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1、/HPLC系统性能的测试GLP （Good Laboratory Practice）GMP （Good Manufacturing Practice）SOPs (Standard Operating Procedures)测试项目 梯度阶梯 (Gradient step test)梯度线性 (Gradient linearity)系统的滞后体积 (System dwell volume)自动进样的重现性 (Automatic sampler reproducibility)流量准确度 (Flow rate accuracy)压力衰减 (Pressure decay)梯度阶梯 (Gradient
2、 step test)流动相A: HPLC纯水 流动相B: 0.1% 丙酮色谱柱：由0.005 in. i.d. 不锈钢或PEEK管代替，压力 500 psi 检测器：UV 280 nm记录器: 用100% A 和100% B调节，使检测器输出信号与记 录器相匹配。梯度程序：流量 2 ml/min, 阶式梯度，由0-100%B, 每4分钟增加10% B。（50% 增量为5%）梯度线性 (Gradient linearity)流动相A: HPLC纯水 流动相B: 0.1% 丙酮色谱柱：由0.005 in. i.d. 不锈钢或PEEK管代替，压力 500 psi 检测器：UV 280 nm记录器:
3、 用100% A 和100% B调节，使检测器输出信号与记录器相匹配。梯度程序：流量 1 ml/min, 0-100% B线性梯度 15分钟, 100% B恒组分10 分钟。系统的滞后体积 (System dwell volume)tD = t50% - 0.5 tGtD: 滞后时间（分）t50%: 线性梯度记录中达到初始信号和终止信号差值的50%所需的时间（分）tG：线性梯度时间（分）VD = tDFVD: 滞后体积（毫升）F: 流量（毫升/分）自动进样的重现性 (Autosampler reproducibility)色谱柱：C8 或C18柱色谱条件：按照色谱柱厂家的建议设置流量准确度 (Flow rate accuracy) 流动相: HPLC纯水 色谱柱：由0.005 in. i.d. 不锈钢或PEEK管代替，压力 500 psi 流量：1 毫升/分,冲满10毫升容量瓶所需时间：10分 2% （12秒）压力衰减 (Pressure decay)在储液瓶中盛有经脱气处理的纯水；在泵的出口处用螺塞堵严；设置小流量增加泵压至3000 psi 附近，停流；记录初始压力和10分钟时的压力10分钟内的压力降 15%