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1、基因工程小考3.1 DNA重组技术的基本工具1.基因工程操作中用到的工具酶有 2.切割DNA分子的工具是 ，主要从 生物体内分离纯化的3.限制酶的作用是能够识别 的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的 断开4.大多数限制酶识别序列由 个核苷酸组成5.限制酶切割DNA的结果能产生 和 6.DNA连接酶包括 和 ，其中前者是从T4噬菌体中分离出来的7. 只能连接黏性末端8.构建重组DNA时，DNA连接酶需要连接 个磷酸二酯键9.基因工程使用的载体除了质粒外，还有 等10.质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞拟核DNA之外的，并且具有 能力的 11.作为基因工程的载体通常
2、需要具备以下几个条件：1.具有 ，以便外源DNA的插入；2.能在细胞中进行 ，或整合到受体 ，随受体 同步复制；3.具有 ，便于重组DNA分子的筛选12.在切割含有目的基因的DNA和载体时，与用一种限制酶相比，用两种限制酶的优点是 13.DNA不溶于 ，但某些蛋白质溶于 ，利用这一原理可以将DNA和蛋白质初步分离14.DNA遇 在沸水浴加热的条件下，会变成蓝色3.2基因工程的基本操作程序1.基因工程的基本步骤包括 2.目的基因主要指的是 的基因3.PCR全称 ；原理 ；目的是对目的基因的 进行大量复制4.引物是一段能与DNA母链的一段碱基序列 的短单链核酸5.一个目的基因复制n次，需要 种引物
3、， 个引物6.PCR扩增目的基因的过程包括 重复循环等7.构建基因表达载体的目的：让目的基因在受体细胞中 ，并且 给下一代；使目的基因能够 和发挥作用8.基因表达载体的组成包括 复制原点等9.基因表达载体中， 位于基因的上游，是 识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA10. 基因表达载体中， 位于基因的下游，作用是 11.构建基因表达载体时，常用 或者 的限制酶切割含目的基因的DNA片段和载体，再用 将二者连接起来，这样就形成了一个重组DNA12.将目的基因导入植物细胞的方法有 和 13.目的基因在受体细胞内维持稳定和表达的过程，称为 14.农杆菌在自然条件能侵染 和 ，而对大多数 没有侵
4、染能力15.目的基因进入受体细胞后，是否稳定维持和表达其遗传特性，只有通过 才能知道16.检测受体细胞的染色体DNA上是否插入了目的基因或是否转录出了mRNA，需用 等技术17.检测目的基因是否翻译出相应的蛋白质用 方法18.在个体水平上检测耐盐转基因植物是否培育成功，可以采用的方法是： 19.将目的基因导入动物细胞常用 方法20.当基因工程的受体细胞为大肠杆菌时，一般先用 处理大肠杆菌细胞，使其处于一种能吸收周围环境中 的生理状态，然后再将重组的基因表达载体导入受体细胞21.PCR利用了DNA的 原理，通过调节 来控制DNA双链的解聚和结合22. DNA分子具有可解离的基团，在一定的 下，这
5、些基团可以带上_或_；在_的作用下，带电分子会向着与它所带电荷_的电极移动，这个过程就是电泳。23.在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的_、DNA分子的_和_有关。24.凝胶中的DNA分子通过染色，可以在波长为300nm的 下被检测出来。25.为避免外源DNA等因素的污染，PCR实验中使用的微量离心管、枪头和蒸馏水等在使用前必须进行_处理。3.3基因工程的应用1.基因工程在 等方面展示出广阔的前景2.基因工程在医药卫生领域的主要应用是治疗疾病（ ）3.乳腺生物反应器的制备过程是：将药用蛋白基因与 的启动子等调控组件重组在一起，通过 方法导入哺乳动物的 中，培育成早期胚胎以后，再通过 技术培育出
6、转基因动物，该动物进入泌乳期后，可通过乳汁来生产药物4.与乳腺生物反应器相比，膀胱生物反应器的优点是 5.制备乳腺生物反应器，在胚胎移植前需要取囊胚时期的 细胞做性别鉴定6.基因工程技术对猪的器官进行改造，采用的方法是在器官供体的基因组中导入某种 ，以抑制 基因的表达，或设法除去 基因，然后结合克隆技术，培育出不会发生 的转基因克隆猪器官7.基因工程在食品工业方面的应用表现为能生产食品工业酶、 等8.用基因工程方法，使外源基因得到高效表达的菌类一般称为 3.4蛋白质工程的原理和应用1.蛋白质工程的目标是根据人们对 的特定需求，对 进行设计改造2.对蛋白质的结构进行设计改造，最终还必须通过 来完成3.蛋白质工程与天然蛋白质的合成过程 4.从预期的蛋白质功能出发设计 推测应有的 找到并改变相对应的 （基因）或 获得所需要的蛋白质。5.确定目的基因的碱基序列后，可以人工合成目的基因，或应用 技术来进行碱基的替换、增添等进而改造基因。6.蛋白质工程是指以蛋白质分子的 及其与 的关系作为基础，通过 ，来改造现有蛋白质，或制造一种新的蛋白质，以满足人类生产和生活的需求。7.蛋白质工程的直接操作对象是 8.蛋白质工程的目的是 9.蛋白质工程是在基因工程基础上延伸出来的第二代基因工程（ ）10.基因工程需要在分子水平对基因进行操作，蛋白质工程不需要对基因进行操作（ ）学科网（北京）股份有限公司