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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载复习要点1生物药物的概念及第一章绪论21 世纪生物药物的分类2生物技术 Biotechnology 概念及现代生物技术的组成和特点 3基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术、发酵工程技术定义 4基因诊断、基因治疗概念 5生物技术在药学应用中的两类方式 6生物药物的两大来源及生物药物的特点 7. 生物制药的特点、生物制药基本过程及生物制药基本方法第五章 发酵工程制药1发酵定义及发酵类型 2菌种的选育方法 3培育基概念和培育基的配制原就 4发酵的基本过程 5微生物发酵方式 6发酵过程影响因素及掌握 7代谢工程定义 8简述发酵工程下
2、游加工过程的的特点和一般程序其次章 基因工程制药1基因的概念及基因的一般特性 2基因工程药物的概念 3基因工程药物制药的主要流程 4基因工程药物建立分别纯化工艺的依据 5基因工程药物分别纯化的一般流程 6基因工程产品的质量掌握内容 7基因工程药物临床前安全性评判的特别性 8蛋白质工程的概念第三章动物细胞工程制药1细胞定义、细胞的特点和细胞的化学组成 2细胞培育定义、细胞培育基本条件和基本过程 3细胞融合技术定义和基本过程 4细胞工程技术概念和动物细胞工程制药的基本概念 5动物细胞培育的基本技术和动物细胞培育特点 6细胞株、细胞系、原代培育和传代培育的概念 7动物细胞的大规模培育方法 8转基因动
3、物概念 transgenic animal 及转基因的技术方法 9转基因动物在医药行业中的应用10动物乳腺生物反应器（mammary gland bioreactor ）概念名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页,共 6 页精选学习资料 - - - - - - - - - 第四章植物细胞工程制药学习必备欢迎下载1植物细胞工程制药的两大内容 2植物细胞的全能性定义和原理 3植物细胞特点 外植体 explant 、脱分化（dedifferentiation ）、再分化（redifferentiation ）、愈伤组织（ callus culture ）概念4植物细胞的培育方法 5转基因
4、植物概念及主要方法 6植物细胞工程制药应用于哪些方面第六章 酶工程制药1酶工程概念和现代酶工程讨论的主要内容 2酶固定化概念、方法和固定化酶的特点 3细胞固定化概念和固定化细胞的特点 4酶反应器 Enzyme reactor 的概念第七 章 新型生物制药技术抗体工程制药1概念抗体 antibody 、多克隆抗体 Polyclonal antibody,PcAb 、单克隆抗体 monoclonal antibody 、杂交瘤细胞 hybridoma 技术 、抗体工程 2单抗制备的基本流程 3HAT 培育基的挑选培育杂交瘤细胞的原理 4单克隆抗体的鉴定与检测项目5基因工程抗体概念和基因工程抗体的类
5、型嵌合抗体Chimeric Antibodies ,改形抗体reshaped Antibodies, 单链抗体single chain antigen binding protein,ScFv 等6噬菌体抗体工程和转基因动物表达抗体的优点7反义核酸 ribozyme 、核酶（antisense nucleic acide）、RNA 干扰（RNA interference , RNAi ）概念8核酸疫苗（ nucleic acid vaccine 又称基因疫苗（ gene caccine或 DNA 疫苗（ DNA vaccine ）概念和核酸疫苗的优点9基因治疗概念、基因治疗的必要条件和主要方式
6、10 干细胞、胚胎干细胞（embryonic stem cell ,ES 细胞）的概念及应用11 生物芯片 基因芯片,蛋白芯片12；名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 6 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载复习重点基本概念1Biotechnology 以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础学科的科 学原理,依据预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需产品或达到某种目的2Fermentation Engineering 微生物工程是利用微生物制造工业原料与工业产品并供应服 务的技术 .其特点 : 发酵工程是以某种
7、特定的产物为工艺的目标,这就要求微生物细胞既能正常生长又能过量积存目的产物3Enzyme Engineering 是酶学和工程学相互渗透结合进展而形成一门新的技术学科；它是 从应用的目的动身讨论酶、应用酶的特异性催化功能,并通过工程化将相应原料转化成有用物质的技术；4. Gene Engineering 是将重组对象的目的基因插入载体,拼接后转入新的宿主细胞,构建成工程菌 或细胞）,实现遗传物质的重新组合,并使目的基因在工程菌内进行复制和表达的技术；5蛋白质工程以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础,通过基因修饰或基因合成,对现有蛋白质进行改造,或制造一种新的蛋白质；6.抗体工程 利
8、用单克隆抗体技术和基因工程技术进行自然抗体的生产和抗体改造以及研 制新型抗体 . 7Metabolic engineering 利用多基因重组技术有目的的对细胞代谢途径进行修饰、改造,转变细胞特性,并与细胞基因调控、代谢调控及生化工程相结合,为实现构建新的代谢途径,的学科领域；生产特定目的产物而进展起来的一个新8biopharmaceutics 是指运用生物学、医学、生物化学等的讨论成果,从生物体、生物组 织、细胞、体液等中,综合利用物理学、化学、生物化学、生物技术和药学等学科的原理和方法制造的一类用于预防、治疗和诊断的制品9基因工程药物 是指以 DNA 重组技术生产的蛋白质、多肽、酶、激素、
9、疫苗、单克隆抗 体和细胞生长因子类药物；10 Gene DNA 分子中含有特定遗传信息的一段核苷酸序列,是遗传物质的最小功能单位；11 Cell 细胞是一切生物体进行生命活动的基本结构和功能单位 进行繁衍的原生质；.细胞是有膜包围的能独立12 Culture medium 是人工配制的适合于不同细胞生长繁衍或积存代谢产物的养分基质. .其主要成份碳源、氮源、无机盐、生长因子、前体和水等几大类13hybridoma 技术 ：将含有特异免疫信息的淋巴细胞与具有无限增殖的肿瘤细胞在诱导剂作用下使其融合,产生一个具有特异活性细胞及其产物技术. 14. monoclonal antibody 由一个克隆
10、产生只针对一种抗原打算簇的结构与功能完全相同的 抗体 . 15.Chimeric Antibodies 将人抗体的恒定区 C 区替代鼠源单抗的可变区 C 区而得到的抗体 16immobilized enzyme 固定化酶是指限制或固定于特定空间位置的酶,详细来说, 是指经 物理或化学方法处理,使酶变成不易随水流失即运动受到限制,而 又能发挥催化作用的酶制剂；17 Biosensors 由生物识别物质酶,微生物动植物组织抗体等 与换能器组成的分析系统,其基于酶 细胞 固定化技术名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 6 页精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备
11、 欢迎下载18 transgenic animal 采纳基因工程技术把外源基因导入动物生殖细胞、胚胎干细胞和早19.期胚胎 ,并在受体动物染色体上稳固整合 ,又经过各种发育途径能把外源基因稳固传给子代的这种动物gene knockout 用基因打靶技术定点灭活一个内源基因；20RNA interference（RNAi ）是指对应于某种 Mrna 的正义 RNA 和反义 RNA 组成的双链RNA （ds RNA ）分子使 的转录后基因缄默现象mRNA 发生特异性降解,导致其不能表达21酶联免疫法 （ELISA ）以酶代替放射同位素对抗原或抗体进行标记,使酶与抗原抗体共 价连接,称之为酶联免疫吸
12、附法；22 基因治疗 是指将正常的外基因导入生物体的靶细胞内,以补偿或订正基因缺陷或反常表 达,从而达到治疗目的；1 代细胞与传 10 代以内 23.原代培育： 从机体取出后立刻培育的细胞为原代细胞；培育的第 的细胞称为原代细胞培育；24 传代培育： 将原代细胞从培育瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的 培育瓶中连续培育,称为传代培育25 细胞株 ：原代细胞一般传至10 代左右细胞生长停滞,大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到 4050 代,这种传代细胞为细胞株；26 细胞系 ：细胞株传代至50 代后又显现细胞生长停滞状态,只有部分细胞由于遗传物质的转变,使其在培育条件下可以无限制
13、传代,这种传代细胞为细胞系；27 细胞株和细胞系的区分： 细胞系的遗传物质转变,具有癌细胞的特点,失去接触抑制,简单传代培育；基本方法：1.生物大分子的分别纯化主要方法超滤和凝胶过滤、离子交换法、电泳和等电聚焦法,等电点沉淀法和有机溶媒分级沉淀法、亲和色谱法等2. 生物制药基本方法有 提取法 发酵法 化学合成法 组织培育法 现代生物技术方法3. 测定蛋白质类药物分子量方法 超速离心、凝胶色谱法、SDS_PAGE 生物质谱法等4. 酶和细胞固定化方法有 载体偶联法、交联法、包埋法、新型固定法；5. 常用的菌种保藏方法 斜面低温保藏法 石蜡油封存法 砂土管保藏法 麸皮保藏法 甘油悬液保藏法 冷冻真
14、空干燥保藏法 液氮超低温保藏法 宿主保藏法等6.基因工程操作中获得目的基因的方法逆转录法、化学合成法、PCR 等7.基因诊断主要技术包括基因探针技术、PCR 技术、单抗试剂等；8.发酵工程制药中微生物发酵方式固体发酵、液体发酵9.基因治疗中外源基因导入的方式；10.基本过程：名师归纳总结 1基因工程制药的基本流程获得目的基因、组建重组质粒、构建工程菌（或细胞）、第 4 页,共 6 页培育工程菌、产物分别纯化、除菌过滤、半成品检定、成品检定、包装；2发酵的基本过程菌种、种子制备、发酵、发酵液处理、提取精制；3单抗制备的基本流程抗原的制备、动物的免疫、抗体产生细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂- - -
15、- - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 交瘤细胞、 杂交瘤细胞的挑选性培育、学习必备欢迎下载体外挑选能产生某一特异抗体的阳性克隆和克隆化、培育 动物腹腔接种培育 、大量制备单克隆抗体；4动物细胞培育的基本过程：、细胞培育；取动物器官、和组织、剪碎组织、胰蛋白酶处理、单个细胞5生物制药的基本过程1.原料的挑选、预处理和储存2.原料的粉碎3.提取 4.分别纯化5.浓缩 6.结晶 7 .干燥6 PCR 三个基本步骤 变性 -退火 -延长基本原理、组成、分类和特点1.单抗制备的基本原理制备单克隆抗体通过B 淋巴细胞杂交瘤技术把能产生单一抗体的淋通过巴细胞与有增殖才能的骨髓瘤细胞
16、进行融合形成杂交瘤细胞,有限稀释法及克隆化使杂交瘤细胞成为纯一的单克隆细胞系而产生的只针对一个抗原打算簇、结构和特异性完全相同的高纯度抗体2植物细胞培育技术的理论基础 植物细胞的全能性；3 现代生物药物类型 基因药物 , 重组药物,自然药物,合成、半合成药物；4现代生物技术主要组成基因工程、细胞工程、酶工程、发酵工程；5现代生物技术特点 : 高效益、高智力、高投入、高竞争、高风险、高势能；6生物药物来源主要有两大类 以自然生物材料为主 ,有目的的人工制备生物原料；7 基因工程抗体的类型 有嵌合抗体、改型抗体、小分子抗体、多功能化抗体；8. 生物药物特点 化学结构和组成比较复杂；相对分子量较大,
17、一般不易化学合成；药理作用针对性强,不良反应小；疗效准确,养分价值高；有的生物原料和生物药物不能代替 . 9. 固定化酶的特点 具有生物催化剂的功能,又有固相催化剂的功能；可多次使用 反应后,酶底物产物易分开,产物中无残留酶,易纯化,产品质量高；反应条件易掌握；酶的利用效率高；比水溶性酶更适合于多酶反应10 固定化细胞的特点 有细胞特性,生物催化剂功能,固相催化剂特点；优点：无须进行酶的分别纯化 保持酶的原始状态,酶回收率高比固定化酶稳固性高细胞内酶附助因子可再生细胞本身含多酶体系抗污染才能强11. 影响大肠杆菌中外源蛋白表达的主要因素外源基因密码子的使用,mRNA 结构 ,表达载体的构建 ,
18、培育条件如何实现高表达12 发酵工程制药特点是以某种特定的产物为工艺的目标,这就要求微生物细胞既能正常生长又能过量积存目的产物；13生物制药的特 点（特别性）1.生物原料组成成分特别复杂 2.有效成分含量低 3.易变性及被破坏 4.分别制备过程影响因素多相对“均一性 ” 13发酵过程影响因素：温度、 pH、溶解氧、菌体浓度、泡沫、养分浓度；如何掌握14微生物发酵生产药物主要种类 抗生素类 ;氨基酸类 ;核苷酸类维生素类 ;甾体类激素 ;治疗酶及酶抑制剂等；15细胞的特点：在结构上具有自我装配的才能, 在生理活动中具有自我调剂的才能, 在增殖上自我复制的才能；16生物技术在药学讨论中两种基本作用
19、方式1 作为生产工具 -生物技术药物 2.作为讨论手段 - 合理药物设计名师归纳总结 17 单抗优点和局限性优点 单克隆抗体的特性高度特异性高度的均一性和可重复性高第 5 页,共 6 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 学习必备 欢迎下载度专一性：大量产生及稳固性：局限性： 固有的亲和性和局限的生物活性限制了它的应用范畴反应 强度不如多克隆抗体、制备技术复杂、费时费工、价格较高18 生产用动物细胞类型 贴壁依靠性细胞、非贴壁依靠性细胞、兼性贴壁细胞 19动物细胞培育特点 无细胞壁 ,抗机械强度低 ,对剪切力敏锐 ,适应环境差；倍增时间长 ,生 长缓慢
20、,易污染 ,培育时必需加抗生素；培育过程需氧量少 ,有的需要 肯定 CO2；培育过程中细胞相互粘连以集群形式存在 20 基因工程药物制备全程质量掌握理念 包括一、原材料的质量掌握1. 目的基因 2. 表达载体 3.宿主细胞 , 二、培育过程的质量掌握 1.生产用细胞库 2.培育过程 三、纯化工艺中的质量掌握 ;四.目标产品的质量掌握21.选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培育材料的原理（目的）这些组织或器官上的细胞生命力旺盛,分裂才能强22基因治疗的必要条件1 发病机制在DNA 水平上已经清晰2 要转移的基因已经克隆分别,其表达产物有详尽的明白 遗传操作3 该基因正常表达的组织可在体
21、外进行23PCR 原理 是体外酶促合成特异 DNA 片段的方法 反应特点 1.特异性强 2.灵敏度高 3.简便、快速；确保 PCR 获得目的基因序列正确应留意 :1.使用高保真的 DNA聚合酶 ,和相对保守的 PCR 扩增条件 .2.凡经 PCR 扩真制备的目的基因片段 ,克隆后必需要测序 . 24 基因工程产品的质量掌握内容：产品的鉴别、纯度、活性、安全性、稳固性、一样性；利用多学科的技术生物化学、免疫学、微生物学、细胞生物学和分子生物学；25.基因工程药物包含上游下游过程上游技术主要是分别目的基因、构建工程菌 细胞 ；主要技术涉及 1、基因克隆载体 :质粒载体, 2、重组 DNA 技术的有关工具酶及其应用 3、核酸制备技术；下游阶段： 从工程菌的大量培育始终到产品的分别纯化和质量掌握；主要包括工程菌大规模发酵正确参数的确立,新型生物反应器的研制,高效分别介质及装置的开发,分别纯化的优化掌握, 高纯度产品的制备技术,生物传感器等一系列仪器外表的设计和制造,电子运算机的优化掌握等 .26.基因工程中影响外源蛋白表达的主要因素外源基因密码子的使用 ,mRNA 结构,表达载体的构建 ,培育条件如何实现高表达名师归纳总结 - - - - - - -第 6 页,共 6 页