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1、精选学习资料 - - - - - - - - - 生化分别技术复习重点1. 分别纯化的主要操作步骤细胞分别（离心、传统过滤和膜过滤；）； 细胞破裂和碎片分别（均质法和高速玻璃珠研磨法,离心法和双水相提取法） ；浓缩（超滤 -错流系统）；色谱分别1. 吸附分别技术概念：吸附层析是利用吸附剂对不同物质的吸附力不同而使混合物中的各组分分别的方法；吸附剂类型 ：（ 1）物理吸附（范德华力） （ 2）化学吸附（电子转移） （ 3）交换吸附（离子交换）物理吸附和化学吸附的比较吸附力物理吸附化学吸附范德华力化学键力吸附热较小 液化热 较大挑选性无挑选性有挑选性稳固性不稳固 , 易解吸稳固分子层单分子层或多分
2、子层单分子层吸附速率较快 , 较慢 . 受温度影响小受温度影响大常用的吸附剂 ：一类有机吸附剂,如活性炭、纤维素、大孔吸附树脂、聚酰胺等；另一类是无机吸附剂,如氧化铝、硅胶、人造沸石、磷酸钙氢氧化铝等；活性炭吸附规律：对具有极性基团的化合物吸附力较大；对芳香族化合物的吸附力大于脂肪族化合物；对相对分子质量大的化合物的吸附力大于相对分子质量小的化合物；影响吸附的因素：吸附剂的性质；吸附物的性质；吸附条件（温度、PH、盐的浓度）、溶剂的影响；大孔吸附树脂预处理方法：解吸条件的影响：3. 膜分别技术概念 ：指物质在推动力作用下由于传递速度不同而得到分别的过程；特点 ： 易于操作；成本低、寿命长；高效
3、；常温下操作无相态的变化,分别精度高,没有二次污染；膜材质的价格高；操作过程中膜面简洁被污染；膜的耐药性,耐溶性,耐热性能有限；类型 ：渗析；电渗析；微滤；超滤；反渗透；纳滤；气体分别微滤的分别机理：筛分机理4. 液膜分别技术概念 ：是一种以液膜为分别介质,以浓度差为推动力的分别操作,是属于液液系统的传质分别过程；组成 ：膜溶剂；表面活性剂；流淌载体；膜增强剂；分类 ：乳状液膜；支撑液膜；液膜分别步骤 ：制备液膜；液膜萃取；澄清分别；破乳；影响因素 ： 液膜乳液成分的影响；乳水比；连续的 作温度的影响；接触时间；PH；搅拌速度的影响；料液的浓度和酸度的影响；操应用 ：分别氨基酸；提取抗生素；提
4、取生物碱；提取蛋白质；分别有机酸；应用酶反应和酶萃取；液膜 包裹；5. 盐析 基本原理 ： 在高浓度中性盐存在的情形下,蛋白质（或酶）等生物大分子在水溶液中的溶解度降低并沉淀出的现象称为盐析；影响盐析的因素：盐饱和度；蛋白质浓度；PH值；温度 盐加入方式 ：（1）加硫酸铵的饱和溶液 ;2 直接加固体硫酸铵6. 等电点沉淀法名师归纳总结 基本原理 ：两性生化物质在溶液PH处于等电点时,分子表面电荷为零,分子间静电排斥作用减弱,因此吸第 1 页,共 17 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 引力增大,能相互集合起来,发生沉淀；等电点概念 ：蛋白质或两性电解
5、质如氨基酸 所带净电荷为零时溶液的pH,此时蛋白质或两性电解质在电场中的迁移率为零；7. 结晶 概念 ： 溶质呈晶态从溶液中析出的过程称为结晶；过程： 过饱和溶液的形成；晶核的生成；晶体的生长；影响结晶因素：溶液浓度；样品纯度；溶剂；PH；温度；时间；等电 方法 ：盐析法；加饱和盐溶液；透析法；有机溶剂（直接加有机溶剂或者利用挥发性溶剂蒸发结晶）点；其它（温度差,加入金属离子）等；8. 有机沉淀法 原理 ：向蛋白质等生物大分子的水溶液中加入肯定量亲水性的有机溶剂,能显著降低蛋白质等生物大分子 的溶解度,使其沉淀析出；常用有机溶剂 ： 乙醇、丙酮、甲醇等；9. 固相析出分别技术主要有： 结晶法、
6、盐析法、有机溶剂沉淀法和等电点沉淀法；10. 离子交换法 概念： 是应用离子交换剂作为吸附剂,通过静电引力将溶液中带相反电荷的物质吸附在离子交换剂上,然 后用合适的洗脱机将吸附物从离子交换剂上洗脱下来,从而达到分别、浓缩、纯化的目的；常用离子交换剂：人工高聚物作载体的离子交换树脂；多糖作载体的多糖基离子交换剂；3）多乙烯多氨环氧氯 分类 ；一 . 按树脂骨架的主要成分分：（1）聚苯乙烯型树脂（2）聚苯烯酸型树脂（苯烷树脂（ 4）酚醛树脂 二 . 按骨架的物理结构来分：（1）凝胶型树脂（2）大网格树脂（ 3）均孔树脂 三 . 按活性基团分类：阳离子交换树脂： （ 1）强酸性阳离子交换树脂（磺酸基
7、团和次甲酸磺酸基团）（2）弱酸性阳离子交换树脂（羧基和酚羟基）阴离子交换树脂: （1）强碱性阴离子交换树脂（季铵基团）（ 2）弱碱性阴离子交换树脂（伯胺基；仲胺基）离子交换树脂的理化性能：交联度；交换容量；粒度和外形；滴定曲线；稳固性；膨胀性；PH；有机溶剂影响离子交换树脂挑选因素：离子化合价；离子的水化半径；溶液浓度；离子强度；溶液的的影响；树脂的物理结构的影响；树脂与离子间的帮助力 影响离子交换速度的因素： 树脂粒度；树脂的交联度；溶液流速；温度；离子的大小；离子的化合价；离 子浓度；离子交换技术的一般流程： 原料液的预处理原料液与离子交换树脂的充分接触淋洗交换树脂把离子交换树脂上的有用物
8、质解吸并洗脱下来离子交换树脂的再生；12. 亲和层析 原理 ：亲和层析是一种吸附层析,抗原（或抗体）和相应的抗体（或抗原）发生特异性结合,而这 种结合在肯定的条件下又是可逆的；所以将抗原（或抗体）固相化后,就可以使存在液相中的相 应抗体（或抗原）挑选性地结合在固相载体上,借以与液相中的其他蛋白质分开,达到分别提纯 的目的；影响吸附剂亲和力的因素： 配基浓度；空间障碍；配基与载体的结合位点；载体孔径；14. 过滤 概念 ：在推动力或者其他外力作用下悬浮液（或含固体颗粒发热气体）中的液体（或气体）透过介 质,固体颗粒及其物质被过滤介质截留,从而使固体及其他物质与液体（或气体）分别的操作；原理 ：利
9、用物质的溶解性差异,将液体和不溶于液体的固体分别开来的一种方法 类型 ：（ 1）常规过滤（2）错流过滤 15. 助滤剂 滤饼作用 助滤剂原理 ： 通过加入助滤剂转变进入滤池之前的颗粒或滤料表面性质、电性与尺寸；转变滤料表名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 面性质可提高颗粒向滤料迁移速度与黏附效率；转变进入滤池悬浮颗粒的表面性质与尺寸可提高颗粒黏附效率；依据该机理形成的聚合物 颗粒絮体,使颗粒和黏附作用都得到加强；助滤剂的主要种类有：聚合无机高分子（如聚合氯化铝、聚合硫酸铝）合成有机高分子（如聚丙烯酰胺、HAC 阳离子
10、絮凝剂）自然有机高分子（如骨胶、海藻酸钠）氧化剂（如氯、臭氧、二氧化氯等）；助滤剂使用方法：（ 1）在过滤之前先在过滤介质表面预涂一层助滤剂；（2）助滤剂按肯定比例匀称加入待过滤的料液中；16. 提取： 通过溶剂 如乙醇 处理、蒸馏、脱水、经受压力或离心力作用,或通过其他化学或机械工艺过程从物质中制取 如组成成分或汁液 ；谓经过提炼而取得；17. 精制： 从一种物质中把不需要的成分除去18. 萃取 ： 利用溶质在互不相容的两相之间安排系数的不同而使溶质得到纯化或浓缩的技术；萃取选取的缘由：（ 1）萃取剂分子至少有一个萃取功能基（2）萃取剂分子中必需有相当长的链烃或芳烃（3）挑选性好、萃取容量大
11、、化学和辐射稳固性强、简洁与原料液分层、操作安全等；影响因素：（ 1） PH,温度盐析（2）有机溶剂的挑选（3）带溶剂（4）乳化和去乳化19. 细胞破裂常用的技术：（ 1）高压匀浆法（2）高速珠磨法（3）超声波法（4）化学法（5）酶解法（ 6）渗透压冲击法（7）冻结 - 融解法（8）干燥法常用的溶酶： 溶菌酶、透亮质酸酶、蛋白酶、脂肪酶、核酸酶等；20. 高压匀浆法的原理：细胞悬浮液在高压作用下从阀座与阀之间的环隙高速喷出后撞击到碰撞环上,细胞在受到高速撞击后,几句释放到低压环境,从而在撞击力和剪切力等综 合作用下破裂影响因素： 压力、循环操作次数和温度21. 化学渗透法破裂细胞的特点：速度低
12、,效率差,且化学或生化试剂的添加形成新的污染,但化学渗透法挑选性高,胞内产物的总释放率低,可有效抑制核酸的释放,料液粘度小,有利于后处理；22. 珠磨法破裂细胞的影响因素 等；：搅拌速度、料液的循环速度、细胞悬浮液的浓度、珠粒大小和数量、温度23. 发酵液预处理降低液体黏度常用的方法：（ 1）加热（2）凝结和絮凝（3）变性沉淀（4）调剂PH 24. 凝结概念： 在电解质的作用下,由于胶粒之间双电介质凝结的影响因素：25. 絮凝 絮凝的主要影响因素概念： 指在某些高分子絮凝剂存在下,基于架桥作用,使胶粒形成较大的絮凝团的过程；原理： 絮凝剂一般为高分子聚合物,具有长链线状结构,简洁溶于水,其相对
13、分子质量高达数万至 1000 万以上, 在长的链节上含有相当多的活性功能团；絮凝剂的功能团能猛烈地吸附在胶粒的表面,由于一个高分子絮凝剂的长链节上含有相当多的活性功能团,所以一个絮凝剂分子可分别吸附在不同颗粒的表面,从而产生架桥链接；絮凝的影响因素：主要是 1,絮凝剂的相对分子质量、2,絮凝剂的类型、3,溶液的 PH、4,搅拌速度和时间、 5,絮凝剂的浓度、6,助凝剂；27. 常用的固液分别方法有：过滤、沉降和离心分别；28. 浸取技术,影响因素概念 ：用溶剂浸渍固体混合物以分别可溶组分及残渣的单元操作；又称固液萃取；影响因素： 固体物质的颗粒度；溶剂的用量及浸取次数；温度；浸取时间；搅拌；溶
14、剂的 PH 33. 克服膜表面浓度差极化现象的方法：进入膜处理前的预过滤能去除微粒状物质,降低待阻留溶质的浓度；逆洗；超声波振动；设置湍流促进物；震惊和脉冲喂料等；此外,仍有讨论通过膜、膜系统或膜表面的旋转而达到掌握浓差极化的目的；名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 34. 生化分别技术分别的主要对象 物活性的物质（如酶类） ；：动植物细胞与微生物发酵液；酶反应产物、中间产物或废物料,具有生35. 生物技术产品的特点：结构复杂；具有种属特异性；针对性强,疗效高；基因稳固性；免疫原性；检验的特别性等 ；生物分别与纯化复
15、习题 第一章 1、生物分别纯化技术的概念？以生物物质原料为基础,对目标产物进行提取、纯化、加工制备的生产技术；2、生物物质与生物产品的区分？生物物质 ：生物物质是指存在于生物体内的全部生物活性物质的总称；生物产品 ：在产业中的生物物质的制成品；3、生物分别纯化技术的原理和特点？生物物质的制成品统称为生物产品；基本原理 ：利用混合物中不同组分间物理、化学和生物学性质的差别来实现组分间的分别或纯化；技术原理 ：选用能够识别这些差别的分别介质或扩大这些差别的分别设备来实现组分间的高效分别；特点： 环境复杂、分别纯化困难含量低、工艺复杂 稳固性差、操纵要求严格 目标产物最终的质 量要求很高 终极产品纯
16、度的均一性与化学分别上纯度的概念并不完全相同 4、发酵生物产品分别纯化的生产工艺？原材料的预处理颗粒性杂质的去除可溶性杂质的去除和目标产物的初步纯化目标产物精制目标 产物的成品加工 其次章 6、预处理的目的？使目标产物最大限度的转移到溶液中；7、转变发酵液过滤特性的基本方法？降低液体黏度 （常用加水稀释法和加热法）调整 pH（转变物质的电离度和电荷性质）加入反应剂 （沉淀杂质）加入助滤剂（不行压缩的多孔微粒,使滤饼疏松,增大滤速）凝结和絮凝 8、对发酵液相对纯化的基本方法？高价无机离子（ Ca2+、Mg2+、Fe2+）Ca2+ 草酸钠草酸钙沉淀 （回收草酸） Mg2+ 三聚磷酸钠三聚磷酸钠镁络
17、合物 Fe2+ 黄血盐普鲁 士蓝沉淀 杂蛋白沉淀变性加热大幅度调解pH 加酒精、丙酮等有机溶剂或表面活性剂吸附法9、凝结和絮凝的作用原理？凝结原理 ：加入电解质,中和胶体粒子的电性,夺取胶体粒子表面的水分子,破坏其表面的水膜,使胶体 粒子能集合起来 絮凝原理 ：（絮凝剂是一种能溶于水的高分子聚合物）通过静电引力、范德华引力或氢键的作用,猛烈地吸 附胶粒,形成较大的絮团 原理： 絮凝剂一般为高分子聚合物,具有长链线状结构,简洁溶于水,其相对分子质量高达数万至 1000 万 由于一个高 以上, 在长的链节上含有相当多的活性功能团；絮凝剂的功能团能猛烈地吸附在胶粒的表面,分子絮凝剂的长链节上含有相当
18、多的活性功能团,所以一个絮凝剂分子可分别吸附在不同颗粒的表面,从 而产生架桥链接；11、离心分别的常用方法及特点？差速离心法速率区带离心法最大的梯度密度低于最小密度的沉降样品在最高的沉降物质达到管底前停止,短时间,低速度名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 等密度离心法最大的梯度密度大于密度最大的沉降样品使各组分沉降到其平稳的密度区,长时间,高速度 11、离心分别的常用设备类型及特点？依据其离心力大小,可分为低速离心机、高速离心机和超离心机；按型式可分为管式、碟片式等； 按作用原理不同可分为过滤式离心机和沉降式离心机两
19、大类；按出渣方式可分为人工间歇出渣和自动出 渣等方式；第三章 15、常用细胞破裂的方法分类作 用 机 理适应性机珠磨法固体剪切作用可达较高破裂率,可较大规模操作,大分子目的产物易失活,浆液分械高压匀浆法液体剪切作用离困难法可达较高破裂率,可大规模操作,不适合丝状菌和革兰氏阳性菌非超声破裂法液体剪切作用对酵母菌成效较差,破裂过程升温猛烈,不适合大规模操作X-press 法固体剪切作用破裂率高,活性保留率高,对冷冻敏锐目的产物不适合酶溶法酶分解作用具有高度专一性,条件温顺,浆液易分别,溶酶价格高,通用性差机化学渗透法转变细胞膜的渗透性具肯定挑选性,浆液易分别,但释放率较低,通用性差械法渗透压法渗透
20、压猛烈转变破裂率较低,常与其他方法结合使用冻结融解法反复冻结 - 融解破裂率较低,不适合对冷冻敏锐目的产物干燥法转变细胞膜渗透性条件变化猛烈,易引起大分子物质失活16、沉析分别的依据是什么？通过加入某种试剂或转变溶液条件,使目标产物以固体形式从溶液中沉降析出的分别纯化技术；17、盐析法的原理是什么？在高浓度中性盐存在的情形下,蛋白质等生物大分子在水溶液中的溶解度降低并沉淀析出的现象称为盐析18、影响盐析的因素有哪些？蛋白质浓度的影响离子强度和离子类型的影响 pH的影响温度的影响 20、常用的蛋白质沉淀方法有哪些？盐析法有机溶剂沉淀法等电点沉淀法挑选性变性沉淀法有机聚合物沉淀21、 有机溶剂沉淀
21、法的原理和特点？作用机理：（1）降低水溶液的介电常数,使溶质溶解度降低；（2）破坏大分子四周水膜,使溶解度降低；利用不同蛋白质在不同浓度的有机溶剂中的溶解度不同而使蛋白质分别的方法,称为有机溶剂沉淀法；常常使用的有机溶剂是 乙醇和丙酮 ；原理： 有机溶剂加入使溶液介电常数减小,溶质之间静电作用增加；有机溶剂破坏溶质的水化层,使溶质间的作用力增加；优点： 比盐析法析出的沉淀简洁过滤或离心分别,辨论力比盐析法好,溶剂也简洁除去；名师归纳总结 缺点：有机溶剂沉淀法易使蛋白质和酶变性,所以操作必需在低温条件下进行；蛋白质和酶沉淀分别后,第 5 页,共 17 页应立刻用水或缓冲液溶解,以降低有机溶剂浓度
22、,防止变性；成本较高,有肯定的危急性；- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 22、等电点沉析原理和特点？利用蛋白质在等电点时溶解度最低以及不同的蛋白质具有不同等电点一这特性,对蛋白质进行分别纯 化的方法称为等电点沉淀法；沉淀机理：空间位置排斥效应；试剂溶解度大,在水中占据大部分空间,将需沉淀物相互靠近,增加 碰撞机率；优点：（ 1）操作条件温顺,不易引起变性；（2）具有极高的沉淀效率；（ 3）沉淀后多聚物简洁除去；应用：沉淀分别细菌,病毒蛋白；原理： 两性电解质处于等电点时,分子表面净电荷为 0,双电层和水化膜结构被破坏,溶解度降低；特点： 等电点沉淀法只
23、适用在等电点时溶解度很低的两性生化物质 23、有机聚合物沉析原理和特点？利用生物大分子与某些有机聚合物形成沉淀而析出的分别技术称为有机聚合物沉析；P52 24、结晶操作的原理是什么？当溶液处于过饱和状态时,分子间的分散或排斥作用小于分子间的相互吸引作用；结晶是一个以过饱和度为推动力的质量与能量的传递过程；25、过饱和溶液形成的方法有哪些？将热饱和溶液冷却26、稳固、亚稳固和不稳固区溶液的特点？将部分溶剂蒸发3 个主要过程的特点？稳固区溶液稳固；化学反应结晶亚稳固区加入晶核,晶体成长解析法不稳固区溶液自发形成结晶27、结晶操作中过饱和溶液的形成 晶核的形成 ：晶核是在过饱和溶液中最先析出的微小颗
24、粒；晶核的大小通常在几个纳米到几十个纳米；晶体的生长 ：溶液主体的溶质传递到晶体表面,溶质进入适当的晶格位置,结晶产生的热量传导到溶液中 第四章 29、色谱分别技术的概念 利用不同组分在固定相和流淌相中的物理化学性质的差别,使各组分在两相中以不同的速率移动而进一步 分别的技术；30、色谱分别系统的组成 色谱分别系统包括两个相：固定相,流淌相；纸色谱液体固定相涂在纸上31、色谱分别技术的分类 依据分别时一次进样量的多少分类薄层色谱固定相涂敷在玻璃或金属板上 柱色谱固定相装在圆柱管中名师归纳总结 分析规模 小于 10mg 按分别机理不同分类第 6 页,共 17 页半制备规模 1050mg 吸附色谱
25、法制备规模 0.110g 安排色谱法生产规模 10g 离子交换色谱法依据流淌相的相态不同分类凝胶色谱法气相色谱以气体作流淌相亲和色谱法液相色谱以液体作流淌相依据操作压力的不同分类超临界流体色谱流淌相是在接近它的临界温度低压色谱：操作压力0.5MPa 和压力下工作的液体中压色谱：操作压力0.5 4.0MPa 依据固定相的附着方式分类：高压色谱：操作压力4.0 40MPa- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 32、色谱法的特点分别效率高灵敏度高分析速度快应用范畴广缺点： 处理量小；操作周期长；不能连续操作；33、吸附色谱分别技术的要点 吸附法的关键是挑选吸附剂
26、和绽开剂 34、离子交换树脂的基本结构 三维空间网状骨架骨架上连接官能团官能团携带相反电荷的离子 35、离子交换树脂的分别原理36、离子交换树脂分别的工艺过程37、离子交换树脂的理化性能 离子交换树脂的挑选1交联度（ 4%14%）离子交换树脂的预处理2交换容量（36mmol/g）离子交换操作条件的挑选3粒度 粒度越小,交换速率越快离子交换过程4酸碱度洗脱过程5稳固性树脂的再生6膨胀度和机械强度树脂交换操作第五章 1、过滤技术的概念及过滤的原理 概念 ：过滤技术是将固体颗粒与液体进行分别的一种技术,是溶解物与不容物的分别；原理 ：利用多孔性介质截留固液悬浮液中的固体粒子,进行固液分别的方法称为过
27、滤（推动力：重力、压力和离心力）2、过滤的目的：获得清净的液体产品,也可能是为了得到固体产品 3、过滤分类：按料液流淌方向：常规过滤、错流过滤 按操作压力：常压过滤、减压过滤和加压过滤按过滤方式：表面过滤和深层过滤 4、过滤的介质 过滤的介质应由惰性材料制成；耐酸耐碱耐热适用于各种溶液的过滤；过滤阻力小,滤速快,反复利用,易清洗；具有足够的机械强度,廉价易得 5、常用的过滤介质：滤纸、脱脂棉、织物介质、微孔滤膜等 6、过滤装置 一般漏斗、垂熔玻璃滤器、砂滤棒、板框式压滤机、微孔滤膜过滤器 7、常用的过滤方法 深层过滤（深层过滤有滤芯和滤膜两种）筛式过滤（过滤分别取决于滤片基质孔径的大小）系列膜
28、过滤（使用圆盘夹膜式滤器,依次降低所用膜的孔径）8、影响过滤的因素 混合物中悬浮微粒的性质和大小混合液的黏度操作条件助滤剂的使用 9、膜分别技术的概念 是指利用自然或人工合成的具有挑选透过性的薄膜,以外界能量或化学位差为推动力对双组分或多组分体系进行分别、分级、提纯或富集的过程 10、膜的分类 按膜孔径大小：微滤膜、超滤膜、反渗透膜、纳米过滤膜名师归纳总结 - - - - - - -第 7 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 按膜的结构：对称性膜、不对称性膜、复合膜 按材料分：无机材料膜、高分子合成聚合物膜 11、膜的性能 耐压、耐温、耐酸碱 性、化学相容性、生物
29、相容性、低成本 12、膜分别技术的特点 处理效率高、设备易于放大；可在室温或低温操作化学与机械强度小、削减失活 无相变、节能挑选性好、可达到部分纯化目的回收率较高 13、膜组件 的定义 由膜、固定膜的支撑体、间隔物以及收纳这些部件的容器构成的一个单元称膜组件或膜装置 14、膜组件的形式 管式、螺旋卷式、毛细管式、中空纤维式、平板式 15、微滤技术的概念及原理概念 ：利用辩分原理截留直径为0.0510 微米大小的粒子的膜分别技术0.110 微米的微生物粒子截留下来,原理 ：利用微孔滤膜的筛分作用,在静压差推动下, 将滤液中尺寸大于以实现溶液的净化、分别和浓缩的技术；16、微滤的操作方式 死端微滤
30、和错流微滤 17、微滤膜的特性 孔径的均一性间隙率高滤材薄 18、 超滤的定义 凡是能截留相对分子质量在 500以上的高分子的膜分别过程称为超滤 19、超滤的原理 膜表面很多微孔截留住了分子直径大于孔径的溶质和颗粒从而达到分别的目的 20、超滤的特点和影响因素特点 ：膜材料无毒无害膜有较好的耐酸碱耐溶剂性能低压操作超滤装置无污染成本低、回收率高影响 ：溶质的分子性质、溶质的浓度、温度、压力 21 、超滤前的预备：充分明白超滤膜的性能、正确安装超滤装置、超滤膜清洗消毒处理后的检测、对加工溶液的要求、洗滤、超滤操作参数的优化、超滤膜的清洗储存（作为明白）22 、超滤设备 搅拌式超滤、无搅拌式超滤、
31、中空纤维超滤 23、透析技术 透析是一种扩散掌握的,一浓度梯度为驱动力的分别方法；24、反渗透技术 一种只能透过溶剂而不能透过溶质的膜一般称为抱负的半透膜名师归纳总结 分别技术类型反渗透超滤微孔过滤膜的形式表面致密的非对称膜、复合膜等非对称膜,表面有微孔微孔膜膜材料纤维素、聚酰胺等聚丙烯腈、聚砜等纤维素、 PVC等操作压力 /MPa21000.1 0.50.01 0.2分别的物质分子量小于 500的小分子物质分子量大于500的大分子和细0.1 10 m的粒子小胶体微粒第 8 页,共 17 页- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 分别机理非简洁筛分,膜的物化
32、性能对分别起筛分 ,膜的物化性能对分别起筛分, 膜的物理结构对主要作用肯定作用分别起打算作用水的 渗透 通量0.1 2.50.5 520 200/m3.m-2.d-1第六章 1、萃取的概念 依据混合物中不同组分在溶剂中的溶解度不同,将所需的组分分别出来,这个操作过程称为萃取 2、萃取的分类 依据参加溶质安排的两相不同分类液液萃取 液固萃取 组分数目不同分类多组元体系 三元体系 有无化学反应分类 物理萃取 化学萃取萃取剂的种类和形式分类双水相萃取溶剂萃取反胶团萃取凝胶萃取超临界萃取3、萃取的特点 萃取过程具有挑选性 能与其他需要的纯化步骤相协作分别效率高,生产才能大 传质速速快,生产周期短 4、
33、萃取的 原理萃取是一种扩散分别操作,不同溶质在 5、工艺流程 混合分别回收 6、影响溶剂萃取的主要因素 PH、温度、盐析作用、溶剂性质 7、双水相的定义两相中安排平稳的差异实现萃取分别两种不相容的亲水性高分子 聚合物在水溶液中形成的两相双水体系形成的缘由：由于较强的斥力或空间位阻,相互之间无法渗透,在肯定条件下,即可形成双水相体系亲水性聚合物水溶液和一些无机盐相混时 8、双水相萃取原理 溶质在两相中的溶解才能不同,遵守安排定律,也因盐析作用会形成双水相体系K=上相平稳总浓度 / 下相平稳总浓度名师归纳总结 9、双水相萃取的特点：目的产物的萃取第 9 页,共 17 页相混合能耗低 PEG的循环达
34、到萃取平稳所需时间短无机盐的循环易进行工业放大11、影响双水相萃取的影响易实现连续操作成相高聚物浓度的影响步骤简便、通用性强成相高聚物的分子量的影响适于易失活的蛋白质酶的提取纯化盐的影响10、双水相萃取的工艺流程 PH的影响- - - - - - -精选学习资料 - - - - - - - - - 温度的影响抗生素的分别与提取12、 双水相萃取技术的应用 自然植物药用有效成分的分别与提取 基因工程药物的分别与提取酶工程药物的分别与提取 13、当三相成平稳态共存的点 称三相点 14、液气两相成平稳状态的点叫临界点 15、处于临界温度临界压力以上的流体叫做超临界流体 16、萃取原理 在温度不变的条
35、件下,压力增加,其密度增加,其溶解度随之增加；压力不变的情形下,温度上升,密度降低,溶解度随之降低 17、超临界流体萃取的基本方法 等温法、等压法、吸附法 18、超临界流体萃取的特点 萃取和分别合二为一压力和温度都可以调剂萃取过程的参数萃取的温度低临街 CO2常态下是气体 无毒超临界流体的极性可转变 20、超临界流体萃取的应用 细胞破裂、催化作用、去除杂质、杀菌作用 第七章 1、浓缩的目的作为结晶和干燥的预处理提高产品质量削减产品的体积和重量增加产品的贮存时间2、浓缩的原理 指总固形物与溶剂部分分别的过程,使生物制品原料中水浓度降低到复合工艺要求的过程 3、蒸发浓缩的 定义蒸发是溶液 表面的溶
36、剂分子获得的动能超过了溶液内溶剂分子的吸引力而脱离液面逸向空间的过程 4、常用浓缩技术 蒸发浓缩、膜浓缩、冷冻浓缩、凝胶浓缩 5、冷冻干燥的过程预冻初级干燥次级干燥（冷冻温度为-10-50 C）6、干燥的定义：浓缩物料脱水的过程热干燥技术 ： 指将物料加于湿物料并排除挥发性湿分,获得肯定湿含量固体产品的过程 7、冷冻干燥技术原理 通过升华从冻结的生物中去掉水分的过程 8、干燥曲线 在恒定的干燥条件下,以干燥时间为横坐标,物料湿含量为纵坐标可得干燥曲线（预热阶段恒速干燥阶段、降速干燥阶段）第一章 绪论一、名词说明 生物物质 生化分别技术 二、填空题1. 生物物质的来源、；2. 生物分别纯化工作依
37、据生产规模可分为三个层次3. 蛋白质储存方法、；三、挑选题名师归纳总结 - - - - - - -第 10 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 1. 挑选生物物质分别纯化技术和工艺的依据（）A、物理性质 B 、化学性质 C、生物学性质 D、生理性质2、生物活性越高的成分,一般它在物质中的含量越（）；A、高 B 、低 C、一般 D、无法提取3 分别纯化过程需要加入（）保持生物大分子的活性；A、糖类 B 、缓冲溶液 C 、中性盐 D 、半胱氨酸四、简答题1. 生物分别纯化的特点？2. 生物分别纯化原材料的挑选要留意哪些问题？3. 影响生物产品储存的主要因素？其次章 预
38、处理技术一、名词说明凝结作用：絮凝作用：凝结值：二、填空题1组织与细胞的破裂方法有、；3. 加入助滤剂的方法、；4. 除去杂蛋白的常用方法、；5. 凝结值越小,就凝结剂的凝结才能越；6. 检查细胞破裂成效的方法有三、挑选题1. 大多数蛋白质的等电点在（）范畴；A、酸性 B 、碱性 C 、中性 D、不固定2. 加入助滤剂可使滤液（）A、滤速增大 B 、滤速减小 C 、增加成本 D 、保持渗透性3. 除去钙离子的试剂（）A、草酸 B、草酸钙 C、草酸钠 D、铁离子4分别 DNA、RNA混合物（）A、速度区带离心法 B、差分别心法C、等密度区带离心法 D、平稳等密度区带离心法5分别大小不同、密度不同
39、的物质（）A、速度区带离心法 B、差分别心法C、等密度区带离心法 D、平稳等密度区带离心法6分别大小相近、密度不同的物质（）A、速度区带离心法 B、差分别心法C、等密度区带离心法 D、平稳等密度区带离心法7分别大小不同、密度相近的物质（）A、速度区带离心法 B、差分别心法C、等密度区带离心法 D、平稳等密度区带离心法四、简答题1. 转变发酵液过滤特性的方法有哪些？2. 影响絮凝成效的因素有哪些？3. 超声波破裂法的特点？名师归纳总结 - - - - - - -第 11 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 4. 进行细胞破裂所使用的表面活性剂有哪些？5. 影响离心成
40、效的因素有那些？6. 常用的离心设备有哪些？一、名词说明（每题2 分）第三章固相析出分别法1结晶2盐析法二、填空（每空 1 分）1常用的盐析用盐有、4固相析出法主要包括、及其它多种沉淀方法；5结晶的三个过程、6常用的结晶法有、；7固相分别法中析出物为晶体称为 法,析出物为无定形固体为称 法；三、挑选题（每个 1 分）（）1盐析法是利用各种生物分子在溶液中 的差异进行分别提纯的；A、溶解度 B 、离子强度 C 、温度 D 、纯度（）2在挑选沉淀用有机溶剂时,介电常数,沉淀作用,、对生物分子的变性作用 毒性 A、小、强、小、小 B 、大、强、小、小 C 大、小、小、小、 D小、大、大、小（）3以下
41、关于沉淀用有机溶剂的说法不正确选项A、介电常数大,沉淀作用强 B 、对生物大分子的变性作用小 C 毒性小,挥发性适中 D 、能与水无限混溶（）4使用有机溶剂沉淀生物大分子时,应在 下进行；A、低温 B 、高温 C 、任何温度 D 、与温度无关（）5下面哪些可以作为助沉剂使用A、 NaAc B 、 NaCl C 、NH42S04 D 、 NH4Ac E 、Na2S04 （）6常用的沉淀用有机溶剂有水 B 、乙醇 C 、丙酮 D 、甲醇 E 、氯仿（）7固相析出分别法分为A、盐析法 B、PI 沉淀法 C、结晶法 D 、有机溶剂法（）8影响盐析法的主要因素有A、溶质种类 B、溶质浓度 C、PH值 D
42、、盐析温度（）9下面关于 SDS的说法正确选项A、是一种常用的沉淀剂 B 、是一种常用的提取试剂 C 、是一种常用的盐析剂D、是一种常用的萃取剂（）10既可以用于提取核酸,有可以用于分别胰蛋白的是A、 CTAB B、 CPC C、 SDS D、 TCA （）11PEG可以用于A、浓缩 B 、干燥 C 、作为沉淀剂 D 、双水相萃取 E 、竞争性结合剂（）12有机溶剂可以用于A、浓缩 B 、脱水干燥 C 、沉淀 D 、结晶 E、提取 F 、萃取五、简答题（每题 5 分）1常用的盐析用盐及其优、缺点；2盐析法的原理？3用有机溶剂沉淀法时,如何挑选有机溶剂的种类？4盐析法的留意事项有哪些名师归纳总结 - - - - - - -第 12 页,共 17 页精选学习资料 - - - - - - - - - 5如何挑选盐析用盐第四章