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1、实验四放射免疫技术,概述,放射性核素作为示踪物常用的放射性核素：125I、131I射线，晶体闪烁计数仪3H射线，液体闪烁计数仪方法学类型：放射免疫分析（RIA）免疫放射分析（IRMA）,实验目的,本次实验以放射免疫分析测定总三碘甲状腺原氨酸（TT3）为例，来验证放射免疫技术的基本原理，并通过实验熟悉其操作过程及临床应用,实验原理,*AgAb与样本中待测Ag的含量在一定范围内呈负相关，根据标准曲线可推算标本中待测抗原的含量,注：*放射性物质,竞争,实验材料,试剂：1.125I-T32.抗T3微球3.T3标准品（0、0.5、1.0、2.0、4.0、8.0ng/mL）4.质控血清（高值2.425.0
2、2ng/ml，低值0.320.66ng/ml）器材：试管、加样枪、加样头、水浴箱、晶体闪烁计数仪,实验步骤,1.试管编号总T管编号为T6个标准管编号分别为B0，1，2，3，4，5质控管编号为高，低注：每个编号均做复管,2.加样：按照表格加试剂（l）和操作,所加物,试管编号,实验结果,实验数据,标准曲线（log-logit数据转化）,LogitB/B0,lgTT3ng/ml,0,logitB/B0=(B/B0)/(1B/B0),计算高值质控血清和低值质控血清的TT3浓度,临床意义,TT3增高：TT3是诊断甲状腺功能亢进（甲亢）最灵敏的指标，甲亢时TT3可高出正常值4倍。同时TT3是诊断T3型甲亢
3、的特异性指标。TT3降低：常见于甲状腺功能减低（甲减）。低T3综合征，虽有T3降低，但无甲减症状，可见于恶性贫血、急性心肌梗死、肝硬化、尿毒症等急重病和慢性消耗性疾病。,注意事项,加样的顺序要严格按照操作顺序表。加抗体微球前，要将试剂充分混匀。加125I-T3和抗T3微球后，都要将试管中的液体摇匀。离心后将上清直接倒掉后，马上将试管倒扣在吸水纸上，静置5min，不能拍打试管。操作时注意自我防护，放射性废弃物要按规定方法处理。,方法学评价,高灵敏度（pg/ml）放射性污染标记物半衰期短导致试剂有效期短标记物稳定性差，导致试剂盒批间、批内的变异较大，必须每次制作标准曲线，造成浪费操作繁琐，出报告时间长,临床应用,激素（蛋白质、多肽类、非多肽类）的测定病原体抗原或抗体的检测肿瘤标志物的测定血药浓度的测定,