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1、学习必备欢迎下载选修一：专题二：课题1 微生物的实验室培养学案知识清单一、培养基1概念：人们按照微生物对的不同需求，配制出供其的营养基质叫培养基。可分为培养基和培养基。 2 营养构成：各种培养基一般都含有、和，此外还要满足微生物生长对、以及的要求。3 培养乳酸杆菌时需在培养基中添加、 培养霉菌时需将培养基PH调至、培养细菌时需将 PH调至、培养厌氧微生物则需提供条件。二、无菌技术：(一)获得纯净培养物的关键是，具体操作如下：1对实验操作的、操作者的和进行。2将用于微生物培养的、和等器具进行。3为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在附近进行。4实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与相接触。
2、(二)消毒和灭菌1消毒是指。常用的方法有、消毒法。2灭菌是指。常用的方法有：、灭菌。分别适用于那些用具？实验操作 - 大肠杆菌的纯化培养：本实验所用的培养基是，本实验可分成和两个阶段进行。一制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1. 制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的操作步骤是：、。2倒平板：待培养基冷却至左右时在酒精灯火焰附近操作进行。其过程是：在火焰旁右手拿，左手；使锥形瓶的瓶口；左手将培养皿，右手，立刻盖上皿盖。待平板冷却凝固后，将平板。二、纯化大肠杆菌微生物接种：最常用的是法和法。1平板划线法是的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。其操作步骤是： 将在酒精灯火焰上灼烧直至。在酒精灯火焰旁冷却接
3、种环，并打开大肠杆菌的菌种试管的棉塞。将菌种试管口通过火焰达到的目的。将冷却的接种环伸入到。将菌种试管口再次通过火焰后塞上棉塞。将皿盖打开一条缝隙，把接种环，盖上皿盖，不要划破培养基。灼烧接种环，冷却后从划线。重复上述过程，完成三、四、五区域内划线。注意不要将相连。将平板培养。2稀释涂布平板法则是将菌液进行一系列的，然后将进行培养。当稀释倍数足够高时，即可获得单个细菌形成的。系列稀释操作：取盛有 mL水的无菌试管 6 支，编号 101、102、103、104、105、106。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 4 页学习必备
4、欢迎下载用灼烧冷却的移液管吸取 mL菌液注入编号为101试管中，并吹打3 次使之混匀。从 101倍液中吸取 mL菌液注入到编号为102试管内吹打均匀，获得102倍液。依此类推。结果分析与评价1 培养未接种培养基的作用是什么？，若有菌落形成，说明什么？二、课堂问题：思考 1从细胞的化学元素组成来看，培养基中为什么都含有这些营养成分？思考 2无菌技术除了防止培养物被污染外，还具有的目的是什么？思考 3利用干热灭菌箱对玻璃器皿灭菌时物品不能摆得太挤，目的是什么？思考 4物品装入高压蒸汽灭菌锅灭菌后，要首先打开排气阀，煮沸并排除锅内冷空气，其目的是；随后关闭排气阀继续加热，气压升至，温度为，并维持 m
5、in；最后切断热源，使温度自然降温，气压务必降至时打开锅盖，其目的是防止。思考 6牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供什么等营养物质？思考 7锥形瓶的瓶口通过火焰的目的是什么？思考 8倒平板的目的是什么？思考 9若皿盖和皿底之间粘有培养基，则该平板能否培养微生物？为什么？思考 10取菌种前灼烧接种环的目的是什么？为什么除第一次划线外，其余划线前都要灼烧接种环？取菌种和划线前都要求接种环冷却后进行，其目的是？最后灼烧接种环的目的是？。在第 1 次划线后都从上次划线末端开始的目的是？思考 11在某培养基上出现了3 种特征不同的菌落是什么原因？思考 12频繁使用的菌种利用什么法保存？长期保存菌种的方法是什
6、么？课堂练习：【例 1】下列关于微生物营养的说法，正确的是( ) A同一种物质不可能既作碳源又作氮源 B凡是碳源都能提供能量 c除水以外的无机物仅提供无机盐 D无机氮源也能提供能量【例 2】细菌培养过程中分别采用了高压蒸气、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌( ) A接种针、手、培养基 B高压锅、手、接种针 C培养基、手、接种针 D接种针、手、高压锅【例 3】以下关于制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的叙述错误的是( ) A操作顺序为计算、称量、溶化、倒平板、灭菌B将称好的牛肉膏连同称量纸一同放人烧杯精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - -
7、 - - - - -第 2 页，共 4 页学习必备欢迎下载C 待培养基冷却至50左右时进行倒平板D 待平板冷却凝固约510 min 后将平板倒过来放置【例 4】下面对发酵工程中灭菌的理解不正确的是（）A.防止杂菌污染 B. 消灭杂菌 C.培养基和发酵设备都必须灭菌 D. 灭菌必须在接种前为了检测饮用水中是否含有某种细菌，配制如下培养基：成分乳糖蔗糖磷酸氢钾伊红 Y 美蓝蒸馏水PH 含量5g 5g 2g 0.4g 0.065g 1000g 7.2 （1）该培养基所含的碳源是，其功能是。（2）该培养基所含的氮源是，其功能是。（3）该培养基除含碳源、氮源外，还有微生物需要的营养物质是。（4）该细菌在
8、同化作用上的代谢类型是（5）该培养基用来鉴别的细菌是（）A霉菌 B大肠杆菌 C 酵母菌 D 乳酸菌课后作业一、选择题、1下列有关培养基的叙述正确的是( ) A培养基是为微生物的生长繁殖提供营养的基质 B培养基只有两类：液体培养基和固体培养基 C固体培养基中加入少量水即可制成液体培养基 D微生物在固体培养基上生长时，可以形成肉眼可见的单个细菌2. 不同培养基的具体配方不同，但一般都含( ) A碳源、磷酸盐和维生素 B氮源和维生素 C水、碳源、氮源和无机盐 D碳元素、氧元素、氢元素、氮元素3获得纯净培养物的关键是( ) A将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌 B接种纯种细菌 C适
9、宜环境条件下培养 D防止外来杂菌的入侵4下列常用的无菌操作中错误的是( ) A用酒精擦拭双手 B用氯气消毒水源 c实验操作应在酒精灯火焰附近进行 D玻璃器皿 (吸管、培养皿 ) 可用酒精擦拭5制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的步骤是( ) A计算、称量、倒平板、溶化、灭菌 B计算、称量、溶化、倒平板、灭菌 C计算、称量、溶化、灭菌、倒平板 D计算、称量、灭菌、溶化、倒平板6有关倒平板的操作错误的是( ) A将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面上 B使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰 c将培养皿打开，培养皿盖倒放在桌子上 D 等待平板冷却凝固后需要倒过来放置7有关平板划线操作正确的是( ) A使用已灭菌的接种
10、环、培养皿，操作过程中不再灭菌 B打开含菌种的试管需通过火焰灭菌，取出菌种后需马上塞上棉塞 c将沾有菌种的接种环迅速伸人平板内，划三至五条平行线即可D最后将平板倒置，放人培养箱中培养8有关稀释涂布平板法，叙述错误的是( ) A首先将菌液进行一系列的梯度稀释 B然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 4 页学习必备欢迎下载 C再放在适宜条件下培养 D结果都可在培养基表面形成单个的菌落9涂布平板操作需要用到( ) A接种环、滴管、酒精灯 B接种环、移液管、酒精灯 C涂布器、移液管、
11、酒精灯 D涂布器、接种环、酒精灯10将接种后的培养基和一个未接种的培养基都放入37恒温箱的目的是( ) A对比观察培养基有没有被微生物利用 B对比分析培养基是否被杂菌污染C没必要放人未接种的培养基 D为了下次接种时再使用11关微生物营养物质的叙述中，正确的是A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量12作为自养生物唯一碳源的是（）A糖类 B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉饼13大肠杆菌的代谢类型是（）A 自养需氧 B异氧严格厌氧 C异养需氧 D 异养兼性厌氧14菌种保藏应控制的条件是（）（1）湿度（2） 低温（3） 干燥（4
12、） 有光（5）隔绝空气（6）适当有氧 A （1） （4） （6） B （2） （3） （6） C（1） （5） （6） D（2） （3） （5）15下列物质中，不能用作酵母菌碳源的是（）A含碳有机物 B蛋白胨 C含碳无机物 D花生粉饼等天然物质16平板冷却凝后要将平板倒置，其意义是（）A利于大肠杆菌的接种B防止杂菌污染 C 利于培养的冷却 D、防止皿盖冷却水倒流入培养基17含 C、H、O 、N的大分子化合物可以作为（）A异养微生物的氮源、能源 B异养微生物的碳源、氮源C自养微生物的氮源、能源、碳源 D自养微生物的氮源、能源、碳源二、非选择题18鉴定培养基的制作是否合格的方法是：将制备好的培养基
13、放在中保温 1-2 天看有无，如果没有说明制作合格，反之则不合格。19请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。(1) 培养细菌用的培养基与培养皿(2) 玻棒、试管、烧瓶和吸管 (3) 实验操作者的双手(1) 、 (2) 、 (3) 2019 世纪中期，关系到法国经济命脉的酿造业曾一度遭受毁灭性的打击。在生产过程中，出现了葡萄酒变酸、变味的怪事。(1) 根据你所掌握的知识分析导致生产失败的根源是什么? (2) 由此得出研究和应用微生物的前提是防止。21在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗 ?为什么 ? 22在做第二次以及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线? 精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 4 页