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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流一、二、三、四、五、六、七、 生物化学-酶(习题附答案).精品文档.八、 名词解释1核酶答案:具有催化活性的RNA。2酶答案:酶是生物体内活细胞合成的一种生物催化剂。3酶的竞争性抑制剂答案:抑制剂与底物化学结构相似,能与底物竞争占据酶的活性中心,形成EI复合物,而阻止ES复合物的形成从而抑制了酶的活性。4辅基答案:与酶蛋白结合牢固,催化反应时,不脱离酶蛋白,用透析、超滤等方法不易与酶蛋白分开。5辅酶答案:与酶蛋白结合松散,催化反应时,与酶蛋白可逆结合,用透析、超滤等方法易与酶蛋白分开。6酶的活性中心答案:酶与底物结合,并参与催化的部位。7酶原
2、答案:没有催化活性的酶前体8米氏常数答案:酶促反应速度为最大反应速度一半时的底物浓度。9酶的激活剂答案:能提高酶活性,加速酶促反应进行的物质。10酶的抑制剂答案:虽不引起蛋白质变性,但能与酶分子结合,使酶活性下降,甚至完全丧失活性,这种使酶活性受到抑制的特殊物质,称为酶的抑制剂。11酶的不可逆抑制剂答案:与酶的必需基团共价结合,使酶完全丧失活性,不能用透析、超滤等物理方法解除的抑制剂。12酶的可逆抑制剂答案:能与酶非共价结合,但可以用透析、超滤等简单的物理方法解除,而使酶恢复活性的抑制剂。13酶的非竞争性抑制剂答案:抑制剂与底物化学结构并不相似,不与底物抢占酶的活性中心,但能与酶活性中心外的必
3、需基团结合,从而抑制酶的活性。14酶活力答案:指酶加速化学反应的能力,也称酶活性。15比活力答案:每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数(U/mg),也称比活性或简称比活。九、 填空题1酶的化学本质大部分是 ,因而酶具有蛋白质的 性质和 结构。答案:蛋白质,理化性质,各级结构2目前较公认的解释酶作用机制的学说分别是 、 、 和 。答案:邻近与定位效应,底物变形,酸碱催化,共价催化3当酶的空间结构遭破坏时,酶的 也被破坏,酶的活性 。答案:活性中心,丧失4酶能与 结合,并将其转化成 ,这一区域称为酶的 。答案: 底物,产物,活性中心5酶所催化的反应称为 ,在酶催化反应中,被酶催化的物质称为 ,反应生成物
4、称为 ,酶所具有的催化能力称为 。答案:酶促,底物,产物,酶活力6酶的英文是 。答案:Enzyme7酶的催化效率可比一般催化剂高 倍,其加快反应的作用在于 。答案:105-1013,大大降低了活化能8单纯酶的催化活性仅由它们的 结构所决定。答案:酶蛋白9结合酶的催化活性,除蛋白质部分外,还需要 ,它们可以是 ,也可以是 。答案:辅助因子,有机小分子,金属离子10酶的辅助因子可根据它与酶蛋白结合的紧密程度不同分为 和 两大类。答案: 辅酶,辅基11LDH同工酶在心肌以 活性最高,其作用是使反应趋向于 ,有利于心肌获得 。答案: LDH1,生成丙酮酸,能量12酶所以能起催化作用,加快化学反应,是由
5、于能降低反应的 。答案: 活化能13酶活性中心的必需基团有两种,一种是 基团 ,还有一种是 基团。还有一些必需基团位于酶的 以外部位。答案: 结合基团,催化基团,活性中心14无活性状态的酶的前身物称为 ,其转化成有活性的酶的过程称为 。答案:酶原,酶原的激活15酶促反应速度受许多因素影响,这些因素主要有 、 、 、 以及 和 。答案: 酶浓度,底物浓度,温度,pH,激活剂,抑制剂16决定结合酶特异性的是 ,而辅助因子在催化反应中则直接对 起传递作用。答案:酶蛋白,电子、原子或某些基团17当底物浓度很低时,反应速度随底物浓度的增加而急剧 ,两者成 关系;随底物浓度继续增高,反应速度与底物浓度不再
6、成 关系,反应速度的增加逐渐 。答案: 增加,正比,正比,趋缓18温度对酶促反应速度的影响表现为,一方面,随着温度升高,酶促反应速度 ,另一方面,随着温度升高,当酶促反应温度在高到一定温度时 。答案: 增加,酶活性丧失19 是胃蛋白酶原激活剂, 是胰蛋白酶原的激活剂, 是唾液淀粉酶的激活剂。答案:HCl,肠激酶,Cl-20抑制剂按其作用方式可分为 和 。答案:可逆抑制剂,不可逆抑制剂21可逆抑制剂与酶蛋白通过 结合,能用 法将其除去。答案: 非共价键,透析或超滤22根据竞争性抑制的特点,在使用磺胺类药物时,必须保持血液中药物浓度远高于 的浓度,才能发挥有效的 作用。答案:对氨基苯甲酸(PABA
7、),抑菌23脲酶只能催化尿素水解,而对尿素的各种衍生物都不起作用,这是酶的 。答案: 绝对专一性24全酶是由_和_两部分组成,后者可分为_和 两类。答案: 酶蛋白,辅助因子,有机小分子,金属离子25磺胺类药物能抑制某些细菌的生长,是因为磺胺类药物是对氨基苯甲酸的 ,能 性地抑制细菌体内的 酶,从而妨碍了 的合成。答案:结构类似物,竞争性,二氢叶酸合成酶,二氢叶酸十、 判断题3非竞争性抑制剂与底物结构不相似,但也与酶的活性中心结合。答案:错误5结合蛋白酶中的辅酶与酶蛋白结合牢固,不能用透析或超滤法除去。答案:错误6氯离子是多种激酶和合成酶的激活剂。答案:错误7所有的酶在细胞内合成或初分泌时都以酶
8、原形式存在,必须经过激活才能转变为有活性的酶。答案:错误8一种酶仅能催化一种反应或仅对一种底物起催化作用,称为相对特异性。答案:错误9一种酶蛋白一般至少能与一种辅助因子结合。答案:正确10一种辅助因子只能与一种酶蛋白结合。答案:错误11醛缩酶属于水解酶类。答案:错误13心肌中LDH1活性最高,其作用是使反应趋向丙酮酸生成。答案:正确14酶能大幅度降低活化能,使反应速度加快。答案:正确15酶对底物的相对特异性是指酶对底物没有严格的选择性。答案:错误16酶在体内一般不进行自我更新。答案:错误17同工酶一般都是寡聚酶。答案:正确18对结合酶来说,辅基与辅酶也结合在酶的活性中心。答案:正确19酶的抑制
9、剂与变性剂对酶活性影响的作用方式是相同的。答案:错误20酶是由活细胞产生的具有催化功能的蛋白质,其作用与一般催化剂完全相同。答案:错误21酶分子中形成活性中心的氨基酸残基在一级结构上位置往往并不相连,而在空间结构上却处于相近位置。答案:正确22同工酶是一组功能与结构相同的酶。答案:错误23酶的最适温度是酶的特征性常数。答案:错误24酶具有很高的催化效率是因为酶能降低反应的活化能,从而使活化分子数增多,而加速了化学反应。答案:正确25酶在体外实验时,最适温度可以随作用时间的缩短而有所提高,所以最适温度不是酶的特征性常数。答案:正确26测定酶活力时, 一般测定产物的生成量比测定底物的减少量更为准确
10、。答案:正确27米氏常数km等于该酶反应最大速度一半时的底物浓度。答案:正确28酶的化学本质是蛋白质,因而具有蛋白质的理化性质和各级结构。答案:错误29当酶的空间结构遭到破坏时,酶的活性中心也被破坏,酶的活性丧失。 答案:正确30酶的英文是“Emzyme”,来自于希腊文。答案:错误31结合酶的催化活性,除蛋白质部分外,还需要一些有机小分子。答案:错误32无活性状态的酶的前身物称为酶原,其转化成有活性的酶的过程称为酶的激活。答案:错误33决定结合酶特异性的是酶蛋白部分,而辅助因子在催化反应中则直接对电子、原子或某些基团起传递作用等。答案:正确34可逆抑制剂与酶蛋白通过非共价键结合,结合比较松散,
11、能用透析或超滤法将其除去。 答案:正确35根据酶的竞争性抑制的特点,在使用磺胺类药物时,必须保持血液中药物浓度远高于Glu的浓度,才能发挥有效的抑菌作用。答案:错误36脲酶只能催化尿素水解,而对尿素的各种衍生物都不起作用,这是酶的相对专一性 。答案:错误38一种酶的激活剂可能是另一种酶的抑制剂,所以激活剂的作用是相对的。答案:正确39解磷定是有机磷农药的中毒解毒药。答案:正确40磺胺增效剂TMP的化学名称可简称为“甲氧苄胺嘧啶”,其是二氢叶酸的结构类似物,是二氢叶酸还原酶的竞争性抑制剂。答案:正确41变构酶通常处于代谢途径的开端或分支点,对调节物质代谢速度及方向极重要。 答案:正确42共价修饰
12、调节与变构调节常协同作用,使调节信号快速放大。 答案:正确43使用酶的习惯单位时,要搞清或注明单位的定义,否则无意义和可比性。 答案:正确44酶的国际单位是指“在25,最适底物浓度,最适缓冲液离子强度,以及最适 pH 等一定条件下,每分钟催化消耗1mol底物的酶量为一个酶活性单位”,简写为“IU”。答案:正确十一、 单选题1酶促反应速度与酶浓度成正比的前提条件是( )。A: 酸性条件B: 碱性条件C: 酶浓度足够大D: 底物浓度足够大答案:D2竞争性抑制剂的作用方式是( )。A: 占据酶的活性中心B: 与酶的辅基结合C: 使酶变性失活D: 与活性中心外必需基团结合答案:A3酶的化学本质大部分是
13、( )。A: 多肽B: 蛋白质C: 核苷酸D: 小分子有机物答案:B4辅酶与辅基主要区别是( )。A: 化学本质不同B: 分子大小不同C: 催化功能不同D: 与酶蛋白结合的牢固程度不同答案:D5酶的高效催化效率是因为酶能( )。A: 减少活化分子数B: 改变化学反应的平衡点C: 降低反应的活化能D: 催化热力学上不能进行的反应答案:C6胃蛋白酶作用的最适pH值是( )。A: 1.8B: 2.8C: 5.8D: 7.8答案:A7唾液淀粉酶的激活剂是( )。A: K+B: Na+C: Cl-D: Mg2+答案:C8贮存生物制品的最适温度是( )。A: 0B: 4C: 20D: -20答案:B9酶原
14、激活的生理意义是( )。A: 加速代谢B: 使酶活性提高C: 恢复酶的活性D: 避免机体自身损伤答案:D10肝脏及肌肉中活性最高的是( )。A: LDH1B: LDH2C: LDH3D: LDH5答案:D11增加底物浓度可解除其抑制作用的是( )。A: 可逆抑制B: 不可逆抑制C: 竞争性抑制D: 非竞争性抑制答案:C12同工酶多半是一种( )。A: 单体酶B: 寡聚酶C: 多活性中心酶D: 多酶体系答案:B13酶蛋白变性后活性丧失,这是因为( )。A: 酶蛋白被水解成氨基酸B: 酶蛋白的高级结构被破坏C: 失去激活剂D: 以上都是答案:B14ALT含量最多的器官是( )。A: 心脏B: 血液
15、C: 肝脏D: 肾脏答案:C15变构酶构象的改变表现为( )。A: 肽段的断裂B: 亚基的增加C: 亚基的减少D: 亚基聚合或解聚答案:D16已知酶Km值为0.05mol/L,要使此酶所催化的反应速度达最大反应速度80%时,底物浓度应是多少( )。A: 0.04mol/LB: 0.8 mol/LC: 0.2 mol/LD: 0.05 mol/L答案:C17丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制效应是( )。A: Vmax不变,Km值增加B: Vmax降低,Km值降低C: Vmax降低,Km值不变D: Vmax不变,Km值降低答案:A18酶能加速化学反应的进行是由于哪一种效应?( )A: 向反应体系提供能量
16、B: 降低反应的温度C: 降低底物的能量水平D: 降低反应的活化能答案:D19反应速度为最大反应速度的80%时,Km等于( )。 A: SB: 1/2SC: 1/4SD: 0.4S答案:C20酶的非竞争性抑制剂对酶促反应的影响是( )。A: 有活性的酶浓度减少B: 有活性的酶浓度无改变C: Vmax增加D: 使表观Km值增加答案:A21乳酸脱氢酶经透析后,催化能力显著降低,其原因最可能是( )。A: 酶蛋白变性B: 失去辅酶C: 酶含量减少D: 失去辅基答案:B22关于酶的化学修饰,错误的是( )。A: 酶以有活性(高活性),无活性(低活性)两种形式存在B: 变构调节是快速调节,化学修饰不是快
17、速调节C: 化学修饰需要酶催化D: 有共价键的形成或断裂答案:B23酶原之所以没有活性是因为( )。A: 酶蛋白肽链合成不完全B: 缺乏辅酶或辅基C: 活性中心未形成或未暴露D: 酶原是已经变性的蛋白质答案:C24Km值是指反应速度为12Vmax时的( )。A: 酶浓度B: 底物浓度C: 抑制剂浓度D: 产物浓度答案:B25下列有关酶的叙述,正确的是( )。A: 生物体内的无机催化剂B: 催化活性都需要特异的辅酶C: 对底物都有绝对特异性D: 能显著地降低反应活化能答案:D26目前发现的核酶的化学本质是( )。A: 蛋白质B: DNAC: RNAD: 核苷酸答案:C27以下哪个属于酶的特征性常
18、数?( )A: 最适温度B: 最适pHC: VmaxD: Km答案:D28以下哪个单位是比活力的?( )A: UB: U/mgC: IUD: Katal答案:B30酶作用底物的英文术语是( )。A: ProductB: EnzymeC: SubstrateD: Amino acid答案:C31辅酶英文术语是( )。A: HoloenzymeB: ApoenzymeC: Co-factorD: Co-enzyme答案:D32酶分类中的第5类酶是( )。 A: 氧化还原酶B: 转移酶C: 异构酶D: 连接酶答案:C33酶分类中需要消耗能量的一类酶是( )。A: 氧化还原酶B: 转移酶C: 异构酶D
19、: 连接酶答案:D34( )常用于判断酶和底物的亲和力。A: 最适pHB: 最适温度C: KmD: 1/Km答案:D35某酶能催化四种作用底物,米氏常数分别如下,其最适底物为( )。A: 0.1mol/LB: 0.05mol/LC: 0.025mol/LD: 0.001mol/L答案:D十二、 多选题1Km的意义包括( )等。A: 是酶的特征性常数B: 不是酶的特征性常数C: 与酶浓度有关D: 与酶浓度无关E: 能反映酶与底物的亲和力答案:A, D, E2关于酶活性中心的叙述正确的是( )。A: 必需基团集中的部位B: 位于酶分子表面,只占微小区域C: 辅助因子结合的部位D: 所有必需基团都位
20、于活性中心内E: 是酶与底物结合的部位答案:A, B, C, E3结合酶的正确叙述是( )。A: 酶蛋白上有活性中心B: 辅助因子是酶活性中心的组成部分C: 酶蛋白对辅助因子的选择性强D: 一种辅酶只能与一种酶蛋白结合E: 只有全酶才具有催化活性答案:A, B, C, E4关于竞争性抑制剂的叙述是( )。A: 其结构与底物十分相似B: 与酶的活性中心部位结合C: 结合力为非共价键D: 用增大底物浓度方法可解除抑制E: 对酶的抑制作用是不可逆的答案:A, B, C, D5关于pH能改变酶活性的叙述是( )。A: pH能影响酶的必需基团解离程度B: pH能影响底物的解离程度C: pH能影响酶与底物
21、的结合程度D: pH能影响辅助因子的解离程度E: pH能降低反应所需的活化能答案:A, B, C, D6关于同工酶的叙述,正确的是( )。A: 可催化相同的反应B: 有多种存在形式C: 不同组织中各种形式比例不同D: 不同形式的同工酶电泳区带不同E: 酶蛋白分子结构不同答案:A, B, C, D, E7酶作用的特点是( )。A: 结构不变性B: 高效的催化效率C: 活性不可调节D: 高度特异性E: 敏感性高答案:B, D, E8使酶失活的因素有( )。A: 强酸或强碱B: 低温C: 煮沸D: 中性盐E: 震荡答案:A, C, E9结合酶类的特点,下列说法正确的是( )。A: 辅助因子种类多,酶
22、蛋白种类少B: 一种酶蛋白可以与多种辅助因子结合C: 酶蛋白决定催化反应的类型D: 酶蛋白与辅助因子组成全酶才有活性E: 一种酶蛋白多只能与一种辅助因子结合答案:D, E10对于变构酶特点的叙述,正确的是( ) 。A: 均为单体酶,由一个亚基组成B: 除具有活性中心外,还具有调节中心C: 催化部位与调节部位均不在同一亚基上D: 与底物结合起催化作用亚基称催化亚基E: 与变构剂结合起调节作用的亚基称调节亚基答案:B, D, E11体内酶活性调节的特点有( )。A: 快速B: 缓慢C: 持续长久D: 持续较短暂E: 不能持续答案:A, D12酶活性调节方式包括( )。A: 诱导合成B: 酶原激活C
23、: 阻遏合成D: 变构作用E: 共价修饰答案:B, D, E13生物体内能对酶数量进行调节,其特点有( )。A: 作用快速B: 作用缓慢C: 维持时间短暂D: 维持时间长久E: 可调性不大答案:B, D14酶的变构调节是( )。A: 无共价键形成或断裂B: 有构象变化C: 作用物或代谢产物常是变构调节剂D: 酶活性调节E: 酶数量调节答案:A, B, C, D15目前较公认的解释酶作用机制的学说主要有( )。A: 邻近与定位效应B: 酸碱催化C: 共价催化D: 钥匙配合锁E: 底物变形答案:A, B, C, E16全酶是由主要由下列哪些组分组成?( )A: 酶蛋白B: 活性中心C: 变构中心D
24、: 辅助因子E: 辅基答案:A, D17下列哪些是能影响酶促反应速度的因素?( )A: 底物B: 酶浓度C: 温度D: pHE: 激活剂答案:B, C, D, E18辅助因子在催化反应中的作用主要有( )。A: 维持构象B: 充当底物的载体C: 在酶蛋白与底物间起桥梁作用D: 形成活性中心E: 传递电子、原子或基团答案:A, B, C, E19酶的命名方法主要有( )。A: 随机命名法B: 习惯命名法C: 结构命名法D: 系统命名法E: 代码命名法答案:B, D20酶原激活的特点主要有( )。A: 活性由小变大B: 活性从无变有C: 一级结构不变D: 一级结构改变E: 空间结构改变答案:B,
25、D, E十三、 简答题1酶的化学本质是什么?其作为生物催化剂有何特点?近年来对酶的化学本质有何新看法?答案:答:酶的化学本质大部分是蛋白质。酶作为生物催化剂具有:(1) 高度特异性(专一性):酶对所作用的底物具有严格的选择性;(2)高效性:催化效率高;(3)不稳定性:易变性失活;(4)活性可调,酶的活性在体内能进行调节。近年来发现有些核糖核酸也具有催化活性,称为核酶。2何谓酶的活力中心、酶活力和比活力?酶活力单位是什么?答案:答:酶的活力中心是指酶与底物结合,并参与催化的部位,其往往是酶分子表面向内凹陷形成的大小、形态、基团分布都确定的空间结构实体。 酶活力是指酶加速化学反应的能力。比活力是指
26、每毫克酶蛋白所含的酶活力单位数(U/mg)。 酶活力单位有习惯单位和国际单位。习惯单位是根据每种实验测定方法做出的具体规定,使用时要搞清或注明单位的定义,否则无意义和可比性。国际单位是由国际酶学委员会(EC)规定的,能统一酶活力标准,方便比较,一个国际单位(IU)表示在25,最适底物浓度,最适缓冲液离子强度,以及最适pH等一定条件下,每分钟催化消耗1mol 底物的酶量。3当某一酶促反应的速度从最大速度的10%提高到90%时,底物浓度要作多少改变?当反应速度升高到最大速度的95%时,底物浓度还要进一步作多少改变?答案:解:根据米氏方程: v = Vmax.S/(Km+ S) 设:反应速度为最大反
27、应速度10%时的底物浓度为S1 反应速度为最大反应速度为90%时的底物浓度为S2 反应速度为最大反应速度为95%时的底物浓度为S3 得:10%Vmax=VmaxS1/(Km+S1) S1=1/9 Km 90%Vmax=VmaxS2/(Km+S2) S2=9 Km 95%Vmax=VmaxS3/(Km+S3) S3=19 Km S2/S1= 81 (倍) S3/S2=2.1 (倍) 答:当酶促反应的速度从最大速度的10%提高到90%时,底物浓度应提高81倍;当反应速度升高到最大速度的95%时,底物浓度还要再提高2.1倍。4在纯化某一酶的过程中,测定了每一步骤样品的总活力及蛋白量,步骤1为初提,测
28、得总蛋白为30,000mg,总活力单位为21,000U;步骤2为(NH4)SO4盐析,测得总蛋白为2,000mg,总活力单位为14,000U;步骤3为亲和层析,测得总蛋白为50mg,总活力单位为5,000U,试计算各步的纯化倍数和损耗率。答案:解:设各步比活分别为x1、x2、x3,纯化倍数分别为y1、y2、y3,损耗率分别为z1、z2、z3。 X1 = 21000/30000 = 0.70 (U/mg) X2 = 14000/2000 = 7.0 (U/mg) X3 = 5000/50 = 100 (U/mg) Y1 = 1.0 (倍) Y2 = x2/x1 = 7/0.7 = 10 (倍)
29、Y3 = x3/x1 = 100/0.7 = 143 (倍) Z1 = 1-100% = 0% Z2 = (1- 14000/21000)*100% = 33.3% Z3 = (1-5000/21000)*100% = 76.2%答:各步的纯化倍数分别为1.0、10和143倍,各步的损耗率分别为0%、33.3%和76.2%。5*当一酶促反应进行的速度为最大反应速度的80%时,Km与S间有何关系?答案:解:根据米氏方程: v = VmaxS/(Km+ S) v = 80%Vmax 代入米氏方程得:80%Vmax = VmaxS/(Km+ S) 0.8Km + 0.8S = S Km = 0.25
30、S 答:Km是S的四分之一(或0.25倍,或25%)。 6*有1克淀粉酶制剂,用水溶解成1000mL,从中取出1mL测定淀粉酶的活力,测知每5分钟分解0.25克淀粉,计算每克酶制剂含的淀粉酶活力单位数。(淀粉酶活力单位的定义:在最适条件下每小时分解1克淀粉的酶量为1个活力单位)答案:解:根据淀粉酶活力单位的定义:1 U = 1 g 淀粉 / h 该淀粉酶制剂的活力单位 = 0.251000 /(5/60)= 3000 (U) 答:每克酶制剂含的淀粉酶活力单位数为3000U。 7*通过查资料,除了磺胺药外,还有哪个药也利用了酶的竞争性抑制机理?列出其药品名称、成分、结构(并指出其是什么物质的结构
31、类似物,什么酶的竞争性抑制剂)、药理作用、剂型和适应症等。答案:答:通过查资料,除磺胺药外,5-氟尿嘧啶也利用了酶的竞争性抑制机理,其具体信息如下:药品名称 5-氟尿嘧啶;氟尿嘧啶;氟优英文名 Fluorouracil,5-FU化学成分 5-氟-2,4(1H,3H)-嘧啶二酮结构 其与尿嘧啶为结构类似物。结构如下: 5-氟尿嘧啶 尿嘧啶药理作用 脱氧胸苷酸(dTMP)是组成DNA的四种核苷酸之一。在体内主要由脱氧尿苷酸(dUMP)在胸腺嘧啶核苷酸合成酶的催化下在第5位加甲基转变而来。5-氟尿嘧啶为尿嘧啶的结构类似物,在体内能转变为-氟脱氧尿嘧啶核苷酸(FdUMP)而成为dUMP的结构类似物,从
32、而竞争性抑制胸腺嘧啶核苷酸合成酶,使得dTMP合成受阻而影响了DNA的合成,从而抑制增殖速度快的肿瘤细胞生长,而起到抗肿瘤作用。剂型 剂型主要有注射液、霜剂、栓剂、口服液等。适应症 适用于乳腺癌,结肠癌,直肠癌,胃癌,肝癌,卵巢癌,宫颈癌,膀胱癌,前列腺癌和头颈部肿瘤,也可作为放射治疗的增敏剂。局部应用还可以治疗基底细胞癌,和某些恶性皮肤病。8*天冬酰胺酶的初步纯化过程如下表,请计算表中未知数,请写出每个未知数的计算过程。纯化步骤总蛋白(g)总活力单位(U)比活(U/mg)纯化倍数产率(%) 1.粗提302.1104X1Y1Z12.加热除杂7.51.5104X2Y2Z23.吸附层析0.105.
33、0103X3Y3Z3答案:解: 比活 = 每一步总活力单位 / 每一步总蛋白 X1 = 2.110410-3 / 30 = 0.70 (U/mg) X2 = 1.510410-3 / 7.5 = 2.0 (U/mg) X3 = 5.010310-3 / 0.1 = 50 (U/mg) 纯化倍数 = 每一步比活力 / 第一步比活力 Y1 = X1/X1 = 1.0 (倍) Y2 = X2/X1 = 2/0.7 = 2.9(倍) Y3 = X3/X1 = 50/0.7 = 71 (倍) 回收率(产率)= 每一步总活力100% / 第一步总活力 Z1 = 2.1104 100% / 2.1104 =
34、 100% Z2 = 1.5104 100% / 2.1104 = 71% Z3 = 5.0103 100% / 2.1104 = 24% 答:通过计算比活X1、X2、X3分别为0.70、2.0、50U/mg;纯化倍数Y1、Y2、Y3分别为1.0、2.9、71倍;产率Z1、Z2、Z3分别为100%、71%和24%。十四、 论述题1*利用生化原理,阐述磺胺药和TMP的药物作用机理。答案:答:磺胺药和TMP(甲氧苄胺嘧啶,一种磺胺增效剂)的作用机理是利用了酶的竞争性抑制作用。对磺胺药敏感的细菌不能利用叶酸,其是利用对氨基苯甲酸(PABA)、2-氨基-4-羟基-6-甲基蝶呤啶和谷氨酸在二氢叶酸合成酶
35、的催化下合成FH2(二氢叶酸),FH2在二氢叶酸还原酶的催化下合成FH4(四氢叶酸)。 磺胺药是PABA的结构类似物,能竞争性抑制二氢叶酸合成酶;TMP是二氢叶酸的结构类似物,能竞争性抑制细菌的二氢叶酸还原酶。由于磺胺药抑制了细菌FH2的合成,TMP抑制了FH4的合成,致使FH4大量减少。FH4是核酸中的嘌呤核苷酸合成中重要的辅酶,故磺胺药和TMP能使细菌嘌呤核苷酸的合成受到影响,最终影响了细菌DNA的合成和其生长繁殖,而起到抑菌作用。人体由于能利用食物(如绿叶蔬菜)中外源性的叶酸而影响较小。 2*通过查资料,阐述酶在医药生产、研究或疾病诊断、治疗中的一个具体例子,说明酶化学知识的重要性。答案
36、:答:青霉素是-内酰胺类抗生素,能干扰细菌细胞壁肽聚糖的合成而产生抗菌作用,对多数革兰氏阳性菌有抗菌活性,且毒性小,应用至今已有半个多世纪,目前仍是许多革兰氏阳性菌感染的首选药。最早青霉素的获得是由青霉菌发酵培养液中分离得到,后来人们开始利用青霉素G(或V),在青霉素酰化酶(PA)的作用下,生成青霉素的母核6-氨基青霉烷酸(6-APA),然后再以6-APA为原料,在侧链接上不同基团,半合成了一序列耐酸、低毒及具有广谱抗菌作用的青霉素类药物。 发酵法生产青霉素工艺复杂,产率低;化学合成法要用到一些高毒性试剂,污染大;而酶法生产青霉素具有专一性强,工艺较简单,环境污染小,反应条件温和等优点。 从上述例子中可看出,酶在医药生产中具有非常重要的作用,很多药品都是在酶的催化下生产出来的,还有一些药品本身就是酶制品。除了在医药生产中,酶还在药品开发研究、疾病诊断和治疗中发挥了非常重要的作用,因此学好酶化学知识对于药品开发、生产,以及疾病诊断和治疗都非常重要。