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1、一、一、PCV2PCV2病原学病原学l9090年代年代 PK-15PK-15细胞培养污染面的细胞培养污染面的PCVPCV成为成为PCV1PCV1（非致病性病毒）（非致病性病毒）l9999年年 新出现的新出现的PCVPCV命名为命名为PCV2PCV2（致病性病（致病性病毒）毒） lPCV2PCV2属于圆环病毒科属于圆环病毒科 圆环病毒属圆环病毒属 l病毒粒子直径为病毒粒子直径为14-17nm14-17nm，为已知最小的动，为已知最小的动物病毒之一物病毒之一四、四、PMWS临床症临床症状与病理变化状与病理变化l间质性肺炎、支气管周围纤维间质性肺炎、支气管周围纤维化、肝脏肿大或萎缩、变白变化、肝脏肿
2、大或萎缩、变白变硬、表面有颗粒状物覆盖、显硬、表面有颗粒状物覆盖、显微下可见大面积细胞病变及炎微下可见大面积细胞病变及炎症症l疫病后期无明显特征的黄疸疫病后期无明显特征的黄疸四、四、PDNSPDNS病理变化病理变化l猪肾皮质表面出现白点（非化脓性猪肾皮质表面出现白点（非化脓性间质性肺炎）间质性肺炎）l表现为坏死性脉管炎表现为坏死性脉管炎l死于死于PDNSPDNS的猪病理变化一般为双侧的猪病理变化一般为双侧肾肿大，肾盂水肿，肾小球肾炎，肾肿大，肾盂水肿，肾小球肾炎，脾脏梗死脾脏梗死五、五、PCV2免疫学特征免疫学特征l猪群感染猪群感染PCV2PCV2后，血清转化一般发后，血清转化一般发生在感染后
3、生在感染后14-2814-28天天六、六、PCV2PCV2诊断要点诊断要点lPMWSPMWSl生长缓慢、消瘦、持续呼吸困难、腹股沟淋巴生长缓慢、消瘦、持续呼吸困难、腹股沟淋巴结肿大、有时发生黄疸结肿大、有时发生黄疸l淋巴结组织呈现病变淋巴结组织呈现病变l病变淋巴结组织或其他组织有中等以上病变淋巴结组织或其他组织有中等以上PCV2PCV2抗抗原原六、六、PCV2PCV2诊断要点诊断要点lPDNSPDNSl皮肤出血或坏死、主要出现在后肢及会阴区域；皮肤出血或坏死、主要出现在后肢及会阴区域；肾肿大、发白及皮质大面积出血肾肿大、发白及皮质大面积出血l全身有坏死性脉管炎，坏死性及纤维素性肾小全身有坏死性
4、脉管炎，坏死性及纤维素性肾小球肾炎球肾炎六、六、PCV2PCV2诊断要点诊断要点l繁殖障碍性疾病繁殖障碍性疾病l怀孕后期的流产或死胎，有时可见明显的心肌怀孕后期的流产或死胎，有时可见明显的心肌肥大肥大l心肌损伤，表现为大面积的纤维组织增生或坏心肌损伤，表现为大面积的纤维组织增生或坏死性心肌炎死性心肌炎l心肌损伤及其它死胎组织检测到心肌损伤及其它死胎组织检测到PCV2PCV2七、七、PCV2PCV2检测方法检测方法l原位杂交法（原位杂交法（ISHISH）l免疫组织化学（免疫组织化学（IHCIHC）l血清学检测法存在的问题：因为感染血清学检测法存在的问题：因为感染PMWSPMWS猪和猪和非感染猪的
5、血清转化形式非常相似非感染猪的血清转化形式非常相似八、八、PCV2PCV2主要危害主要危害lPMWSPMWS；lPDNSPDNS；lCTCT；l繁殖障碍繁殖障碍九、九、PCV2PCV2的预防和控制的预防和控制l控制环境和其它细菌及病毒感染可降低控制环境和其它细菌及病毒感染可降低PMWSPMWS发生率发生率l研究证明，免疫激活在引发研究证明，免疫激活在引发PMWSPMWS中是一个重要因素中是一个重要因素l实际生产中，停止使用有效疫苗的风险比导致较低比实际生产中，停止使用有效疫苗的风险比导致较低比例的例的PMWSPMWS的风险大得多，免疫激活的因素不能消除的风险大得多，免疫激活的因素不能消除l研究
6、结果表明增加母源抗体可使研究结果表明增加母源抗体可使PMWSPMWS的发生率下降，的发生率下降，饲料中增加亚油酸、饲料中增加亚油酸、VEVE、SeSe也有效也有效l某些猪场哺乳仔猪皮下注射成年猪血清也有效，但带某些猪场哺乳仔猪皮下注射成年猪血清也有效，但带来严重的生物安全问题来严重的生物安全问题l疫苗的免疫接种（最有效、也切实可行）疫苗的免疫接种（最有效、也切实可行）十、十、PCV2 PCV2 疫苗类型疫苗类型l全病毒灭活疫苗全病毒灭活疫苗l重组疫苗重组疫苗lDNADNA疫苗疫苗l嵌合感染性嵌合感染性DNADNA克隆疫苗克隆疫苗l基因工程基因工程CapCap亚单位疫苗亚单位疫苗PRRSVPRR
7、SV概述概述lPRRSVPRRSV属套病毒目成员，动脉炎病毒科属套病毒目成员，动脉炎病毒科l有囊膜正链小有囊膜正链小RNARNA病毒病毒l直径直径50-65nm50-65nml表面相对平滑表面相对平滑l立方体核衣壳核心直径立方体核衣壳核心直径25-35nm25-35nm一、病毒基本生物学特征一、病毒基本生物学特征l基因多样性：基因多样性：RNARNA序列差异序列差异l对肺泡巨噬细胞对肺泡巨噬细胞(PAM)(PAM)有强亲嗜性有强亲嗜性l抗体依赖性增强作用抗体依赖性增强作用(ADE)(ADE)l在在PH6.5-7.5PH6.5-7.5条件下稳定条件下稳定l具有高度的宿主依赖性具有高度的宿主依赖性
8、l母体病毒穿透胎盘垂直传播母体病毒穿透胎盘垂直传播l持续感染且与猪只年龄无关持续感染且与猪只年龄无关二、二、PRRSVPRRSV的基因测序的基因测序研究研究l一个农场可能存在多种基因型的一个农场可能存在多种基因型的PRRSVPRRSVl不同基因型的蓝耳病毒重组的可能性较大不同基因型的蓝耳病毒重组的可能性较大l研究表明全病毒弱毒疫苗毒力可能返强研究表明全病毒弱毒疫苗毒力可能返强l使人们更好地理解了使人们更好地理解了PRRSVPRRSV毒力减弱或毒力返毒力减弱或毒力返强的分子基础强的分子基础l研究发现毒力基因，基因反向遗传技术进行研究发现毒力基因，基因反向遗传技术进行PRRSVPRRSV基因功能研
9、究，确立毒力基因基因功能研究，确立毒力基因三、三、PRRSVPRRSV致病机理致病机理l主要在肺泡巨噬细胞及其它组织的巨噬细胞中主要在肺泡巨噬细胞及其它组织的巨噬细胞中生长繁殖，也能在公猪的睾丸生殖细胞（精细生长繁殖，也能在公猪的睾丸生殖细胞（精细胞、精母细胞、多核巨细胞）中生长繁殖胞、精母细胞、多核巨细胞）中生长繁殖l主要通过内吞作用进入宿主细胞：主要通过内吞作用进入宿主细胞：PRRSVPRRSV通过通过核衣壳以出芽方式进入滑面内质网、高尔基体核衣壳以出芽方式进入滑面内质网、高尔基体或者两者的管腔而完成装配过程，装配完成后，或者两者的管腔而完成装配过程，装配完成后，病毒粒子在囊膜内聚集并迁移
10、到细胞膜，经过病毒粒子在囊膜内聚集并迁移到细胞膜，经过膜融合后释放，在一步生长条件下培养膜融合后释放，在一步生长条件下培养10-2010-20小时，滴度可达小时，滴度可达10107.37.3四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构l基因组长为基因组长为15Kb15Kb，含有，含有8 8个开放性阅读框个开放性阅读框（ORFSORFS）lORF1aORF1a和和1b1b占整个基因组的占整个基因组的80%80%，并编码所必需，并编码所必需的的RNARNA复制酶复制酶lNSPSNSPS为为ORF1aORF1a和和1b1b的翻译产物，在的翻译产物，在PRRSVPRRSV的复制的复制中发挥作用外，
11、在该病的诊断和宿主的免疫反中发挥作用外，在该病的诊断和宿主的免疫反应中有一定作用应中有一定作用lNSP2NSP2含有大量的抗原决定簇，可以被感染宿主含有大量的抗原决定簇，可以被感染宿主的免疫系统所识别的免疫系统所识别四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构 19961996年年-2006-2006年在我国流行毒株为年在我国流行毒株为经典美洲毒经典美洲毒株株NSP220062006年以来流行毒株为高致病性毒株年以来流行毒株为高致病性毒株NSP2NSP2缺少缺少9090个核甘酸个核甘酸四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构四、四、PRRSVPRRSV基因组结构基因组结构NSP2N
12、SP2缺失缺失360360个核甘酸（包含主要毒力基因）个核甘酸（包含主要毒力基因）NSP2NSP2缺少缺少9090个核甘酸个核甘酸易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株五、五、PRRSVPRRSV结构蛋白结构蛋白lPRRSVPRRSV有有6-76-7个结构蛋白，其中三个主要的结构个结构蛋白，其中三个主要的结构蛋白分别为蛋白分别为GP5GP5，M M，N NlN N蛋白较小，但在感染细胞中蛋白较小，但在感染细胞中N N蛋白的表达水平蛋白的表达水平最高，占病毒粒子总蛋白的最高，占病毒粒子总蛋白的20-40%20-40%，影响，影响rRNArRNA前体形成，进而影响核的复制
13、前体形成，进而影响核的复制lN N蛋白在免疫遗传和免疫保护方面作用不大，蛋白在免疫遗传和免疫保护方面作用不大，但由于表达水平较高，故抗原性较好，因此可但由于表达水平较高，故抗原性较好，因此可作为诊断分析的理想靶位作为诊断分析的理想靶位六、六、PRRSVPRRSV基因的多样性基因的多样性l临床表现临床表现l证实肺毒力或复制毒力的不同证实肺毒力或复制毒力的不同l通过检测多克隆和单克隆抗体而确定抗原差异通过检测多克隆和单克隆抗体而确定抗原差异lRNARNA序列的差异序列的差异l同一个猪场可能存在多种基因型的同一个猪场可能存在多种基因型的PRRSVPRRSVl欧洲以欧洲以1 1型为主、美洲以型为主、美
14、洲以2 2型为主型为主l1 1型和型和2 2型的基因重组可能性较小，反之较大型的基因重组可能性较小，反之较大七、七、PRRSVPRRSV流行病学流行病学l普通弱毒疫苗的应用使人们难以评价其流行性，因为普通弱毒疫苗的应用使人们难以评价其流行性，因为很难区分检测到的抗体是疫苗抗体还是野毒抗体很难区分检测到的抗体是疫苗抗体还是野毒抗体l普通弱毒疫苗使用后病毒排出体外并在环境中传播，普通弱毒疫苗使用后病毒排出体外并在环境中传播，使得与野毒的区分更加困难使得与野毒的区分更加困难l猪科动物均为易感动物猪科动物均为易感动物l排毒途径：唾液、鼻涕、尿液、粪便、精液、乳汁等排毒途径：唾液、鼻涕、尿液、粪便、精液
15、、乳汁等l传播途径：鼻腔、肌肉、口腔、子宫、阴道，肌肉感传播途径：鼻腔、肌肉、口腔、子宫、阴道，肌肉感染只需染只需2020个病毒粒子可使猪感染发病，肌肉感染包括个病毒粒子可使猪感染发病，肌肉感染包括剪耳、断尾、剪牙、打烙印、注射等标准操作程序，剪耳、断尾、剪牙、打烙印、注射等标准操作程序，也包括猪只之间撕咬、刮擦、咬耳、咬尾等也包括猪只之间撕咬、刮擦、咬耳、咬尾等七、七、PRRSVPRRSV流行病学流行病学l研究表明，节肢动物对研究表明，节肢动物对PRRSVPRRSV的传播有一定作的传播有一定作用，在野生苍蝇和蚊子的体内或体表检测到了用，在野生苍蝇和蚊子的体内或体表检测到了PRRSVPRRSV
16、，可发生机械传播，可发生机械传播l垂直传播，病毒对胎盘的穿透力与病毒的毒力垂直传播，病毒对胎盘的穿透力与病毒的毒力无关无关l持续感染，动物感染后，能在敏感细胞内复制持续感染，动物感染后，能在敏感细胞内复制几个月而不表现出症状，这是最为重要的流行几个月而不表现出症状，这是最为重要的流行病学特征病学特征七、七、PRRSVPRRSV流行病学流行病学l持续感染与猪的年龄无关持续感染与猪的年龄无关lPRRSVPRRSV对热和干燥敏感，遇热或干燥病毒迅对热和干燥敏感，遇热或干燥病毒迅速失活速失活lPRRSVPRRSV在在PH6.5-7.5PH6.5-7.5的条件下稳定，当的条件下稳定，当PHPH6 6或或
17、7.57.5时迅速丧失感染力时迅速丧失感染力l猪场内传播：一旦感染猪场内传播：一旦感染PRRSVPRRSV往往在一个猪往往在一个猪场内无休止地循环传播，不断感染易感场内无休止地循环传播，不断感染易感猪猪初生猪、购入猪、免疫抑制猪群初生猪、购入猪、免疫抑制猪群蓝耳病疫苗的类型蓝耳病疫苗的类型l第一代第一代 经典毒株灭活疫苗经典毒株灭活疫苗l第二代第二代 经典毒株弱毒疫苗经典毒株弱毒疫苗l第三代第三代 高致病性毒株灭活疫苗高致病性毒株灭活疫苗l第四代第四代 高致病性毒株弱毒疫苗高致病性毒株弱毒疫苗l第五代第五代 高致病性毒株基因缺失弱毒疫苗高致病性毒株基因缺失弱毒疫苗易蓝净易蓝净 基因组结构图基因组结构图NSP2NSP2缺失缺失360360个核甘酸（包含主要毒力基因）个核甘酸（包含主要毒力基因）NSP2NSP2缺少缺少9090个核甘酸个核甘酸易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株易蓝净采用的高致病性基因缺失毒株43 结束语结束语