微生物检验实验室奈瑟菌属标准操作规程.doc

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1、微生物检验实验室奈瑟菌属标准操作规程菌名 葡萄糖 麦芽糖 乳糖 蔗糖 硝酸盐还原 DNA酶淋病奈瑟菌 + - - - - -脑膜炎奈瑟菌 + + - - - -卡他莫拉菌 - - - - + +1. 概述奈瑟菌属是一群触酶、氧化酶试验均阳性的革兰阴性球菌,包括脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、解乳糖奈瑟菌、灰色奈瑟菌、粘液奈瑟菌等11个种,临床上以脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌最为重要。2.标本类型血液、脑脊液、分泌物、痰、穿刺液、脓液标本。3.鉴定3.1 形态与染色 革兰阴性双球菌,肾形或咖啡豆状,常成双排列,凹面相对。3.2 培养特性 初次分离时需在5%10%二氧化碳环境中生长。在血琼脂平板上形成灰色、

2、光滑、湿润、有光泽、透明或半透明、边缘整齐、不溶血的菌落,直径12mm;在巧克力琼脂平板上,形成圆形、凸起、湿润、有光泽、灰蓝色的似露滴状菌落。3.3生化反应:氧化酶、触酶试验阳性;分解葡萄糖和麦芽糖,不分解蔗糖、甘露醇及乳糖;尿素酶、吲哚及硝酸盐还原试验均为阴性。3.4鉴别要点:3.4.1本菌特征:革兰阴性双球菌,氧化酶和触酶试验阳性,分解葡萄糖、硝酸盐还原试验阴性。3.4.2奈瑟菌与相似菌的鉴别;见表5-37。表5-37 奈瑟菌与相似菌鉴别的关键性试验注:“+”为90%以上菌株阳性,“-”为90%以上菌株阴性,“V”为11%89%菌株阳性。3.4.3 淋病奈瑟菌和卡他莫拉菌的鉴别 淋病奈瑟

3、菌分解葡萄糖,硝酸盐还原试验阴性,而卡他莫拉菌则相反。两者虽可根据标本来源加以区分,但并非绝对,因为通过性行为,卡他莫拉菌也可引起尿道炎,而淋病奈瑟菌也能引起咽炎,应引起注意。涂片不典型,作淋病奈瑟菌培养,同时作普通培养,有细菌生长可排除淋病奈瑟菌。3.5 操作步骤3.5.1 涂片染色 观察菌落特征,在血平板上挑取可以菌落,涂片染色镜检。3.5.2氧化酶试验 参见触酶试验标准操作规程3.5.3鉴定 从血平板上挑取纯菌落,用微生物鉴定仪或传统生化反应进行细菌鉴定。4.药敏 参见药物敏感性试验标准操作规程及CLSI M100-S20最新版本文件.5.质量控制参见质量控制程序6.检验结果解释与分析脑

4、膜炎奈瑟菌对青霉素、磺胺类、链霉素和金霉素敏感。产酶株引起感染应考虑用头孢曲松或头孢噻肟替代。检出B-内酰胺类酶阳性的淋病奈瑟菌则提示青霉素、氨苄西林、阿莫西林耐药。7.临床意义脑膜炎奈瑟菌存在于携带者和脑膜炎患者的鼻咽部,通过飞沫经空气传播,冬末春初为流行高峰。感染者为幼儿和青少年,感染后多数患者呈携带状态或隐性感染。少数出现上呼吸道感染症状,仅极少数发展成败血症,进而累及脑膜、脊髓膜,形成化脓性脑脊髓炎。8. 鉴定流程菌落观察:灰色、湿润、透明或半透明涂片染色:G-双球菌,肾形或咖啡豆状脑膜炎奈瑟菌+麦芽糖-淋病奈瑟菌氧化酶和触酶试验阳性参考文献 1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-GL23;2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南.20082 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:上海科学技术出版社,20073 叶应妩,王毓三,申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京:东南大学出版社,20064 MurrayPR.Manual O/F Clinical Mircrobilogy.9th ed.Washington:ASM Press,20075 ISO 15189:2007医学实验室-质量和能力认可准则.2007编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人:

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