核糖含量测定.doc

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1、核糖含量测定核糖含量测定1 1 试剂试剂1.1 0.31mol /L 三氯醋酸称取三氯醋酸 5g,加蒸馏水溶解成 100ml。1.2 0.61 mol /L 三氯醋酸称取三氯醋酸 10g,加蒸馏水溶解成 100ml。1.3 0.019mol /L 三氯化铁-盐酸溶液称取三氯化铁(FeCl36H2O)0.5g,加浓盐酸溶解成500ml,可长期使用。1.4 1%二羟基甲苯(苔黑酚)称取二羟基甲苯 1g,溶于 0.019mol /L 三氯化铁-盐酸溶液中,临用新配。1.5 标准核糖溶液精密称取 D 核糖 20mg,溶于 0.31mol /L 三氯醋酸,准确稀释至 100ml 为 200g /ml 核

2、糖标准贮备液。精密吸取贮备液 2.5ml 于 25ml 容量瓶中,用 0.31mol /L 三氯醋酸稀释至刻度,即为标准核糖溶液(20g/ml)。2 2 操作操作精密量取转移因子待检品 1ml 于试管中,另 0.61mol /L三氯醋酸 1ml,置沸水浴水解 15 分钟,再吸取水解液 0.4ml,加 0.31ml/L 三氯醋酸 1.6ml,及 1%二羟基甲苯 2ml,混匀,再置沸水浴中加热 30 分钟,冷却至室温,在 650nm 波长测定 OD 值,同时准确吸取核糖标准液 1ml,加 0.31mol/L 三氯醋酸 1ml,混匀,其余操作同样品,并做空白对照。3 3 计算计算样品 OD 值核糖含量(g/ml)= 205标准 OD 值

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