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1、学习好资料欢迎下载1. （2016 江苏卷 .33 ）（9 分）下表是几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图 2 中标注了相关限制酶的酶切位点，其中切割位点相同的酶不重复标注。请回答下列问题：（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用_两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过_酶作用后获得重组质粒。为了扩增重组质粒，需将其转入处于_态的大肠杆菌。（2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加_，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物组成为图2 中_。（3）若BamH I酶切的 DNA末端与Bcl I 酶切的 DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为，对
2、于该部位，这两种酶（填“都能”、 “都不能”或“只有一种能”）切开。（4）若用Sau3A I 切图 1 质粒最多可能获得种大小不同的DNA 片段。2. （2016 课标 1 卷.40 ）某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到 Ampr或 Tetr中会导致相应的基因失活（ Ampr表示氨苄青霉素抗性基因，Tetr表示四环素抗性基因） 。有人将此质粒载体用BamHI酶切后， 与用 BamHI酶切获得的目的基因混合， 加入 DNA连接酶进行连接反应，用得到的混合物直接转化大肠杆菌， 结果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。 被转化的大肠杆菌有三种，分别是含有环状目的基因、含有质粒载体、 含有插入了目的
3、基因的重组质粒的大肠杆菌。回答下列问题：（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具备的基本条件有_（答出两点即可） 。而作为基因表达载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终止子。（2）如果用含有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅含有精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 1 页，共 4 页学习好资料欢迎下载环状目的基因的细胞是不能区分的，其原因是_；并且 _和_的细胞也是不能区分的，其原因是_。在上述筛选的基础上，若要筛选含有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用含有是_的固体培养基。（3）
4、基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_ 3. （2016 新课标卷 .40 ）图（ a）中的三个DNA片段上依次表示出了EcoR I 、 BamH I 和 Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点，图（ b）为某种表达载体示意图（载体上的EcoR I 、Sau3A I 的切点是唯一的）。根据基因工程的有关知识，回答下列问题：（1）经 BamH I 酶切割得到的目的基因可以与上述表达载体被_酶切后的产物连接，理由是 _。（2）若某人利用图（b）所示的表达载体获得了甲、乙、丙三种含有目的基因的重组子，如图（c）所示。这三种重组子中，不能在宿主细胞中表达
5、目的基因产物的有_，不能表达的原因是_。（3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常见的有_和_，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是_。4. （2016 天津卷 .7 ） (12 分) 人血清白蛋白 (HSA) 具有重要的医用价值，只能从血浆中制备。下图是以基因工程技术获取重组HSA （rHSA）的两条途径。精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 2 页，共 4 页学习好资料欢迎下载（1）获取 HSA基因，首先需采集人的血液，提取_合成总 cDNA ，然后以cDNA为模板，采用 PCR技术扩增HSA基因。下图中箭头表示一条引物结
6、合模板的位置及扩增方向，请用箭头在方框内标出标出另一条引物的位置及扩增方向。（2）启动子通常具有物种及组织特异性，构建在水稻胚乳细胞内特异表达rHSA的载体，需要选择的启动子是 _（填写字母，单选） 。A.人血细胞启动子 B.水稻胚乳细胞启动子 C. 大肠杆菌启动子 D. 农杆菌启动子（3） 利用农杆菌转化水稻受体细胞的过程中，需添加酚类物质， 其目的是 _。（4）人体合成的初始HSA多肽，需要经过膜系统加工形成正确的空间结构才能有活性。与途径II相比，选择途径I 获取 rHSA 的优势是 _ 。（5）为证明rHSA具有医用价值，须确认rHSA与 _的生物学功能一致。5. （2016新课标 2
7、卷.40) （15分）下图表示通过核移植等技术获得某种克隆哺乳动物（二倍体）的流程。回答下列问题：（1）图中 A表示正常细胞核，染色体数为2n，则其性染色体的组成可为_。过程表示去除细胞核，该过程一般要在卵母细胞培养至适当时期再进行，去核时常采用_的方法。代表的过程是 _。（2）经过多次传代后，供体细胞中_的稳定性会降低，因此，选材时必须关注传代次数。（3）若获得的克隆动物与供体动物性状不完全相同，从遗传物质的角度分析其原因是_。（4）与克隆羊“多莉（利）”培养成功一样，其他克隆动物的成功获得也证明了_。6. （2016 海南卷 .31 ）基因工程又称为DNA 重组技术，回答相关问题：（1）在
8、基因工程中，获取目的基因主要有两大途径，即_和从 _中分离。（2）利用某植物的成熟叶片为材料，同时构建cDNA文库和基因组文库，两个文库相比，cDNA文库中含有的基因数目比基因组文库中的少，其原因是_。（3）在基因表达载体中，启动子是_识别并结合的部位。若采用原核生物作为基因表达载体的精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 3 页，共 4 页学习好资料欢迎下载受体细胞，最常用的原核生物是_。（4）将目的基因通过基因枪法导入植物细胞时，常用的携带目的基因的金属颗粒有_和_颗粒。7. （2016 上海卷 .9 ） 回答下列有关遗传信息传递与表达
9、的问题。在图 27 所示的质粒PZHZ11 （总长为3.6kb ，1kb=1000 对碱基因）中，lacZ基因编码-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色。(1) 若先用限制酶BamHI 切开 pZHZ11 ，然后灭活BamHI 酶，再加DNA连接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含3.1kb 质粒的细胞颜色为；含3.6kb 质粒的细胞颜色为。(2) 若将两端分别用限制酶BamHI 和BglHI 切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中 0.5kb 的BamHI 酶切片段，形成4.9kb 的重组质粒，则目的基因长度为kb。(3) 上述 4.9kb 的重组质粒有两种形式，若用BamHI 和EcoRI 联合酶切其中一种，只能获得1.7kb 和3.2kb 两种 DNA片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得kb 和 kb 两种 DNA片段。(4) 若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中表达，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观察其生物功能是否发挥，那么上述过程属于。A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程精选学习资料 - - - - - - - - - 名师归纳总结 - - - - - - -第 4 页，共 4 页