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1、血血清清钙钙 C Ca a 偶偶氮氮胂胂 法法测测定定 作业指导书作业指导书 1 1. . 实实验验原原理理 偶氮胂 比色终点法。钙与偶氮胂 在中性条件下 形成蓝色复合物，显色强度与钙浓度成正比。加入 8-羟基喹啉 -5-磺酸掩蔽镁的干扰。 2 2. . 标标本本采采集集 2.1 病人准备：无特殊要求。 2.2 类型：血清、肝素血浆或尿液。 3 3. . 标标本本存存放放： 血清/血浆稳定性： 2025保存可稳 定 7 天；48保存可稳定 3 周；-20保存可稳定 8 个月。尿液稳定性： 2025保存可稳定 2 天； 48保存可稳定 4 天；-20保存可稳定 3 个月； 对 24h 尿液标本加
2、浓盐酸10ml，并加热标本，使草酸 钙溶解。 4 4. . 标标本本运运输输： 室温条件下运输 5 5. . 标标本本拒拒收收标标准准： 细菌污染的不能做测定。 6 6. . 实实验验材材料料 ： 6.1 上海申能钙测定试剂盒（货号：111 1137170 试剂： 870ml） 6.1.1 试剂组成 磷酸盐缓冲液 pH7.5 50mmol/L 8-羟基喹啉 -5-磺酸 5mmol/L 偶氮胂 120mmol/L 表面活性剂 适量 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存：试剂避光保存于28， 若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。开盖后应 避免污染。 6.1.4 变
3、质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染， 不能继续使用。 6.1.5 注意事项：由于钙离子到处都有，必须严加注意 采取避免污染。只使用一次性检测用品。微量螯合剂 (如 EDTA 等)都会阻碍显色复合物的生成。须严加注意。 试剂中含叠氮钠（ 0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避 免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用 DiaSys 公司提供的 TruCal U 校准 品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和 质控品 .SOP 文件 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件 7 7. . 仪仪器器：奥林巴斯 AU1000 生化分析仪 8
4、 8. . 操操作作步步骤骤 8.1 项目基本参数：参见AU1000 生化分析仪项目测定 参数.SOP 文件 8.2 仪器操作步骤：参见AU1000 生化分析仪操作规程 . SOP 文件 9 9. . 检检验验结结果果的的判判断断与与分分析析 1 10 0. . 质质量量控控制制： 在每一批标本中都应把非定值血清水 平 I 与 II 质控做为未知标本进行分析，以2S 为质控 警告限， 3S 为失控限，绘制质控图，判断是否在控。 质控规则参见室内质控操作规程.SOP 文件。 1 11 1. . 计计算算方方法法： 以 TruCal U 复合校准品钙校准值校准 仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器
5、直接报告可靠 的检测结果，以 mmol/L 报告。 1 12 2. . 参参考考值值范范围围 血清/血浆： 2.152.57mmol/L 尿液： 女性： 3 3. .5 5m mm mo ol l/ /L L 或 1 1. .6 6m mm mo ol l/ /L L 时，在经过复查等确认手段 处理后应及时向临床主管医生汇报。 1 17 7. . 方方法法局局限限性性 17.1 本法线性上限为 6.25mmol/L。如样品测定值超 过上限时，应将样品用0.9氯化钠溶液作 1：1 稀 释，重新测定，结果乘以2。 17.2 干扰物质：当样品中抗坏血酸浓度 1704mol/L，胆红素浓度 684mo
6、l/L，血红蛋白浓 度5.00g/L，甘油三酯浓度 22.6mmol/L，镁浓度 6.2mmol/L 时没有观察到干扰。 1 18 8. . 补补救救措措施施： 当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂 家进行维修。 1 19 9. . 参参考考文文献献 1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt： TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998. p.192- 202. 2. Endres DB, Rude RK. Mineral and bone metabolism. In： Burtis
7、CA, Ashwood ER. editors. Tietz textbook of clinical chemistry. 3rd ed. Philadelphia： W. B. Saunders Company；1999.p.1395-1457. 3. Michaylova V, Ilkova P. Photometric determination of micro amounts of calcium with arsenazo III. Anal Chim Acta 1971;53：194-8. 4. Bauer PJ. Affinity and stoichiometry of calcium binding by arsenazo III. Anal Biochem 1981;110：61-72. 2 20 0. . 其其他他： 仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集 后按检验科废物处置管理规定 执行