微生物检验实验室检验后操作程序.doc

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1、微生物检验实验室检验后操作程序微生物检验实验结果报告程序265微生物检验实验室危急值报告程序266微生物检验实验室传染病报告程序267微生物检验实验室资料、数据保持和备份程序268微生物检验实验室更该报告程序269微生物检验实验室检验后标本管理程序270微生物检验实验室菌种保存程序27119XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书结果报告程序文件编号:XXX-JY-CZ-WSW-0601版本:20140601生效日期:20140615共 1 页 1. 目的规范结果报告程序,确保结果报告的准确性。2. 适用范围微生物检验报告单。3. 职责 报告审核。4. 程序4.1微生物实验室各岗位检验人员完

2、成报告,由负责人或指定人员审核。4.2 只有当质控结果符合要求时,才可发出临床报告,否则应重新测定。4.3 细菌鉴定应报告到种,不能鉴定的细菌应尽可能鉴定到属。药敏感试验应严格遵循CLSI标准,报告敏感(S)、中介(I)、耐药(R)。4.4 分泌物、尿液、引流液等标本培养48小时未见可疑菌落,则报告“培养两日无菌生长”。4.5 脑脊液、穿刺液等标本培养4872h未见可疑菌落,则报告“培养2或3日无细菌生长”。4.6 痰液或咽拭子标本培养至48h为检出致病菌,则报告“正常菌群生长”。4.7粪便或肛门拭子等肠道标本培养至48h未见可疑菌落,则根据申请项目报告“无*菌生长”,如“无沙门菌、志贺菌生长

3、”。4.8 拭子、分泌物、尿液、引流液等真菌标本培养 每日观察培养基,结果连续观察7日未见可疑菌落,则报告“未培养出酵母样真菌”。4.9 分枝杆菌检验标本培养 每周观察12次培养基斜面,结果连续观察8周未发现可疑菌落生长,报告“未培养出分枝杆菌”。4.10 定性结果为“阴性”或“阳性”报告;定量或半定量项目,阳性结果应报告最高稀释度,阴性报告应报最低稀释度。4.11 报告内容应包括姓名、性别、年龄、送检项目、标本类型、样本号、结果、标本接受日期、报告日期、操作者和审核者的签名等。4.12 报告单应及时发出。 门诊病人报告单由本人领取,病区报告单由专人送至各病区,并签收。4.13 电话报告结果时

4、,应先确认对方身份,核对病人姓名、病区床号、检测项目等情况,方可报告,并告知对方检测结果以最终报告为准。4.14 当病人要求需邮寄报告时,应由病人本人或家属填写地址及邮政编码等。4.15 实验室工作人员应为病人的检测结果保密,不得提供给非相关人员。4.16 检测结果的报告应准确、客观和及时,禁止虚假报告。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则(ISO 15189:2007).2008编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人: XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室危急值报告程序文件编号:XXX-JY-C

5、Z-WSW-0602版本:20140601生效日期:20140615共 1 页 1. 目的规范危急值报告程序,及时报告结果。2. 适用范围HBVDNA、CTDNA阳性。3. 职责 微生物检验检验检验室的工作人员应当及时报告危急值结果。4. 操作程序4.1 结果阳性时,首先对检测过程进行仔细检查,排除污染。4.2 核实后将结果报告临床并记录在危急值报告记录表,报告时间具体到时、分。并做好相应记录,如报告结果、报告者工号、病区接电话者工号等。 4.3 做好相应记录,如报告结果、报告者姓名、病区接电话者姓名等。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认

6、可准则(ISO 15189:2007).2008编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人: XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室传染病报告程序文件编号:XXX-JY-CZ-WSW-0603版本:20140601生效日期:20140615共 1 页 1. 目的规范传染病报告程序,为传染病暴发、流行提供及时和准确的信息。2. 适用范围甲类和乙类法定传染病。3. 职责 微生物检验检验检验室的工作人员为责任报告人。4. 操作程序4.1如检测出可疑的甲类或乙类法定传染病病原体时,首先由微生物检验检验实负责人或指定人员复核。并联系临床医师,了解临床病情,了解病人资料及联

7、系方式。4.2复核无误后,通过网络上报或填写传染病报告表,在规定时限内上报,并登记在传染病报告记录表存档。4.3按照疾病预防控制中心的要求,有些传染病如HIV、霍乱、鼠疫等须立即向科主任和医务处汇报,需由CDC复核并作出最终报告。4.4严禁漏报、迟报、谎报疫情。4.5 未经许可,不得随意扩大或泄露报告信息。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则(ISO 15189:2007).2008编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人: XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室资料、数据保存和备份程序文件编号:XX

8、X-JY-CZ-WSW-0604版本:20140601生效日期:20140615共 1 页 1. 目的规范资料、数据的保存和备份程序,确保检验结果的溯源。2. 适用范围实验室内所有的文档及记录,包括检验原始记录、原始数据、检验结果、室间室内质控资料等。3. 职责 检验人员负责记录和保存;微生物检验实验室负责人检查督促。4. 程序4.1实验室内所有文档及记录,包括检验原始记录、原始数据、检验结果、室间室内质控资料等应集中保存,以备查询(保存2年)。4.2实验室内所有的文档和记录不能涂改。4.3电子资料(原始数据及检验结果)应设置密码保护,设立权限管理。由实验室专人负责备份,由网络管理人员统一存档

9、保存。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则(ISO 15189:2007).2008编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人: XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室更改报告程序文件编号:XXX-JY-CZ-WSW-0605版本:20140601生效日期:20140615共 1 页 1. 目的规范更改报告程序。2. 适用范围微生物检验实验室的检验结果报告。3. 职责 微生物检验检验检验室的工作人员更改,实验室负责人审核。4. 程序4.1当发现已发出的检验报告有误需要更改时,首先查找错误原因,及时和临床

10、医师沟通。应将原报告收回、注销,重新发出一份新的检验报告。新报告的编号与原报告一致,经原检验者、原审核者审核后方可报告。4.2并在原始申请单或LIS系统的备注后方报告。4.3总结分析错误根源,制定相应措施并记录备案,培训和教育员工,杜绝错误再次发生。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则(ISO 15189:2007).2008编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人: XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书微生物检验实验室检验后标本管理程序文件编号:XXX-JY-CZ-WSW-0606版本:20140601生效日期:

11、20140615共 1 页 1.目的规范检验后标本的保存程序,保存标本以备查。2.适用范围微生物检验实验室的所有类型标本。3.职责 微生物检验实验室的工作人员保存标本。4.程序4.1实验室检测完成后的标本应密封保存在-700C以下冰箱内,要有明确标识,并记录在标本管理记录表上,保存期为2年,以备复查。4.2 保存期过后的标本和培养物高压灭菌后按感染性废物处理,并记录在标本管理记录表上。参见废弃物处理程序。参考文献1 中国合格评定国家认可委员会.CNAS-CL02:2008医学实验室质量和能力认可准则(ISO 15189:2007).2008编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人

12、: XXX医院检验科微生物检验实验室作业指导书菌种保存程序文件编号:XXX-JY-CZ-WSW-0607版本:20140601生效日期:20140615共 3 页 1目的规范菌种保存程序。2范围 微生物实验室保存的标准菌种和来自临床的标本菌株。3职责微生物实验室检验人员正确执行本程序。4程序4.1需氧菌保存法4.1.1一般保存法 见表6-1表6-1 常见菌种培养基保存期限菌种培养时间培养基保存温度保存时间流感嗜血杆菌18-24脱纤维羊血或脱脂牛奶-206个月葡萄球菌、链球菌18-24血琼脂斜面(高层加液体石蜡)4813年肠杆菌科18-24Soxbean酪蛋白琼脂(高层加液体石蜡)481年肠杆菌

13、科、非发酵菌、葡萄球菌等18-24牛肉汤(6份肉汤+4份甘油或10%胰大豆肉汤或10%-15%甘油)-206个月苛养菌18-245%小牛血清肉汤-206个月分枝杆菌18-24罗氏培养基(加液体石蜡)483个月幽门螺杆菌18-24心脑浸液或布氏肉汤加入甘油-706年注:保存郡主均需培养1824h。4.1.2 冷冻干燥法 将待保存菌培养1824小时后,挑取菌落加入一定量的牛肉汤或心脑浸出液加入20%的蔗糖,混匀,分装于安瓿中,置-70低温冰箱中迅速冻结,再放入冷冻干燥机内,抽真空1624小时,然后将安瓿封口,置低温冰箱保存。大多数菌株可保存10年以上,甚至更长。4.1.3 超冰冻法 保存菌株初代培

14、养1824小时的菌落、菌苔,加入0.51.0ml无菌脱纤维羊血安瓿中,封口,置液氮或-40冰箱中保存。4.2 厌氧菌保存法4.2.1短期保存方法4.2.1.1疱肉培养基保存法 用牛肉渣和牛肉浸出液制成疱肉培养管,接种待保存菌株,然后覆盖12cm的石蜡,再将培养管垂直放置片刻,待石蜡凝固置35培养(无芽胞厌氧菌培养72小时,普通梭菌培养24小时,产气荚膜梭菌和多枝梭菌培养2周左右),最后置室温或-20保存。发酵糖类的厌氧菌每个月转钟1次,不发酵糖类的厌氧菌36个月转钟1次。4.2.1.2 半固体培养基保存法 在上述液体培养基中加入.0.2%0.5%琼脂,制成半固体培养基,接种时用毛细管将待保存的

15、厌氧菌的菌液加入半固体培养管底,表面加入12cm厚度的液体石蜡,密封管口,培养48小时,置室温或-20保存。4.2.1.3 甘油乳剂培养基保存法 在厌氧液体培养基(含胰蛋白胨、牛肉膏、酵母浸液、L-半胱氨酸和维生素K等)中加入少量牛肉渣分装于长试管中,接种待保存菌株,置35培养4872小时,取出后加入无菌甘油(按1:1比例),盖紧盖子后用石蜡封口,置4或-20保存。此法适用于保存脆弱拟杆菌、产黑色素普雷沃菌和具核梭杆菌。4.2.2 长期保存法4.2.2.1 低温冷冻保存法(厌氧菌在低温条件下新陈代谢处于抑制状态,不繁殖也不死亡)培养基包括脱纤维羊血、兔血或马血,20%脱脂牛乳,7.5%葡萄糖的

16、马血清。将待保存菌株(培养2448小时)加入上述培养基中,封好瓶口,置-70液氮或-70低温冰箱中保存。菌种不同造成保存时间差异,最长可保存10年,最短可保存2年以上。4.2.2.2 冷冻真空干燥法 冷冻真空干燥法的培养基(保存剂)有两种,一种是用10%20%脱脂牛奶加入0.1%的谷氨酸钠和0.03%的L-半胱氨酸,煮沸15分钟消毒,冷却备用。另一种是用10%蔗糖与马血清的混合液,过滤灭菌,并置厌氧环境中预还原,分装备用。将培养48小时左右(处于生长静止期)的厌氧菌落或菌苔刮下,加入一定量的上述培养基,混匀分装于安瓿中,置-20低温冰箱中迅速冻结,再放入冷冻干燥机内,抽真空1624小时,然后将

17、安瓿封口,置4环境下长期保存。4.3 结核分枝杆菌保存法4.3.1 短期保存方法(悬浮液低温保存法) 结核分枝杆菌充分悬浮于经高压灭菌的20%丙三醇-生理盐水中,保藏在-20。使用该方法,大部分分枝杆菌能保存1年以上。4.3.2 长期保存方法(悬浮液超低保存法)10mg结核分枝杆菌充分悬浮于冻存溶液(6g胰蛋白胨溶于100ml20%丙三醇水溶液)中,保藏温度-70。使用该方法,大部分分枝杆菌能保存5年以上。4.4真菌菌种保存法4.4.1 冰冻保存法 冰冻保存有助于抑制真菌,尤其是抑制皮肤癣菌发生多形性变化,即变异(当其培养物变成白色蓬松绒毛状时,真菌就失去所有特征性的颜色及形态学特征,甚至会停

18、止产生各种孢子,由此会导致菌种鉴定困难)。真菌接种在沙氏培养基上培养810日或直至见到菌落将近要全面覆盖培养基时,将试管置于-20冰箱中保存。4.4.2 石蜡油保存法 真菌接种于沙氏琼脂上,25培养,酵母菌24日,产孢子的丝状真菌需形成成熟的孢子,不产孢子的真菌生长成健壮的菌丝为止。覆盖2cm的无菌石蜡(矿物)油(石蜡油的灭菌一般在1小时以上,然后将自然冷却的石蜡油加入含真菌的试管中,使液面高于斜面顶部1cm左右)。使用此方法,许多真菌可在室温下存活数年。在恢复培养时,先从石蜡油下面挑取一小块(23mm3)菌落,沿试管壁边挑取边挤压过多的石蜡油(因石蜡油过多会抑制真菌生长),然后接种于沙氏琼脂斜面上,培养数日并观察生长情况。4.4.3 水保存法 将真菌接种于培养基的斜面上,待培养成熟后,将无菌蒸馏水直接注入试管中,冲洗下孢子和菌丝,简便易行,经济,效果好。在恢复培养时,取混悬液接种于SDA培养基中即可。大多数真菌均可用这种方法保存数年(最长12年)。参考文献 1 周庭银编著. 临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:上海科学技术出版社,20072 中华人民共和国国务院令第424号。病原微生物实验室生物安全管理条例。2004编写人: AAA、BBB 操作人:本室操作人员 批准人:

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