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1、Four short words sum up what has lifted most successful individuals above the crowd: a little bit more.-author-date肺动脉平滑肌细胞传代培养步骤肺动脉平滑肌细胞传代培养步骤肺动脉平滑肌细胞传代培养步骤一.试剂及材料:PBS液、0.25%胰酶、10%FBS、原代培养的肺动脉平滑肌细胞二.仪器:离心机、显微镜、1000ul移液器、1000ul枪头、培养皿三.操作步骤:1.吸弃原培养皿中的培养基,加入PBS液2ml(60mm培养皿),用枪头反复冲洗,弃液。重复3次;2.每个培养皿加入0.
2、25%的胰酶500ul,轻轻上下摇动培养皿,使胰酶与细胞充分接触(消化约2分钟);3.打开10%FBS培养基管盖,将培养皿置于显微镜下,随时观察细胞消化情况;4.当大部分细胞变成圆形后,迅速加入1ml10%FBS(注意混匀)终止消化。并有剪过尖的枪头吹打培养皿的斑块区域(尽量减少吹打次数,以减少细胞损伤,皿底不必太干净);5.将培养皿中的细胞悬液(包括气泡)移入15ml离心管,1000rpm离心2分钟,吸弃上清(注意不要吸到细胞);6.离心管中加入3ml10%FBS,轻轻吹打混匀后平均分入6个35mm培养皿中(0.5ml/皿)。每个培养皿中补加1ml 10%FBS;7.置于培养箱中培养即可。-