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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 选修三学问点专题一 基因工程一、工具1、限制酶1来源:主要从原核生物中别离纯化而来;2作用:识别特定的核苷酸序列并切开相应两个核苷酸之间的磷酸二酯键;3结果:产生黏性末端或平末端;2、DNA 连接酶常用类型 Ecoli DNA 连接酶 T 4DNA 连接酶来源 大肠杆菌 T4 噬菌体功能 连接黏性末端 连接黏性末端和平末端结果 复原被限制酶切开的两个核苷酸之间的磷酸二酯键3、载体常用载体: 质粒动植物病毒 噬菌体衍生物等化学本质 :双链环状 DNA 分子质粒特点能自我复制有一个至多个限制酶切割位点有特别的标记基因载体具备的条件名师归纳总结 条件
2、适应性第 1 页,共 8 页稳固并能自我复制目的基因稳固存在且数量可扩大有一个至多个限制酶切割位点可携带多个或多种外源基因具有特别的标记基因如抗生素抗性基因 便于重组 DNA 的鉴定和挑选对宿主细胞无害不影响宿主细胞的生活- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 二、基因工程的操作步骤1目的基因的方法从基因文库中猎取目的基因序列未知利用 PCR技术扩增 知 道 其 中 的 一 段 目 的 基 因 猎取通过化学方法人工合成较小的,目的基因序列已知目的基因2基因表达载组成标记基因体构建终止子启动子植物:农杆菌转化法、基因枪法、3将目的基因导方法花粉管通道法Ca2+
3、处理入受体细胞动物:显微注射技术4目的基因的方法微生物:感受态细胞法检测与鉴定补充:名师归纳总结 比较限制酶DNA 连接酶DNA 聚合酶解旋酶RNA 聚合酶项目作用DNA 分子DNA 分子片段脱氧核苷酸DNA 分子核糖核苷酸底物作用磷酸二酯键磷酸二酯键磷酸二酯键碱基对间的氢键磷酸二酯键部位作用形成黏性末形成重组形成新的形成单链转录形成 RNA 结果端或平末端DNA 分子DNA 分子DNA 分子专题二细胞工程第 2 页,共 8 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 一、植物组织培育和动物细胞培育项目植物组织培育动物细胞培育理论基础植物细胞全能性细胞增殖培类
4、型固体或半固体培育基液体培育基养 基成分水、矿质元素、 维生素、蔗糖、葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生氨基酸、琼脂素、促生长因子、动物血清等取材植物幼嫩部位或花药等动物胚胎或诞生不久的幼龄动物的器官或组织过程结果新的组织或植株个体,可以表新的细胞系或细胞株,不形成个达全能性体,不表达全能性目的植株快速繁衍蛋白质生物制品的生产脱毒植株的培育皮肤移植材料的培育人工种子检测有毒物质生产药物、杀虫剂等生理、病理、药理学讨论转基因植物的培育两技术手段培育过程中细胞都进行有丝分裂,都是无性繁衍,名师归纳总结 相同点都可称克隆,都不涉及减数分裂pH 等条件第 3 页,共 8 页均为无菌操作,需要相宜的温度、-
5、- - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 二、植物体细胞杂交与动物细胞融合原理植物体细胞杂交动物细胞融合细胞膜的流淌性、细胞的全能性细胞膜的流淌性细胞 A、 B 过原生质体 A 、B 细胞 A 、B 融合的原生质体杂交细胞程多个相同杂种细胞杂交细胞杂种植株相关酶纤维素酶和果胶酶胰蛋白酶或胶原蛋白酶融合方法物理法:离心、电激、振动;除物理法和化学法外仍可以用灭活化学法:聚乙二醇等试剂诱导的病毒诱导结果杂种植株杂交细胞意义克服了远缘杂交的不亲和性,获得杂突破了有性杂交方法的局限,使远种植株缘杂交成为可能三、单克隆抗体原理:细胞膜的流淌性单克隆抗体制备中两次挑选的目的:
6、1第一次挑选是将未融合的 B 淋巴 细胞、骨髓瘤细胞以及 BB 融合、瘤瘤 融合的细胞通过挑选培育基剔除,挑选 出 B 瘤融合的细胞;2其次次挑选是将产生特定抗体的B 瘤细胞通过细胞培育用相应抗原检测 的方法挑选出来;由于从体内取免疫过 的 B 淋巴细胞时取出许多种,形成的杂 交瘤细胞有许多种,所以需挑选出产生特定抗体的杂交瘤细胞;四 核移植课本 P48原理:动物细胞核具有全能性名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 专题三 胚胎工程一 体内受精和早期胚胎发育1精子和卵子的发生 1精子的发生:场所:睾丸的曲细精管;时间:初
7、情期生殖机能衰退;第一阶段:初级精母细胞的形成精原细胞发生染色体复制到初级精母细胞其次阶段:精子细胞的形成减一,减二细胞核精子头的主要部分第三阶段:高尔基体头部顶体中心体精子尾精子变形线粒体集合在尾的基部形成线粒体鞘2卵子的发生:课本 P63场所:卵巢;时间:胎儿期和初情期后;初级卵母细胞的形成:胎儿期过程减数第一次分裂:排卵前后完成初情期后减数其次次分裂:精、卵结合的过程中完成2受精作用的过程名师归纳总结 - - - - - - -第 5 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 精子获能:在生殖道内获能 卵子的预备:发育到 M 中期才有受精才能顶体反应 穿越放射冠透亮
8、带反应 穿越透亮带,防止多精入卵的第一道屏障卵细胞膜反应 进入卵细胞膜,防止多精入卵的其次道屏障原核形成,配子结合成受精卵3. 早期胚胎发育细胞分裂方式:有丝分裂 细胞数量增多,胚胎总体积不增加或略有缩小细胞数目为 32个左右 细胞都具有全能性内细胞团:发育为胎儿的各种组织 滋养层细胞:发育成胎膜和胎盘外胚层:内细胞团表层的细胞 内胚层:内细胞团下方的细胞二、体外受精和胚胎早期培育1. 卵母细胞的采集小型动物:用促性腺激素处理,超数排卵后,从输卵管中冲取卵子;大型动物:从屠宰场的卵巢中采集,体外培育至减二中期;2. 精子的采集与获能采集假阴道法、手握法、电刺激法获能培育法:啮齿动物;家兔和猪的
9、精子在获能液中;化学诱导法:牛、家畜的精子放在肯定浓度的肝素或钙离子载体 A23187 溶液中获能;3. 受精 在获能液或专用受精溶液中完成4. 胚胎早期培育 将受精卵移入发育培育液中培育至早期胚胎,可以向受体移植或冷冻储存;三、 胚胎移植 1. 移植对象:早期胚胎,体外受精得到的胚胎,其他方式得到的胚胎2. 生理基础1移入:动物发情排卵后,在一段时间内同种动物的供受体生殖器官的生理变化是相同的2收集:早期胚胎处于游离状态;3存活:受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥;名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 8 页精选学习资料 - - - - - - - - - 4遗传
10、特点:供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受影响;2.胚胎移植的基本程序对供、受体母牛进行挑选,并用激素进行同期发情处理用促性腺激素对供体母牛做超数排卵处理超数排卵的母牛发情后,挑选同种优秀的公牛进行配种或人工授精胚胎的收集 冲卵冲卵后,对胚胎进行质量检查;这时的胚胎应发育到桑椹胚或 胚胎分割囊胚阶段,并培育或储存胚胎的移植对受体母牛是否妊娠进行检查受体母牛产下胚胎移植的犊牛四、胚胎分割术概念:是指采纳机械方法将早期胚胎切割成 2 等分、 4 等分或 8 等分,经移植获得同卵双胎或多胎的技材料:发育良好的桑椹胚或囊胚留意事项:囊胚分割时留意将内细胞团均等分割五、 胚胎干细胞 ES 细胞1来源:早期
11、胚胎囊胚的内细胞团或胎儿的原始性腺中别离;形状:体积小、细胞核大、核仁明显 2特点 功能:具有发育的全能性 体外培育:只增殖,不分化 胚胎干细胞在饲养层细胞上,或在添加抑制因子的培育液中,可维护不分化的状态;在加入分化诱导因子的培育液中向不同类型的组织细胞分化;名师归纳总结 专题四生态工程第 7 页,共 8 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 生态工程的基本原理1建设目的 遵循自然界物质循环的规律,充分发挥资源的生产潜力,防止环境污染,到达经济效益和生态效益的同步进展;2特点 少消耗、多效益、可连续的工程体系;3基本原理1物质循环再生原理:物质能够在各
12、类生态系统中,进行区域小循环和全球物质大循环,循环往复,分层分级利用;2物种多样性原理:生物多样性程度高,可以在有限的资源条件下,产生或容纳更多的生物量,提高系统生产力;3和谐与平稳原理:处理好生物与环境的和谐与平稳,需要考虑环境承载力,假如生物的数量超过了环境承载力的限度,就会引起系统的失衡和破坏;4整体性原理:在进行生态工程建设时,不但要考虑到自然生态系统的规律,仍要考虑到经济和社会等系统的影响力;5系统学和工程学原理:系统的结构打算功能原理:在生态工程建设中,需要利用此原理来改善和优化系统的结构,从而到达功能改善的成效;系统整体性原理:系统各组分之间要有适当的比例关系,只有这样才能顺当完成能量、物质、信息等名师归纳总结 的转换和流通,并且实现总体功能大于各部分之和的成效,即“112” ;第 8 页,共 8 页- - - - - - -