床 I I 拓拓扑扑替替康康 L LE E- -S SN N3 38 8 临临床床 I I/ /I II I 依依立立替替康康 L LE E- -G GL L1 14 47 72 21 1 临临床床 I I/ /I II I L Lu ur rt to ot te
6、ec ca an n N NX X- -2 21 11 1, ,S SP PI I- -3 35 55 5, ,O OS SI I- -2 21 11 1 临临床床 I II I 阿阿糖糖胞胞苷苷 D De ep po oC Cy yt t 已已上上市市 对脂质体来说，将对脂质体来说，将靶向因子脂质连接物靶向因子脂质连接物插入插入含药脂质体的外层脂质分子层中，是一种操作含药脂质体的外层脂质分子层中，是一种操作性强的有效的靶向因子连接手段。性强的有效的靶向因子连接手段。脂质体在主动靶向制剂脂质体在主动靶向制剂中的应用中的应用Diagram of synthesize reaction betwe
7、en WGA and PE Transmission electron photomicrograms of insulin liposomesaconventional liposomes, bWGA modified liposomes 脂质体在基因治疗中的应用脂质体在基因治疗中的应用 19871987年年FelgnerFelgner等率先用脂质体作为基因转移等率先用脂质体作为基因转移载体。载体。 阳离子脂质体是应用最多的非病毒基因载体阳离子脂质体是应用最多的非病毒基因载体 。它们一般由带正电荷的脂类与中性脂类按一定它们一般由带正电荷的脂类与中性脂类按一定的摩尔比组成。的摩尔比组成。 阳离
8、子脂质体并不是将阳离子脂质体并不是将 DNA DNA 包裹在其脂质双包裹在其脂质双分子层中分子层中 , , 而是若干阳离子脂质囊泡将而是若干阳离子脂质囊泡将 DNA DNA 链夹在其中链夹在其中 , , 形成片层状结构。形成片层状结构。 脂质体基因转移示意图脂质体基因转移示意图 脂质体的组成和结构特点脂质体的组成和结构特点 一一 脂质体的组成脂质体的组成 脂质体是由磷脂、胆固醇等为膜材包合而成。脂质体是由磷脂、胆固醇等为膜材包合而成。这两种成分是形成脂质体双分子层的基础物质，这两种成分是形成脂质体双分子层的基础物质，具有良好的生物相容性。具有良好的生物相容性。 1 1磷脂类磷脂类 磷脂类包括卵
9、磷脂、脑磷脂、大豆磷脂及磷脂类包括卵磷脂、脑磷脂、大豆磷脂及合成磷脂等都可以作为脂质体的双分子层物质基础。合成磷脂等都可以作为脂质体的双分子层物质基础。 2胆固醇胆固醇 胆固醇与磷脂共同构成脂质体基础物质。胆固醇与磷脂共同构成脂质体基础物质。磷脂结构通式磷脂结构通式 式中：式中：R1、R2 是疏水链，是疏水链，R由由C12C18，可为饱和烃可为饱和烃链或不饱和烃链；链或不饱和烃链；X为亲水头，为亲水头，X不同，则磷脂命名不不同，则磷脂命名不同同 天然磷脂：天然磷脂： 胆碱胆碱+磷脂酸磷脂酸磷脂酰胆碱磷脂酰胆碱(PC)， 即卵磷脂即卵磷脂 乙醇胺乙醇胺+磷脂酸磷脂酸磷脂酰乙醇胺磷脂酰乙醇胺 (P
10、E)，即脑磷脂，即脑磷脂 丝氨酸丝氨酸+磷脂酸磷脂酸磷脂酰丝氨酸磷脂酰丝氨酸 (PS) 合成磷脂：合成磷脂：二棕榈酰二棕榈酰-DL-磷脂酰胆碱（磷脂酰胆碱（DPPC）二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱（二肉豆蔻酰磷脂酰胆碱（DMPC）等。等。胆固醇结构胆固醇结构 磷脂和胆固醇分子排列示意图磷脂和胆固醇分子排列示意图磷脂和胆固醇分子排列磷脂和胆固醇分子排列 把类脂质的醇溶液倒入水面时，醇很快地溶解于水把类脂质的醇溶液倒入水面时，醇很快地溶解于水 而类脂分子则排列在空气一水的界面上而类脂分子则排列在空气一水的界面上 极性部分在水里，亲油的非极性部分则伸向空气中极性部分在水里，亲油的非极性部分则伸向空气中当极性类
11、脂分子被水完全包围时当极性类脂分子被水完全包围时极性基团面向两侧的水相，而非极性的烃链彼此极性基团面向两侧的水相，而非极性的烃链彼此面对面缔合成面对面缔合成双分子层双分子层脂质体双分子层脂质体双分子层脂质体形成示意图脂质体形成示意图 图 9 磷脂在水相中的 3 种结构 脂质体与其包封的药物脂质体与其包封的药物 脂质体半球剖面图脂质体半球剖面图结构特点结构特点 脂质体结构与由表面活性剂构成的胶团不同，后脂质体结构与由表面活性剂构成的胶团不同，后者是由单分子层组成，脂质体由双分子层组成。者是由单分子层组成，脂质体由双分子层组成。 micelle micelle liposomesliposomes
12、 bilayerbilayer胶团与脂质体结构胶团与脂质体结构LiposomesMicelles脂质体与胶团区别脂质体与胶团区别 脂质体脂质体 胶团胶团组成组成磷脂和胆固醇磷脂和胆固醇表面活性剂表面活性剂结构结构双分子层双分子层单分子层单分子层中心区域中心区域水相，可容纳水相，可容纳亲水性药物亲水性药物疏水区，可容纳疏水区，可容纳疏水性药物疏水性药物 二二 脂质体的类型脂质体的类型 单室脂质体（单室脂质体（ SUVs ）大单室脂质体（大单室脂质体（LUVs）多室脂质体多室脂质体(MLVs)大多孔脂质体大多孔脂质体(MVVs)按结构按结构脂质体脂质体单室脂质体单室脂质体( unilamellar
13、 vesicles, ULV) 球径0.020.08m为小单室脂质体(single unilamellar vesicles, SUV)， 0.11m为大单室脂质体(large unilamellar vesicles, LUV) ， 水溶性药物的溶液只被一层类脂质双分子层所包封，脂溶性药物则分散于双分子层中。 凡经超声波分散的脂质体悬液，绝大部分为单室脂质体。多室脂质体多室脂质体(multilamellar vesicles, MLV) 球径 15m， 有几层脂质双分子层将包含的药物 (水溶性药物)的水膜隔开，形成不均匀的聚合体， 脂溶性药物则分散于几层分子层中。 大多孔脂质体大多孔脂质体(
14、Multivesicular vesicles, MVV) 球径约0.130.06m，单层状， 比单室质体可多包封10倍的药物。脂质体分类脂质体分类 按结构按结构 单室和多室脂质体示意图单室和多室脂质体示意图脂质体电镜照片脂质体电镜照片纳米脂质体呈蓝色乳光纳米脂质体呈蓝色乳光 二二 脂质体的类型脂质体的类型按性能按性能热敏脂质体热敏脂质体pH敏感脂质体敏感脂质体超声波敏感脂质体超声波敏感脂质体光敏脂质体光敏脂质体磁性脂质体磁性脂质体特殊性能脂质体特殊性能脂质体脂质体脂质体一般脂质体一般脂质体SUVs LUVs MLVs MVVs二二 脂质体的类型脂质体的类型 脂质体脂质体按荷电性按荷电性中性脂
15、质体中性脂质体负电性脂质体负电性脂质体正电性脂质体正电性脂质体三三 脂质体的理化性质脂质体的理化性质 （一）相变温度（一）相变温度 脂质体膜的性质与介质温度关系密切。当温度升高时，脂质体膜的性质与介质温度关系密切。当温度升高时，磷脂分子中酰基侧链从磷脂分子中酰基侧链从有序排列变成无序排列有序排列变成无序排列，从而引，从而引起膜性质的变化：起膜性质的变化： 由胶晶态变成液晶态，膜的横切面增加，双分子层厚度由胶晶态变成液晶态，膜的横切面增加，双分子层厚度减少，膜流动性增加，减少，膜流动性增加， 发生这种转变时的温度称为相变温度。发生这种转变时的温度称为相变温度。 每种磷脂有其特有的相变温度。每种磷
16、脂有其特有的相变温度。三三 脂质体的理化性质脂质体的理化性质 膜的流动性是脂质体的重要性质，流动性与膜的流动性是脂质体的重要性质，流动性与药物释放密切相关。药物释放密切相关。 胆固醇被称为膜流动性调节剂，因为低于相胆固醇被称为膜流动性调节剂，因为低于相变温度时，胆固醇的存在增加了膜的无序性，变温度时，胆固醇的存在增加了膜的无序性，增加膜的流动性；增加膜的流动性； 相变温度以上时，胆固醇减少膜酰基侧链的相变温度以上时，胆固醇减少膜酰基侧链的无序性，减少膜的流动性。无序性，减少膜的流动性。 （二）脂质体的荷电性（二）脂质体的荷电性 荷电磷脂制备的脂质体荷电。荷电磷脂制备的脂质体荷电。 含磷脂酸（含
17、磷脂酸（PA）和磷脂酰丝氨酸（和磷脂酰丝氨酸（PS）的脂质体荷的脂质体荷负电，负电， 含碱基（胺基）磷脂的脂质体荷正电，含碱基（胺基）磷脂的脂质体荷正电， 不含离子的脂质体电中性。不含离子的脂质体电中性。按荷电按荷电性分类？性分类？ （二）脂质体的荷电性（二）脂质体的荷电性 阳离子脂质体阳离子脂质体作为药物的载体比传统脂质体有利，作为药物的载体比传统脂质体有利， 它与带负电的细胞表面有很强的亲合作用，它与带负电的细胞表面有很强的亲合作用， 有利于药物的被吸收。有利于药物的被吸收。 阳离子脂质体是应用最多的非病毒基因载体阳离子脂质体是应用最多的非病毒基因载体 （二）脂质体的荷电性（二）脂质体的荷
18、电性 某些阳离子脂质体能专一性靶向肺等器官的内皮某些阳离子脂质体能专一性靶向肺等器官的内皮细胞。细胞。 药物和阳离子脂质体相互作用时，不仅同样可包药物和阳离子脂质体相互作用时，不仅同样可包埋于脂质体的囊泡内，埋于脂质体的囊泡内， 此外也可由于阳离子脂质体表面的正电荷与带负此外也可由于阳离子脂质体表面的正电荷与带负电荷的药物分子产生静电吸附作用，电荷的药物分子产生静电吸附作用， 多肽类药物分子中的疏水结构可插入脂质体的脂多肽类药物分子中的疏水结构可插入脂质体的脂双层、形成稳定结构。双层、形成稳定结构。 脂质体的剂型特点脂质体的剂型特点1 1 脂质体具有生物相容性脂质体具有生物相容性 脂质体的剂型
19、特点脂质体的剂型特点 2. 制备工艺简单，适宜工业大生产。制备工艺简单，适宜工业大生产。 脂质体的剂型特点脂质体的剂型特点3 3 同时装载水溶性和脂溶性药物同时装载水溶性和脂溶性药物 脂质体的剂型特点脂质体的剂型特点 4 药物以非共价键结合的方式被包裹，有利于药物药物以非共价键结合的方式被包裹，有利于药物释放。释放。 5 脂质体的物理化学稳定性较差。脂质体的物理化学稳定性较差。 脂质体的体内作用特点脂质体的体内作用特点 1. 体内分布靶向性被动靶向主动靶向 脂质体易于连接靶向因子脂质体易于连接靶向因子脂质体主动靶向性脂质体主动靶向性2药物作用延效性 许多药物在体内由于被迅速代谢或排泄而使许多药
20、物在体内由于被迅速代谢或排泄而使其体内作用时间短。其体内作用时间短。 将药物包封成脂质体，可减少肾排泄和代谢将药物包封成脂质体，可减少肾排泄和代谢而延长药物在血液中的滞留时间，使药物在而延长药物在血液中的滞留时间，使药物在体内缓慢释放，从而延长药物的作用时间。体内缓慢释放，从而延长药物的作用时间。 3. 生物相容性 因脂质体是类似生物膜结构的泡囊，具有很好的细因脂质体是类似生物膜结构的泡囊，具有很好的细胞亲和性与组织相容性。胞亲和性与组织相容性。 它可长时间吸附于靶细胞周围，使药物能充分向靶它可长时间吸附于靶细胞周围，使药物能充分向靶细胞渗透。细胞渗透。 脂质体也可通过融合进入细胞内脂质体也可
21、通过融合进入细胞内 4降低药物毒性 药物被脂质体包封后，主要被单核药物被脂质体包封后，主要被单核巨噬细巨噬细胞系统的巨噬细胞所吞噬而摄取，且在肝、胞系统的巨噬细胞所吞噬而摄取，且在肝、脾和骨髓等单核脾和骨髓等单核- -巨噬细胞较丰富的器官中浓巨噬细胞较丰富的器官中浓集，而使药物在心、肾中累积量比游离药物集，而使药物在心、肾中累积量比游离药物低得多。低得多。4降低药物毒性 如果将对心、肾有毒性的药物或对正常细胞如果将对心、肾有毒性的药物或对正常细胞有毒性的抗癌药物包封成脂质体，就可明显有毒性的抗癌药物包封成脂质体，就可明显降低药物的毒性。降低药物的毒性。 两性霉素两性霉素B B对多数哺乳动物的毒
22、性较大，制成对多数哺乳动物的毒性较大，制成两性霉素两性霉素B B脂质体，可使其毒性大大降低而不脂质体，可使其毒性大大降低而不影响抗真菌活性。影响抗真菌活性。5提高药物稳定性 一些不稳定的药物被脂质体包封后可受到脂质体双一些不稳定的药物被脂质体包封后可受到脂质体双层膜的保护。层膜的保护。 如青霉素如青霉素G G或或V V的钾盐是对酸不稳定的抗生素，口服的钾盐是对酸不稳定的抗生素，口服易被胃酸破坏，制成脂质体则可减少胃酸对其的破易被胃酸破坏，制成脂质体则可减少胃酸对其的破坏，提高口服的吸收效果。坏，提高口服的吸收效果。 脂质体的制备技术脂质体的制备技术 注入法注入法 薄膜分散法薄膜分散法 超声波分
23、散法超声波分散法 逆相蒸发法逆相蒸发法 冷冻干燥法冷冻干燥法1注入法注入法 将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物其溶于有机将磷脂与胆固醇等类脂质及脂溶性药物其溶于有机溶剂中（一般多采用乙醚），溶剂中（一般多采用乙醚）， 然后将此药液经注射器缓缓注入加热至然后将此药液经注射器缓缓注入加热至50（并用（并用磁力搅拌）的磷酸盐缓冲液（或含有水溶性药物）磁力搅拌）的磷酸盐缓冲液（或含有水溶性药物）中，中， 加完后，不断搅拌至乙醚除尽为止，加完后，不断搅拌至乙醚除尽为止， 即制得大多孔脂质体，其粒径较大，不适宜静脉注即制得大多孔脂质体，其粒径较大，不适宜静脉注射。射。 再将脂质体混悬液通过高压乳匀机二次，
24、则所得的再将脂质体混悬液通过高压乳匀机二次，则所得的成品。成品。 将磷脂，胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶于将磷脂，胆固醇等类脂质及脂溶性药物溶于氯仿（或其他有机溶剂中）然后将氯仿溶液氯仿（或其他有机溶剂中）然后将氯仿溶液在一玻璃瓶中旋转蒸发，在瓶内壁上形成一在一玻璃瓶中旋转蒸发，在瓶内壁上形成一薄膜；薄膜； 将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液中，加入烧将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液中，加入烧瓶中不断搅拌，即得脂质体。瓶中不断搅拌，即得脂质体。 2薄膜分散法薄膜分散法2薄膜分散法薄膜分散法 1 多用于脂溶性药物脂质体的制备多用于脂溶性药物脂质体的制备 2 制备方法简单，脂溶性药物包封率较高制备方法简单，脂
25、溶性药物包封率较高 3 多室脂质体，粒径较大，若需减小粒径，多室脂质体，粒径较大，若需减小粒径， 需经超声或高压乳匀处理需经超声或高压乳匀处理 将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液 磷脂，胆固醇与脂溶性药物共溶于有机溶剂的溶液，磷脂，胆固醇与脂溶性药物共溶于有机溶剂的溶液， 混合，搅拌，蒸发除去有机溶剂混合，搅拌，蒸发除去有机溶剂 残液以超声波处理，然后分离出脂质体再混悬于磷残液以超声波处理，然后分离出脂质体再混悬于磷酸盐缓冲液中，制成脂质体的混悬型注射剂。酸盐缓冲液中，制成脂质体的混悬型注射剂。 经超声波处理大多为单室脂质体经超声波处理大多为单室脂质体3超声波分散法超声波
26、分散法4逆相蒸发法逆相蒸发法 将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液将水溶性药物溶于磷酸盐缓冲液 磷脂，胆固醇与脂溶性药物共溶于有机溶剂的溶液，磷脂，胆固醇与脂溶性药物共溶于有机溶剂的溶液， 混合，超声处理直至形成稳定的混合，超声处理直至形成稳定的W/O乳剂乳剂 减压蒸发除去有机溶剂减压蒸发除去有机溶剂 达到胶态后，加入磷酸盐缓冲液，旋转使器壁上凝达到胶态后，加入磷酸盐缓冲液，旋转使器壁上凝胶脱落，继续减压蒸发除去有机溶剂胶脱落，继续减压蒸发除去有机溶剂 脂质体水性混悬液脂质体水性混悬液4逆相蒸发法逆相蒸发法磷脂磷脂胆固醇胆固醇脂溶性药物脂溶性药物有机溶剂有机溶剂水溶性药物水溶性药物磷酸盐缓冲液磷酸盐缓
27、冲液混合混合4逆相蒸发法逆相蒸发法超超 声声W/O乳剂乳剂4逆相蒸发法逆相蒸发法W/O乳剂乳剂蒸发蒸发有机溶剂有机溶剂4逆相蒸发法逆相蒸发法凝胶凝胶磷酸盐磷酸盐缓冲液缓冲液蒸发蒸发有机溶剂有机溶剂4逆相蒸发法逆相蒸发法Liposomes4逆相蒸发法逆相蒸发法 本法特点是包封的药物量大，本法特点是包封的药物量大， 体积包封率可大于超声波分散法体积包封率可大于超声波分散法3030倍，倍， 适合于包封水溶性药物及大分子生物活性物质如各适合于包封水溶性药物及大分子生物活性物质如各种抗生素、胰岛素、免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核种抗生素、胰岛素、免疫球蛋白、碱性磷脂酶、核酸等酸等。 5冷冻干燥法冷冻干燥法
28、脂质体亦可用冷冻干燥法制备，对遇热不稳脂质体亦可用冷冻干燥法制备，对遇热不稳定的药物尤为适宜。先按上述方法制成脂质定的药物尤为适宜。先按上述方法制成脂质体悬液后分装于小瓶中，冷冻干燥制成冻干体悬液后分装于小瓶中，冷冻干燥制成冻干燥制剂，惟全部操作应在无条件菌条件下进燥制剂，惟全部操作应在无条件菌条件下进行。行。5冷冻干燥法冷冻干燥法 Payne用冷冻干燥法制备前体脂质体，它为一干燥用冷冻干燥法制备前体脂质体，它为一干燥且具有良好流动性的颗粒，一旦加水水合，即可分且具有良好流动性的颗粒，一旦加水水合，即可分散成等胀的多层脂质体混悬液，适用于静脉给药或散成等胀的多层脂质体混悬液，适用于静脉给药或用
29、于其它给药途径。用于其它给药途径。 另一方法为将脂质吸附于极细的水溶性载体，如粉另一方法为将脂质吸附于极细的水溶性载体，如粉末氯化钠、山梨醇或其它的聚合糖类，即可形成高末氯化钠、山梨醇或其它的聚合糖类，即可形成高度分散的前体脂质体。与水接触时，脂质溶胀而载度分散的前体脂质体。与水接触时，脂质溶胀而载体迅速溶解，脂质在水相中形成脂质体。体迅速溶解，脂质在水相中形成脂质体。 脂质体的质量评价脂质体的质量评价 1 大小与形态观察大小与形态观察 脂质体的粒径对其性质影响很大，因而测定粒径非脂质体的粒径对其性质影响很大，因而测定粒径非常重要。常用方法包括：常重要。常用方法包括： 电镜法：电镜法： 热力学
30、光散射法：热力学光散射法：Zetasizer 3000SH激光测粒仪激光测粒仪（Malvern Instruments Ltd） 2 主药含量测定和释放度测定主药含量测定和释放度测定 透析管法和离心法透析管法和离心法等可用来测定释放度。等可用来测定释放度。 3 包封率测定包封率测定 脂质体包封率的测定方法很多，有离心法、透析法、脂质体包封率的测定方法很多，有离心法、透析法、凝胶柱层析法、导数光谱法等。其中凝胶柱层析法，凝胶柱层析法、导数光谱法等。其中凝胶柱层析法，具有分子筛作用，能使混合物依据分子大小不同而具有分子筛作用，能使混合物依据分子大小不同而分离，广泛用于脂质体的分离及包封率的测定。分
31、离，广泛用于脂质体的分离及包封率的测定。凝胶柱层析法凝胶柱层析法 用于分离脂质体时，脂质体粒子将首先流出，随后用于分离脂质体时，脂质体粒子将首先流出，随后游离药物也会被洗脱下来，游离药物也会被洗脱下来， 因此，游离药物在凝胶柱上保留时间越长，流出越因此，游离药物在凝胶柱上保留时间越长，流出越慢，越有利于与脂质体粒子的分离。慢，越有利于与脂质体粒子的分离。 三种凝胶流出曲线图三种凝胶流出曲线图 (n=3 ) 游离药物在游离药物在Sephadex G-50（100300）柱上的保留时间较长，从第六流份开始大量流柱上的保留时间较长，从第六流份开始大量流出，而在出，而在Sephadex G-50（50
32、100）和和Sephadex LH-20上均从第三流份开始大量流上均从第三流份开始大量流出。出。 经三种凝胶的洗脱曲线测定，可初步选定用经三种凝胶的洗脱曲线测定，可初步选定用Sephadex G-50（100300）测定包封率，测定包封率，洗脱体积可初步定为洗脱体积可初步定为10ml。包封率计算：包封率计算：100%WWWQ100%WW%Q总游总W总包w或1) 重量包封率重量包封率Qw 是指包入脂质体内的药物量与投料量的是指包入脂质体内的药物量与投料量的重量百分比。重量百分比。 式中式中W总总、W包包和和W游游分别表示投料量、包封于脂质体的药分别表示投料量、包封于脂质体的药量及未包入脂质体的药
33、量。量及未包入脂质体的药量。 2) 体积包封率体积包封率Qv100%VVW总类v是指制剂中某类粒子体积是指制剂中某类粒子体积V类类与总体粒子与总体粒子总总体积百分比，体积百分比，式中式中V总总和和V类类分别为脂质体制剂中总体粒子的体积和某类分别为脂质体制剂中总体粒子的体积和某类粒子的体积。粒子的体积。Qv测定方法有凝胶过滤法和显微镜法等。测定方法有凝胶过滤法和显微镜法等。 3) 药脂包封比（药脂包封比（Ew）类脂脂W类脂游总W或WW%E100%WWW%EEw是指一定重量的类脂（包括是指一定重量的类脂（包括PC、CH等）所包封药物重等）所包封药物重量的百分比，量的百分比，式中式中W类脂类脂处方类
34、脂总量处方类脂总量W包包包封药物重量。包封药物重量。4 渗漏率测定渗漏率测定100%WWWQ%100%WWW%Q包贮包包始游总游渗或渗漏率表示脂质体贮存期间包封率的变化情况，定义为渗漏率表示脂质体贮存期间包封率的变化情况，定义为贮存期包封量的减少与刚制备脂质体的包封量之比贮存期包封量的减少与刚制备脂质体的包封量之比式中式中Q渗渗渗漏率；渗漏率；W总游总游定期测得游离药物量；定期测得游离药物量；W始游始游制备当时测得游离药物量；制备当时测得游离药物量；W包包制备当时包制备当时包封量；封量；W贮贮定期测得包封量。定期测得包封量。4 渗漏率测定渗漏率测定 渗漏率渗漏率测定方法是一定条件下贮存（灭菌）
35、脂质体，测定方法是一定条件下贮存（灭菌）脂质体，定期（时）取样定期（时）取样 用测定包封率的方法（主要用凝胶柱层析）测定脂用测定包封率的方法（主要用凝胶柱层析）测定脂质体包封量或游离药物量质体包封量或游离药物量 与开始包封或游离药物量比较，再由式计算渗漏率。与开始包封或游离药物量比较，再由式计算渗漏率。5药物体内分布 通常可以小鼠为受试对象，通常可以小鼠为受试对象， 将脂质体静注给药，测定不同时间血药浓度，将脂质体静注给药，测定不同时间血药浓度， 并定时处死剖取脏器组织，捣碎分离取样，并定时处死剖取脏器组织，捣碎分离取样， 以同剂量药物作对照，比较各种组织的滞留量，进以同剂量药物作对照，比较各
36、种组织的滞留量，进行动力学处理，以评价脂质体在动物体内的分布。行动力学处理，以评价脂质体在动物体内的分布。 5药物体内分布 脂质体以静脉给药时，能选择地集中于单核脂质体以静脉给药时，能选择地集中于单核- -巨噬细巨噬细胞系统，胞系统，7070-89-89集中于肝、脾。集中于肝、脾。 如卡氮芥脂质体注射液在小鼠尾静脉注射后卡氮芥如卡氮芥脂质体注射液在小鼠尾静脉注射后卡氮芥主要被肝、脾摄取，主要被肝、脾摄取，4040minmin在肝中达峰值，在肝中达峰值，8 8h h仍保持仍保持较高的滞留量，较同一时间的卡氮芥水溶液摄取量较高的滞留量，较同一时间的卡氮芥水溶液摄取量提高提高1010倍。倍。 脂质体
37、的作用机制和给药途径脂质体的作用机制和给药途径 ( (一一) )脂质体与细胞的相互作用脂质体与细胞的相互作用 脂质体属胶体系统，具有靶向和缓释作用，从而可脂质体属胶体系统，具有靶向和缓释作用，从而可提高药物药效，降低不良反应。提高药物药效，降低不良反应。 脂质体与细胞膜的组成相似，能显著增强细胞摄取，脂质体与细胞膜的组成相似，能显著增强细胞摄取，延缓和克服耐药性。延缓和克服耐药性。 脂质体在体内细胞水平上的作用机制有吸附、脂交脂质体在体内细胞水平上的作用机制有吸附、脂交换、内吞、融合等换、内吞、融合等 ( (一一) )脂质体与细胞的相互作用脂质体与细胞的相互作用 1 1吸附吸附 吸附是脂质体作
38、用的开始，是普通物理吸附，吸附是脂质体作用的开始，是普通物理吸附， 受粒子大小、密度和表面电荷等因素的影响。受粒子大小、密度和表面电荷等因素的影响。 如脂粒与细胞表面电荷相反，吸附作用大。如脂粒与细胞表面电荷相反，吸附作用大。( (一一) )脂质体与细胞的相互作用脂质体与细胞的相互作用 2 2脂交换脂交换 脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换。脂质体的脂类与细胞膜上脂类发生交换。 其交换过程包括：脂质体先被细胞其交换过程包括：脂质体先被细胞吸附吸附，然后在细，然后在细胞表面蛋白的介导下，特异性交换脂类的极性基团胞表面蛋白的介导下，特异性交换脂类的极性基团或非特异性地交换酰基链。或非特异性地交换酰
39、基链。 交换仅发生在脂质体双分子层中外部单分子层和细交换仅发生在脂质体双分子层中外部单分子层和细胞质膜外部的单分子层之间，而胞质膜外部的单分子层之间，而脂质体内药物并未脂质体内药物并未进入细胞进入细胞。脂质体可与血浆中各种组织细胞相互作。脂质体可与血浆中各种组织细胞相互作用进行脂交换。用进行脂交换。( (一一) )脂质体与细胞的相互作用脂质体与细胞的相互作用 3 3内吞内吞 内吞作用内吞作用( (endocytosisendocytosis) )是脂质体的主要作用机制。是脂质体的主要作用机制。 脂质体被单核脂质体被单核巨噬细胞系统细胞，特别是巨噬细巨噬细胞系统细胞，特别是巨噬细胞作为外来异物吞
40、噬，称内吞作用。胞作为外来异物吞噬，称内吞作用。 通过内吞，脂质体能特异地将药物浓集于作用的细通过内吞，脂质体能特异地将药物浓集于作用的细胞房室内胞房室内，也可使不能通过浆膜的药物达到溶酶体，也可使不能通过浆膜的药物达到溶酶体内。内。被动靶向被动靶向( (一一) )脂质体与细胞的相互作用脂质体与细胞的相互作用 4 4融合融合 融合融合( (fusion)fusion)指脂质体的膜材与细胞膜的构成物相指脂质体的膜材与细胞膜的构成物相似而融合进入细胞内，然后经溶酶体消化释放药物。似而融合进入细胞内，然后经溶酶体消化释放药物。 体外证明脂质体可以将生物活性大分子如酶、体外证明脂质体可以将生物活性大分
41、子如酶、DNADNA、环磷酸腺苷环磷酸腺苷( (cAMP)cAMP)、mRNAmRNA或毒素以细胞融合方式传或毒素以细胞融合方式传递到培养细胞内。递到培养细胞内。( (一一) )脂质体与细胞的相互作用脂质体与细胞的相互作用 4融合 对产生耐药的菌株或癌细胞群，用脂质体载药可对产生耐药的菌株或癌细胞群，用脂质体载药可显著提高抗菌或抗癌效果；显著提高抗菌或抗癌效果； 大分子药物被包封于脂质体往往可以提高口服药大分子药物被包封于脂质体往往可以提高口服药效；溶酶体膜的通透性有限，可阻止大分子药物效；溶酶体膜的通透性有限，可阻止大分子药物释放至细胞内其它部位，而脂质体载大分子药物释放至细胞内其它部位，而
42、脂质体载大分子药物由于融合作用则往往不受限制。由于融合作用则往往不受限制。细胞膜对脂质体的吸附和融合细胞膜对脂质体的吸附和融合a a 吸附吸附 b b 融合融合脂质体的吸附和内吞脂质体的吸附和内吞(二)给药途径 脂质体在体内可完全生物降解，一般无毒。脂质体在体内可完全生物降解，一般无毒。 脂质体在体内的作用受给药途径的影响。脂质体在体内的作用受给药途径的影响。 用不同的方法，可制备成各种大小和具有不同表面用不同的方法，可制备成各种大小和具有不同表面性质的脂质体，因而脂质体可适用于多种给药途径。性质的脂质体，因而脂质体可适用于多种给药途径。 (二)给药途径 1 1静脉注射静脉注射 这是脂质体常见
43、的给药途径。这是脂质体常见的给药途径。 脂质体静脉注射后迅速从血液循环中消除，其消除脂质体静脉注射后迅速从血液循环中消除，其消除率与脂质体大小及表面所带电荷有关。率与脂质体大小及表面所带电荷有关。 大的脂质体比小的消除快。大的脂质体比小的消除快。 (二)给药途径 2肌内和皮下注射 脂质体经肌内或皮下注射后，一般缓慢从注射部位脂质体经肌内或皮下注射后，一般缓慢从注射部位消除，消除， 随后吸收进入淋巴管，随后吸收进入淋巴管， 最后进入血液循环并广泛分布于肝、脾的单核最后进入血液循环并广泛分布于肝、脾的单核巨巨噬细胞系统细胞中。噬细胞系统细胞中。 (二)给药途径 2肌内和皮下注射 皮下注射多室脂质体
44、不易被淋巴结摄取，且从注射皮下注射多室脂质体不易被淋巴结摄取，且从注射部位消除很慢，包封于脂质体的药物以恒定速率进部位消除很慢，包封于脂质体的药物以恒定速率进入循环系统。入循环系统。 而电中性及带正电荷的小单室脂质体被局部淋巴结而电中性及带正电荷的小单室脂质体被局部淋巴结摄取，通过淋巴管从注射部位进人全身循环。摄取，通过淋巴管从注射部位进人全身循环。 (二)给药途径 3经皮给药 脂质体能够使亲脂性、难透过皮肤的大分子药物以脂质体能够使亲脂性、难透过皮肤的大分子药物以治疗量透人皮肤并可维持恒定的释放。治疗量透人皮肤并可维持恒定的释放。 也可使药物滞留在表皮与真皮之间起局部效应，提也可使药物滞留在
45、表皮与真皮之间起局部效应，提高生物利用度，而且无全身的副作用。高生物利用度，而且无全身的副作用。 传递体传递体(二)给药途径 4鼻腔给药 脂质体鼻腔滴人给药后很快转移到支气管处，脂质体鼻腔滴人给药后很快转移到支气管处， 如粒径太大则沉积在无纤毛的鼻腔前部，影响吸收。如粒径太大则沉积在无纤毛的鼻腔前部，影响吸收。 (二)给药途径 5肺部给药 一般脂质体静脉注射后，只有少量分布到肺，因而一般脂质体静脉注射后，只有少量分布到肺，因而不能在肺中达到治疗的有效浓度，通常采用雾化经不能在肺中达到治疗的有效浓度，通常采用雾化经肺吸入的脂质体气雾剂。肺吸入的脂质体气雾剂。 如控制脂质体的粒径和对其进行表面修饰
46、或被包裹如控制脂质体的粒径和对其进行表面修饰或被包裹的药物本身具有特殊的理化性质，则也可以达到肺的药物本身具有特殊的理化性质，则也可以达到肺靶向分布的目的。靶向分布的目的。 (二)给药途径 6眼部给药 脂质体与外眼组织、结膜和巩膜具有较强的亲和力。脂质体与外眼组织、结膜和巩膜具有较强的亲和力。滴眼后迅速分散，增强药物对角膜的穿透性。滴眼后迅速分散，增强药物对角膜的穿透性。 激素类药物在眼部应用时由于脂质体的包封可减少激素类药物在眼部应用时由于脂质体的包封可减少其对循环系统的副作用。其对循环系统的副作用。(二)给药途径 7口服给药 有些药物以游离形式通过胃肠道时，不能被吸收或有些药物以游离形式通
47、过胃肠道时，不能被吸收或易遭到破坏。但包封于脂质体后即可通过胃肠道吸易遭到破坏。但包封于脂质体后即可通过胃肠道吸收。收。 根据脂质体缓释和保护药物的作用，可应用脂质体根据脂质体缓释和保护药物的作用，可应用脂质体延长水溶性药物的作用或用以包封胃肠道不吸收或延长水溶性药物的作用或用以包封胃肠道不吸收或不稳定的药物。不稳定的药物。 (二)给药途径 7口服给药 水难溶性药物往往脂溶性很高，难于分散于胃肠液水难溶性药物往往脂溶性很高，难于分散于胃肠液中，从而吸收很差。中，从而吸收很差。 包封于脂质体后，脂质体可形成水性分散液，增加包封于脂质体后，脂质体可形成水性分散液，增加药物在胃肠液中的分散，即可通过胃肠道吸收。药物在胃肠液中的分散，即可通过胃肠道吸收。复习题 1.1.脂质体的基本概念、组成与结构、与脂质体的基本概念、组成与结构、与胶团的区别胶团的区别 2脂质体的剂型特点和体内作用特点脂质体的剂型特点和体内作用特点 3脂质体的制备方法、质量标准谢谢 谢谢