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1、培养基与微生物的分离培养基与微生物的分离 二、微生物的分离与鉴定二、微生物的分离与鉴定 微生物的分离方法有很多种，本专题中常用的是：平板微生物的分离方法有很多种，本专题中常用的是：平板划线法、稀释涂布平板法、微生物的选择培养等。针对不同划线法、稀释涂布平板法、微生物的选择培养等。针对不同微生物的特点选择不同的方法，对目的微生物进行筛选。以微生物的特点选择不同的方法，对目的微生物进行筛选。以下是尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定比较。下是尿素分解菌和纤维素分解菌的分离与鉴定比较。尿素分解菌的分离与尿素分解菌的分离与鉴定鉴定纤维素分解菌的分离与鉴定纤维素分解菌的分离与鉴定分离选分离选择条件择条件
2、利用尿素为唯一氮源利用尿素为唯一氮源 利用纤维素为唯一碳源利用纤维素为唯一碳源鉴定鉴定原理原理细菌等微生物合成脲细菌等微生物合成脲酶，将尿素分解产生酶，将尿素分解产生NH3，使，使pH升高，升高，加入酚红变红色加入酚红变红色分解纤维素的微生物产生纤维分解纤维素的微生物产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二素酶，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素糖或葡萄糖，使纤维素刚果刚果红复合物降解而出现透明圈红复合物降解而出现透明圈步骤步骤土壤取样土壤取样制备培养制备培养基基样品梯度稀释样品梯度稀释涂布平板涂布平板培养观察培养观察进一步鉴定进一步鉴定土壤取样土壤取样制备培养基制备培养基选择选择培养培养富集
3、培养富集培养梯度稀释梯度稀释涂布培养涂布培养刚果红染色刚果红染色挑取挑取菌落菌落进一步鉴定进一步鉴定1(2011重庆高考重庆高考)下列有关细菌培养的叙述，正确的是下列有关细菌培养的叙述，正确的是 ()A在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌在琼脂固体培养基上长出的单个菌落含有多种细菌B在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长C向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长向液体培养基中通入氧气能促进破伤风杆菌的生长D在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动在半固体培养基中接种细菌培养后可以观察其运动解析：解析：单个菌落中只含有一种细菌；青
4、霉素抑制细菌生单个菌落中只含有一种细菌；青霉素抑制细菌生长，而对真菌没有影响；破伤风杆菌是厌氧型细菌，通入长，而对真菌没有影响；破伤风杆菌是厌氧型细菌，通入氧气会抑制其生长。氧气会抑制其生长。答案：答案：D2微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患微生物与人类关系密切。虽然有些微生物能使动植物患病，但多数微生物对人类是有益的，请回答下列有关问病，但多数微生物对人类是有益的，请回答下列有关问题：题：(1)下表为两种微生物的培养基配方。下表为两种微生物的培养基配方。A培养基：培养基：KH2PO4Na2HPO4MgSO47H2O 葡萄糖葡萄糖 尿素尿素琼脂琼脂1.4 g2.1 g0.2 g1
5、0.0 g1.0 g 15.0 gB培养基：培养基：纤维纤维素粉素粉NaNO3Na2HPO47H2OKH2PO4MgSO47H2OKCl酵母酵母膏膏水解水解酪素酪素5 g1 g1.2 g0.9 g0.5 g0.5 g 0.5 g0.5 g将上述两种培养基中的物质分别溶解后，均用蒸馏水定容到将上述两种培养基中的物质分别溶解后，均用蒸馏水定容到1 000 mL。如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择上如果要进行土壤中分解尿素的细菌的分离，则需要选择上述哪种培养基？述哪种培养基？_，该培养基能分离尿素分解菌的原，该培养基能分离尿素分解菌的原因是因是_。在该培养基中可加入在该培养基中可加入_
6、指示剂，根据指示剂的颜色指示剂，根据指示剂的颜色可鉴定该种细菌能够分解尿素。可鉴定该种细菌能够分解尿素。从功能上来看，上述两种培养基均属于从功能上来看，上述两种培养基均属于_培养基。培养基。(2)把牛肉膏蛋白胨固体培养基倒入平板，等培养基冷凝后，把牛肉膏蛋白胨固体培养基倒入平板，等培养基冷凝后，应将平板应将平板_放置，这样做的目的是可防止放置，这样做的目的是可防止_造成造成污染。污染。(3)微生物接种的方法很多，平板划线法操作结束时，为什么微生物接种的方法很多，平板划线法操作结束时，为什么仍需要灼烧接种环？仍需要灼烧接种环？_。(4)微生物培养过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物微生物培养
7、过程中还有什么方法或步骤要防止其他微生物污染？污染？_、_、_。解析：解析：在进行土壤中分解尿素的细菌的分离时，培养基中在进行土壤中分解尿素的细菌的分离时，培养基中尿素是唯一的氮源，只有能分解尿素的微生物才能生长繁尿素是唯一的氮源，只有能分解尿素的微生物才能生长繁殖，这种培养基属于选择培养基。接种时及接种操作结束殖，这种培养基属于选择培养基。接种时及接种操作结束后，仍需要灼烧接种环以杀死接种环上残留的细菌，避免后，仍需要灼烧接种环以杀死接种环上残留的细菌，避免污染环境和感染操作者。污染环境和感染操作者。答案：答案：(1)A培养基培养基中尿素为唯一氮源，只有能培养基培养基中尿素为唯一氮源，只有能
8、分解尿素的微生物才能生长繁殖分解尿素的微生物才能生长繁殖酚红酚红选择选择(2)倒过来皿盖上的水珠落入培养基倒过来皿盖上的水珠落入培养基(3)杀死接种环上残留菌种，避免污染环境和感染操作者杀死接种环上残留菌种，避免污染环境和感染操作者(4)培养基灭菌接种环境灭菌接种过程无菌操作培养基灭菌接种环境灭菌接种过程无菌操作KH2PO41.4 gNa2HPO42.1 gMgSO47H2O0.2 g葡萄糖葡萄糖10 g尿素尿素1 g琼脂琼脂15 g将上述物质溶解后，用自来水定容到将上述物质溶解后，用自来水定容到1 000 mL(1)培养基中加入尿素的目的是培养基中加入尿素的目的是_，这种培养基属于，这种培养基属于_培养基。培养基。(2)“目的菌目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的_和和_，实验需要振荡培养，原因是，实验需要振荡培养，原因是_。(3)在以尿素为唯一氮源的培养基中加入在以尿素为唯一氮源的培养基中加入_，细菌合，细菌合成的成的_将尿素分解为氨，将尿素分解为氨，pH增高，使指示剂变红。增高，使指示剂变红。19 结束语结束语