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1、第第6 6章章 从杂交育种到基因工程从杂交育种到基因工程第第2 2节节 基因工程及其应用基因工程及其应用人教版必修2怎样让奶牛产出人奶呢?怎样让奶牛产出人奶呢?人的细胞人的细胞人乳铁蛋人乳铁蛋白基因白基因奶牛的奶牛的细胞细胞目的基因目的基因供体细胞供体细胞受体细胞受体细胞剪刀剪刀运载体运载体针线针线一、基因工程的基本步骤一、基因工程的基本步骤(一)(一) 提取目的基因提取目的基因(二)目的基因与运载体结合(二)目的基因与运载体结合(三)将目的基因导入受体细胞(三)将目的基因导入受体细胞(四)目的基因的检测和表达(四)目的基因的检测和表达 1 1、思考与讨论思考与讨论:目的基因目的基因目的基因目
2、的基因黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端GCTATAGCTATA 2 2、会产生几个黏性末端?、会产生几个黏性末端?思考与讨论思考与讨论:目的基因目的基因基因的运载体基因的运载体G C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C GG C T T A A A A T T C G用同种限制酶切割用同种限制酶切割G A A T T CC T T A A GG A A T T CC T T A A G1、常用的受体细胞:、常用的受体细胞:大肠杆菌、枯草杆菌、大肠杆菌、枯草杆菌、酵母菌、动植物细胞等酵母菌、动植物细胞等2、常用微生物作受体细胞的原因:、常用微生物作受
3、体细胞的原因:微生物增殖快、代谢快、目的产物多。微生物增殖快、代谢快、目的产物多。3、若运载体是质粒,受体细胞为细菌应作何处理:、若运载体是质粒,受体细胞为细菌应作何处理:应用应用CaCl2处理处理目的是:目的是:增大细胞壁的通透性增大细胞壁的通透性操作过程中用操作过程中用到哪些工具?到哪些工具?(一)基因的(一)基因的“剪刀剪刀”、分布:、分布:主要在微生物中主要在微生物中专一性专一性3,5-3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键一般产生黏性末端(或产生平末端)一般产生黏性末端(或产生平末端)限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶 二、基因工程的工具二、基因工程的工具、结果:、结果:3 3、切割具体部位:、
4、切割具体部位:、作用特点:、作用特点:(二)基因的针线(二)基因的针线DNADNA连接酶连接酶GCTATAGCTATA作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,作用:将互补配对的两个黏性末端连接起来,使之成为一个完整的使之成为一个完整的DNADNA分子。分子。连接的是什么部位连接的是什么部位? ?3,5-3,5-磷酸二酯键磷酸二酯键DNADNA聚合酶和聚合酶和DNADNA连接酶的比较连接酶的比较不不同同点点相同点相同点DNA聚合酶聚合酶DNA连接酶连接酶连接连接DNA片段片段不需要模板不需要模板连接的是游离的连接的是游离的脱氧核苷酸脱氧核苷酸需要模板需要模板连接不同脱氧核苷酸之间的磷酸和连接不同
5、脱氧核苷酸之间的磷酸和脱氧核糖,形成磷酸二酯键脱氧核糖,形成磷酸二酯键(三)基因的运输工具(三)基因的运输工具运载体运载体1 1、功能、功能:2 2、常用的运载体、常用的运载体:3 3、必须具备的条件、必须具备的条件 1.1.原理:原理:基因重组基因重组DNADNA分子水平分子水平定向地改造生物的遗传性状,获定向地改造生物的遗传性状,获得人类所需要的品种。得人类所需要的品种。三、基因工程的概念三、基因工程的概念体外体外4.4.结果:结果:3.3.操作环境:操作环境:2.2.操作水平:操作水平:、基因工程与作物育种、基因工程与作物育种四、基因工程的应用四、基因工程的应用生长快、肉质好的转基因生长
6、快、肉质好的转基因鱼鱼( (中国中国) )转基因的紫番茄转基因的紫番茄2 2、基因工程与药物研制、基因工程与药物研制3 3、环境保护、环境保护超级细菌超级细菌讨论:转基因食品安全吗?讨论:转基因食品安全吗?练习练习1.基因工程的正确操作步骤是( )使目的基因与运载体结合使目的基因与运载体结合 将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞 检测目的基因的表达是否符合特定性状要求检测目的基因的表达是否符合特定性状要求 提取目的基因提取目的基因A. B. C. D. C2.2.要使目的基因与对应的载体重组,所需的要使目的基因与对应的载体重组,所需的两种酶是两种酶是( )( ) 限制酶限制酶连接酶连接
7、酶解旋酶解旋酶还原酶还原酶 A3.3.基因工程技术中的目的基因主要来源于基因工程技术中的目的基因主要来源于 ( )( )A.A.自然界现存在生物体内的基因自然界现存在生物体内的基因B.B.自然突变产生的新基因自然突变产生的新基因C.C.人工诱变产生的新基因人工诱变产生的新基因D.D.科学家在实验室中人工合成的基因科学家在实验室中人工合成的基因A4.4.下列关于基因工程的叙述中下列关于基因工程的叙述中, ,正确的是正确的是( )( )A.A.限制酶只用于提取目的基因限制酶只用于提取目的基因B.B.细菌体内的环状细菌体内的环状DNADNA均可作运载体均可作运载体C.DNAC.DNA连接酶可用于目的基因和运载体的连接连接酶可用于目的基因和运载体的连接D.D.重组重组DNADNA分子一旦进入受体细胞分子一旦进入受体细胞, ,基因工程则完成基因工程则完成. . 5.5.以下说法正确的是以下说法正确的是( )( )A.A.目的基因是指重组目的基因是指重组DNA DNA B.B.一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列C.DNAC.DNA重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体重组所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体D.D.只要受体细胞中含有目的基因,目的基因就一定能只要受体细胞中含有目的基因,目的基因就一定能够成功表达够成功表达 CB