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1、第39讲 细胞工程学生用书P281)1(2016湖北七市联考)育种工作者利用不同的方法进行了如下四组实验。请据图回答问题:(1)图中过程由番茄韧皮部细胞形成幼苗A的过程需要经过_两个关键步骤,该过程依据的原理是_。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、_、温度和光照外,还必须在_的条件下进行。(3)已知番茄的红果(Y)对黄果(y)为显性,少室(M)对多室(m)为显性,控制两对相对性状的基因分别位于两对同源染色体上。用红果多室(Yymm)番茄植株的花粉进行、有关实验,则过程中,从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是_。过程中植物体C的基因型为_。(细胞A为两两融合细胞)(4)图、过程中需要去
2、除细胞壁,获得具有活力的_。(5)在图中过程中,经过鉴别和筛选后,通常植物体D能表现出两个亲本的遗传性状,根本原因是_。解析:(1)图中为植物组织培养过程,需要经过脱分化和再分化两个关键步骤,其原理是植物细胞的全能性。(2)植物组织培养除了需要提供一定的营养、植物激素(生长素、细胞分裂素)、温度和光照外,还必须在无菌的条件下进行。(3)过程中,从花粉形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是有丝分裂。红果多室(Yymm)番茄植株产生的花粉基因型为Ym、ym,故过程中植物体C的基因型为YYmm、Yymm或yymm。(4)植物体细胞杂交时,要用纤维素酶和果胶酶去掉细胞壁,获得原生质体。(5)图中过程中经植物
3、体细胞杂交获得的植株具有两个亲本的遗传物质,能表现出两个亲本的遗传性状。答案:(1)脱分化和再分化植物细胞的全能性(2)植物激素(生长素、细胞分裂素)无菌(3)有丝分裂YYmm或Yymm或yymm(4)原生质体(5)具有两个亲本的遗传物质2(2016山东济南模拟)自然条件下,哺乳动物不发生孤雌生殖。云南农大科研团队把猪卵母细胞进行人为的孤雌激活处理,使其发育成胚胎,移植到代孕母猪体内,获得世界上第一批成活的孤雌生殖克隆猪。这种克隆猪不同于核移植获得的克隆猪。现将两种技术进行比较:(1)图中过程_(填序号)是获得核移植克隆猪的技术流程。(2)孤雌激活处理其实质是要激活卵母细胞_,使其发育成早期胚
4、胎,得到克隆猪。(3)体细胞核移植技术中也会用到卵母细胞,需要选择_时期的卵母细胞,并用微型吸管吸出_。欲得到更多的卵母细胞,需用_处理良种母猪。(4)早期胚胎移植时,必需移植到同种_的其他雌性动物子宫中,才可能移植成功。(5)可以从良种不同的克隆猪中提取mRNA进行研究,也可通过_方法得到多种cDNA,并通过_技术扩增产物。解析:(1)分析题图可知,为孤雌生殖克隆猪的步骤,而为核移植技术得到克隆猪的途径。(2)孤雌激活处理的目的是激活卵母细胞的增殖分化能力或激发卵母细胞的全能性,从而得到克隆猪。(3)体细胞核移植过程中用到的卵母细胞是培养到减数第二次分裂中期的卵母细胞,对此时的卵母细胞要用微
5、型吸管吸出细胞核和第一极体;促性腺激素可以促进雌性个体超数排卵。(4)胚胎移植对受体的要求是同种的生理状态相同的雌性动物。(5)cDNA是以mRNA为模板,通过逆转录过程合成的;PCR技术可以扩增目的基因。答案:(1)(2)增殖分化(或细胞的全能性)(3)减数第二次分裂中期细胞核和第一极体(缺一不可)促性腺激素(4)生理状态相同(或同期发情处理)(5)逆(反)转录PCR3(2014高考新课标全国卷,40,15分)某研究者用抗原(A)分别免疫3只同种小鼠(X、Y和Z),每只小鼠免疫5次,每次免疫一周后测定各小鼠血清抗体的效价(能检测出抗原抗体反应的血清最大稀释倍数),结果如下图所示。若要制备杂交
6、瘤细胞,需取免疫后小鼠的B淋巴细胞(染色体数目40条),并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞(染色体数目60条)按一定比例加入试管中,再加入聚乙二醇诱导细胞融合,经筛选培养及抗体检测,得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题:(1)制备融合所需的B淋巴细胞时,所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16 000以上,则小鼠最少需要经过_次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中,最适合用于制备B淋巴细胞的是_小鼠,理由是_。(2)细胞融合实验完成后,融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外,可能还有_,体系中出现多种类型细胞的原因是_。(3)杂交瘤细胞中有_个细胞核,染色
7、体数目最多是_条。(4)未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活,原因是_。解析:(1)据图分析可知,第四次注射后X、Y、Z小鼠的血清抗体效价几乎都达到16 000以上,小鼠Y的血清抗体的效价最高,最适合用于制备单克隆抗体。(2)融合体系中除了未融合的细胞和杂交瘤细胞之外,还有骨髓瘤细胞的自身融合细胞和B淋巴细胞的自身融合细胞。细胞的融合是随机的,并且不可能所有细胞都融合,故体系中会出现多种类型的细胞。(3)动物细胞融合后形成的是具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞。杂交瘤细胞的细胞核中的染色体数目为4060100条。(4)正常细胞的分裂次数是有限的,且经过免疫的B淋巴细胞高度分化,不能无限增殖,而是经多次传代培养后逐渐衰老死亡。答案:(1)4YY小鼠的血清抗体效价最高(2)B淋巴细胞相互融合形成的细胞、骨髓瘤细胞相互融合形成的细胞细胞融合是随机的,且融合率达不到100%(3)1100(4)不能无限增殖3