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1、精选word文档 下载可编辑本科生毕业论文论 文 题 目 高效液相色谱技术在药物分析中的应用学 生 姓 名 孙琮莘学 号 20140000学 院 药学院专 业 方 向 中药学班 级 2014级03班指 导 教 师 李*论文完成日期 2018年4月毕业论文（设计）诚信声明书本人声明本人 孙琮莘 （学号 20140000 ）所提交的毕业论文高效液相色谱技术在药物分析中的应用是本人在指导教师 李* 老师指导下独立研究、写作的成果，论文中所引用他人的无论以何种方式发布的文字、研究成果，均在论文中加以说明；有关教师、同学和其他人员对本文的写作、修订提出过并为我在论文中加以采纳的意见、建议，均已在我的致谢
2、辞中加以说明并深致谢意。论文作者 （签字） 时间 2018年 6 月 日指导教师已阅 （签字） 时间 2018年 6 月 日毕业论文（设计）版权使用授权书本毕业论文高效液相色谱技术在药物分析中的应用是本人 孙琮莘 （学号 20140000 ）在校期间所完成学业的组成部分，是在指导教师 李* 老师的指导下独立完成的。因此，本人特授权山东中医药大学药学院可将本毕业论文的全部或部分内容编入山东中医药大学药学院本科生优秀毕业论文集（非正式出版）。论文作者 （签字） 时间 2018年 6 月 日指导教师已阅 （签字） 时间 2018年 6 月 日高效液相色谱技术在药物分析中的应用孙琮莘（2014级中药学
3、专业03班 学号20140000）摘要 本文着重阐述了高效液相色谱技术在药物分析中的应用，主要包括对于天然药物、抗生素、手性药物、毒性药物、违禁药物、体内药物的分析及杂质检查，并对高效液相色谱技术的应用进行了展望。关键词 高效液相色谱技术；药物分析；应用The application of high performance liquid chromatography in pharmaceutical analysisAbstract This paper focuses on the the application of high performance liquid chromatogra
4、phy in pharmaceutical analysis. It mainly includes the analysis of natural drugs, antibiotics, chiral drugs, toxic drugs, illegal drugs, internal medicine and impurity test. The application of high performance liquid chromatography was prospected.Key words high performance liquid chromatography; Pha
5、rmaceutical analysis; application1 高效液相色谱技术高效液相色谱技术（High performance liquid chromatography）也称高效液相色谱，是色谱法的一个重要分支，是在经典液相色谱法的基础上于逐渐发展起来的1-2。高效液相色谱法（HPLC）的原理是在高压条件下溶质在固定相和流动相之间进行的一种连续多次交换的过程，它借助溶质在两相间分配系数、亲和力、吸附力或分子大小不同引起排阻作用的差别，使不同溶质得以分离3。HPLC主要是利用高效液相色谱仪来进行检测的，主要的系统组成部分为高压输液系统、进样系统、色谱分离系统、检测器和记录器以及数据处
6、理机等4。HPLC不受分析对象挥发性和热稳定性的限制，适应性较广，因而弥补了气相色谱法的不足5。2 高效液相色谱技术在药物分析中的应用1 天然药物分析天然药物结构复杂，种类众多，其分析研究往往极具挑战性，HPLC不仅能快速鉴定天然药物成分，还能快速筛选出多种未知成分，为分析复杂的天然药物提供了强有力的工具6。狄志彪等7利用HPLC测定了不同发酵培养基中虫草素的含量，采用了Welch Ultimate XB-C18（6 mm250 mm，5 m）反相色谱柱，流动相为水-甲醇（85:15，V/V），流速1 mLmin-1，检测波长为260 nm，为进一步研究液体发酵蛹虫草中虫草素含量的分析提供了依
7、据。张晓霞等8应用HPLC同时测定中药梅花中的绿原酸、芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷的含量，以岛津Inertsil ODS-4（6 mm250 mm，5 m）作为色谱柱，流动相为0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液，流速1 mLmin-1，检测波长为355 nm，为制定梅花药材质量标准提供了新的方法和参考。六味地黄丸为熟地黄、山茱萸、山药、泽泻、丹皮和茯苓六中药材组成的补肾名方，王灵霞等9建立了HPLC测定3种不同剂型六味地黄丸中没食子酸、马钱苷、芍药苷和丹皮酚含量的方法，采用Agilent ZorbaxSB-C18（6 mm250 mm，5 m）色谱柱，流动相为乙腈-0.1%甲酸水溶液，流速为
8、1 mLmin-1，检测波长为240 nm，为提高六味地黄丸质量控制标准提供参考，适用于不同剂型六味地黄丸的质量控制。2 抗生素分析抗生素是由微生物或者其他方法所产生的化学类物质，在高度稀释的情况下还具备一定的抑制、消灭其他微生物存在的基本性能10。磺胺类药物是常用的人畜共用的抗生素之一，水溶性较强，主要经粪尿途径排出体外，在外界环境中发生迁移、转化，对水环境和土壤环境造成潜在的威胁11。周爱霞等12建立了地下水、土壤及粪便中4种常用磺胺类抗生素的HPLC检测方法，采用Agilent XDB C18色谱柱（150 mm46 mm，5 m），流动相为0.1%甲酸-甲醇（7:3，V/V）混合液，流
9、速0.8 mLmin-1，本方法适用于各种水体、土壤及粪便中的磺胺类抗生素的快速检测。刘丽敏13建立了一种灵敏度高的测定人类血浆中奈替米星的高效液相色谱方法，色谱柱为ZORBAX Eclipse XDB-C8柱（6 mm150 mm，5 m），流动相为乙腈-水（90:10，V/V），流速为1 mLmin-1，柱温25，为合理用药，减少药物的毒副作用和确保疗效提供了一定的基础。3 手性药物分析两种化学组成、分子式完全相同的化合物，但因组成化合物的原子在空间取向不同，而成为镜像的化合物，称为手性化合物14。手性药物通常一种对映体具有强的生物活性和药效，而另一种却无效，因此利用HPLC对手性药物对应
10、异构体的拆分也是近几年来研究的热点。何建峰等15利用HPLC拆分了11对生物碱类手性药物对映体，采用3,5-二硝基苯甲酰化的-环糊精（-CD）硅胶手性固定相，结合正己烷-异丙醇，甲醇-=1%乙酸三乙胺（TEAA，pH=1），乙腈-=1%TEAA 3种流动相系统，检测波长为254nm，流速为1 mLmin-1。许志刚等16利用HPLC对不同进样量的扑尔敏进行了拆分实验，采用醋酸纤维素固定相，以正己烷-异丙醇的混合溶液（9:1）作为流动相，流速0.5 mLmin-1，柱温30，检测波长为254 nm。4 毒性药物分析微囊藻毒素是一种在蓝藻水华污染中出现频率最高，造成危害最严重的藻毒素17，闫建秀1
11、8建立了一种HPLC对微囊藻毒素分析的方法，色谱柱为Zorbax SB C18柱（6250 mm，5m），柱温为30，流动相为36%乙腈（含0.1%TFA），该方法准确性高，重现性好，适用于微囊藻毒素的分析测定。杂色曲霉毒素是一种霉菌毒素，人和动物在食用了被杂色曲霉毒素污染的粮食后会产生毒性效应，杜鹃19建立了一种基于HPLC检测杂色曲霉毒素的方法，采用Nova-Pak C18（4m，9mm150mm）色谱柱，流动相为甲醇-水（70-30，v/v），流速0.7 mLmin-1，检测波长为246 nm，柱温32，为保障人类健康和食品质量提供了基础。5 违禁药物分析沈志武等20采用HPLC测定了保
12、健食品中他达拉非、西地那非、伐地那非等三种违禁药物的含量，采用Prodigy 5 ODS3 色谱柱（250mm60mm），流动相为乙腈-0.05 molL-1三乙胺（40:60），流速0 mLmin-1，检测波长290 nm，为检测此类壮阳违禁药物提供了分析依据。蔡增轩等21建立了一种HPLC同时测定保健食品中苯乙双胍、芬氟拉明、格列齐特等10种违禁药物的方法，采用Waters Atlantis ODS18柱（1 mm150 mm，0m），流动相为10mmolL-1乙酸铵-10mmolL-1乙酸铵甲醇溶液，柱温30，流速0.2 mLmin-1，为加强市场管理，维护消费者的利益提供了基础。6 体
13、内药物分析采用HPLC测定体内药物及其代谢产物，可为临床药理学和毒理学等研究提供科学依据22。袭荣刚等23利用HPLC测定了人体血浆中盐酸二甲双胍的浓度，研究其药动学和生物等效性，采用了Diamosil C18柱（200 mm6 mm，5m），流动相为甲醇-磷酸盐缓冲液（44:56），流速为0 mLmin-1，检测波长为233 nm，为临床指导用药提供参考依据。李勇等24建立了一种HPLC测定人体内血浆中妥舒沙星浓度的方法，采用VP -ODS C18 （150 mm6 mm，5m），柱温40，流动相为甲醇-乙腈-0 .025 %磷酸（6:17:77），流速0 mLmin-1，检测波长346 n
14、m，该方法简单、易操作，可用于妥舒沙星的血药浓度检测和药动学研究。7 杂质检查郭拥政等25采用HPLC技术建立了缬沙坦中潜在的遗传毒性杂质2-氰基-4-溴甲基联苯和2-氰基-4,4-二溴甲基联苯的含量测定方法，色谱柱为Kromasil C18 （ 6 mm250 mm，5m），流动相为乙腈-水-冰乙酸（700:300:1），检测波长为210 nm，流速0.8 mLmin-1，柱温30，该方法简便、准确、专属性强，适用于缬沙坦遗传毒性杂质检测。姜恩铸等26采用HPLC测定头孢他啶的所含杂质，以 AlltimaC18色谱柱（250 mm6 mm，5m）为分离柱，以乙腈和磷酸盐缓冲溶液为流动相，流速
15、3 mLmin-1，柱温35，检测波长255 nm，从头孢他啶药物中共分离出14个杂质，为中国药典收载头孢他啶类药物中有关杂质的检测方法奠定了基础。3 结语及展望HPLC被认为是时间最短、效能最高的药物分析方法，但随着药物结构的不断复杂化，单独的应用HPLC已经不能满足短时间内测定一种或几种生物药物的需求，因此，HPLC必须有所创新27。例如，在提供柱效方面，Waters 公司推出的Waters ACQUITYTM UPLC 超高效液相色谱系统，安捷伦公司推出的Agilent 1200 系列高效快速液相色谱系统等28；HPLC可通过联用技术弥补自身不足，尤其是色谱-质谱联用，色谱-光谱联用等。
16、HPLC作为一种十分有效的药物分析方法，已广泛地应用于天然药物、抗生素、手性药物、毒性药物、违禁药物、体内药物分析中，并且随着该技术的不断改进与发展，HPLC的发展会更为广泛。参考文献1 王振涛，许蓓蓓. 高效液相色谱技术在食品检测中的应用J. 现代食品，2017，(23):31-32 郝童斐. 高效液相色谱技术在食品检测中的应用J. 食品安全导刊，2017，(32):23 丁峰. 高效液相色谱(HPLC)法在食品检验中的应用J. 科技与创新，2017，(24):148-144 魏顺芝. 高效液相色谱技术在水质检测中的应用分析J. 地下水，2017，39(06):79-80.5 吕丽卿，刘晓玥
17、. 高效液相色谱检测技术在饲料分析中的应用和重要作用J. 时代农机，2017，44(07):117-118+146 孙翠荣，陈娟娟，潘远江. 高效液相色谱/质谱联用技术在天然来源生物活性成分快速识别中的应用J. 中国科学:化学，2010，40(06):621-630.7 狄志彪，马艳妮，陈新璐等. 液体发酵蛹虫草中虫草素含量分布的研究J. 中国酿造，2016，35(02):84-88 张晓霞，房经贵，陈世忠等. 高效液相色谱法测定中药梅花中绿原酸、芦丁、金丝桃苷和异槲皮苷的含量J. 中国医院药学杂志，2016，36(02):107-109+159 王灵霞，朱东亮，柴逸峰. 高效液相色谱法同时测
18、定3种不同剂型六味地黄丸中4种成分的含量J. 药学实践杂志，2013，31(04):296-2910 房真真，巩天照. 高效液相色谱法在抗生素类药物分析中的应用J. 化工管理，2017，(29):1211 李彦文，莫测辉，赵娜等. 高效液相色谱法测定水和土壤中磺胺类抗生素J. 分析化学，2008，(07):954-9512 周爱霞，苏小四，高松等. 高效液相色谱测定地下水、土壤及粪便中4种磺胺类抗生素J. 分析化学，2014，42(03):397-4013 刘丽敏. 高效液相色谱在中草药和抗生素类药物分析中的应用D. 西南大学，20014 康自华，阳小成，陈婷. 高效液相色谱法在药物分析中的应
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21、(02):109-110.23 袭荣刚，王晓波，石焱等. 高效液相色谱法研究人体内盐酸二甲双胍药动学和生物等效性J. 中国新药杂志，2009，18(03):230-2324 李勇，袁洪，谭鸿毅等. 高效液相色谱法测定人体内血浆中的妥舒沙星J. 南华大学学报(医学版)，2007，(01):104-1025 郭拥政，孙晓群，陈程等. HPLC法测定缬沙坦中的遗传毒性杂质J. 中国药品标准，2016，17(05):337-340.26 姜恩铸，胡昌勤. 高效液相色谱法测定头孢他啶的含量及杂质J. 色谱，2008，(01):75-727 李乾，靳珅. 高效液相色谱在生化药物分析中的应用与展望J. 山西
22、大同大学学报(自然科学版)，2011，27(04):40-428陈仁兴.高效液相色谱法及其在中药研究中的应用和展望J.蛇志，2011，23(04):375-377+39致 谢本论文是在导师李*的悉心指导下完成的，在他悉心指导和热心帮助下让我顺利的完成了本课题的研究，导师高尚的人格魅力，学识的渊博，忘我的工作精神，将是我终生学习的榜样。在此，对李老师对我在学习和生活中的关心和帮助表示衷心的感谢。衷心的感谢山东中医药大学，让我沉醉于古韵古香、博大精深的中医药文化之中，领略四大经典的深刻内涵及中药的四气五味，“厚德怀仁，博学笃行”的校训，激励着我努力拼搏，奋力向前。最后，我要衷心的祝福在研究生期间帮助过我的老师、同学和朋友身体健康、万事如意。