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1、复旦普通微生物学课件复旦普通微生物学课件42 诱变诱变育种的步骤育种的步骤:原始菌种原始菌种纯化纯化斜面斜面/肉汤培养肉汤培养单孢子单孢子/单细胞悬液单细胞悬液诱变剂处理诱变剂处理平板分离平板分离移至斜面移至斜面小试小试中试中试初筛初筛复筛复筛计算存活率计算存活率观察形态变异,观察形态变异,挑单菌落挑单菌落良种保藏良种保藏原菌种特性鉴定原菌种特性鉴定诱变处理方式:诱变处理方式: 单一因子处理:单一因子处理: 复合因子处理:复合因子处理: 两种以上因素两种以上因素先后使用先后使用 同时使用同时使用 单一因子重复使单一因子重复使用用常用诱变剂的使用方法常用诱变剂的使用方法4. 菌种筛选菌种筛选4.
2、1 筛选方案:筛选方案: 实际工作中,为了提高筛选效率,往往将筛选工作分为实际工作中,为了提高筛选效率,往往将筛选工作分为初筛和复筛两步进行。初筛和复筛两步进行。 初筛的目的:删去明确不符合要求的大部分菌株,把生初筛的目的:删去明确不符合要求的大部分菌株,把生产性状类似的菌株尽量保留下来,使优良性状的菌株不产性状类似的菌株尽量保留下来,使优良性状的菌株不至于漏网;至于漏网;因此,初筛工作以量为主,测定的精确因此,初筛工作以量为主,测定的精确性还在其次;初筛手段应尽可能快速、简单。性还在其次;初筛手段应尽可能快速、简单。 复筛的目的:确认符合要求的菌株;复筛的目的:确认符合要求的菌株;复筛以质为
3、主,复筛以质为主,应精确测定每个菌株的生产指标。应精确测定每个菌株的生产指标。筛选是最为艰难的也是最为重要的步骤.可见,设计和采用效率高的筛选方案和方可见,设计和采用效率高的筛选方案和方法极其重要。法极其重要。以选育高产突变株为例,诱变育种的基本环节概括如下:第一轮:第一轮:一个出发菌株一个出发菌株选出选出200个菌株个菌株选出选出50株株选出选出5株株诱变处理初筛(每瓶一株)复筛(每瓶四株)第二轮:第二轮:5个出发菌株个出发菌株 选出选出50株株 选出选出5株株40株株40株株40株株40株株40株株诱变处理初筛复筛(每瓶一株)(每瓶四株)4.2 变异菌的一般筛选方法4.2.1 平皿快速检测法平皿快速检测法l变色圈法变色圈法l透明圈法透明圈法l生长圈法生长圈法l抑菌圈法抑菌圈法l梯度平板法梯度平板法4.2.2 摇瓶培养法摇瓶培养法