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1、植物组培快繁技术知识总结植物组培快繁技术知识总结 植物组培快繁技术:利用植物组织培养技术快速繁殖“名、优、特、新、稀”等植物品种使其在短时间内繁衍大量植株的一套技术与方法又叫植物离体快繁技术或试管快繁技术。 植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下利用适当的培养基对离体的植物器官、组织、细胞及原生质体进行培养使其再生细胞或完整植株的技术。 植物快繁与传统营养繁殖相比的优点: 2)取材少培养物经济 3)培养条件可控制性强; 4)繁殖效率高生长速度快; 5)占用空间小; 6)管理方便利于自动化控制; 7)便于种质交换和保存。 细胞的全能性:就是植物的每个细胞都具有该植物的全部遗传信息和发育成完
2、整植株的能力。 植物的再生作用:从一个植株分离根、茎、叶等在切口处组织长出不定芽和不定根从而成为新的完整的植株。 脱分化:指离体培养条件下生长的细胞、组织或器官经过细胞分裂或不分裂逐渐失去原来的结构和功能而恢复分生状态形成无组织结构的细胞团或愈伤组织或成为未分化细胞特性的细胞的过程。 植物组培快繁的培养程序 1、无菌培养系的建立 2、繁殖体(茎芽)增殖 3、壮苗与生根 4、试管苗移栽驯化 外植体的启动生长:愈伤产生、不定芽发生或外植体芽直接生长。通过需要4-6周。 外植体:所谓外植体就是第一次接种用的离体植物材料。 消毒方法:将新鲜的外植体在流水中冲洗12小时然后在超净工作台上用0.5%的升汞
3、或其他消毒剂消毒 增殖培养基:适当提高细胞分裂素和矿质浓度 植物快繁的器官再生主要分为五种类型: 1短枝发生型 2不定芽发生型 3原球茎发生型 4丛生芽发生 5胚状体发生型 离体生根:也称试管内生根。降低无机盐浓度减少或去除细胞分裂素增加生长素浓度。 活体生根:也称试管外生根。通常芽苗可先在生长素中快速浸蘸或在含有相对高浓度生长素的培养基中培养5-10天然后移到基质中生根。(生根培养时间一般为2-4周。) 试管苗移栽:洗去根部的培养基将小植株移栽入培养基质中。 试管苗驯化管理:移栽初期要保证空气湿度减少叶面蒸腾;弱光照。同时逐渐降低空气湿度使其适应自然环境条件;增加光照强度。另外注意防止病害的
4、发生。 影响植物快繁的因素: 1)外植体: 幼嫩组织分化能力更强。不能太小否则影响成活率。最适的为茎尖、带芽茎段 2)培养基: 以固体培养较为普遍也有采用液体培养. MS培养基应用最为广泛 3)培养条件: 光照:1000-3000lx温度:与植物的原产地相应。一般为252,湿度一般在70-80% 4)继代培养:主要指对阶段增殖形成的芽丛、胚状体或原球茎等进行转接继代。继代间隔时间一般为20天左右。 5)移栽: 根系结构不完善的试管苗移栽后不易存活。叶表皮组织不发达的试管苗也不易移栽存活。移栽要求打开瓶口驯化2-3天。 植物离体快繁技术的应用 1、用于稀缺或急需良种植物的繁殖 2、用于茎尖脱毒及
5、无毒苗木试管快繁 3、用于自然界无法用种子繁殖或难以保持 后代一致的三倍体、单倍体及基因工程植株的快繁 4、用于濒危植物的拯救 5、用于种质的试管保存及交换 商业化生产规模及工艺流程: 1)试管苗生产规模的确定 2)商业化实验室的设计 3)商业化生产的配套设施 4)商业化生产的工艺流程 商业化生产及效益分析: 1)试管苗增殖率的估算 2)生产计划的制定和实施 3)产品质量监控 4)商业化生产效益分析 降低商业化生产成本的措施: 1)提高劳动生产率 2)减少设备投资延长使用寿命 3)降低消耗 4)降低污染提高繁殖率和成活率 5)简化培养基 玻璃化: 生理失调症状表现为叶片、嫩梢呈水浸透明或半透明状。叶片脆弱易碎角质层发育不全没有功能性气孔。器官分化能力低生根难移栽后不易成活。 玻璃化苗发生原因:琼脂和蔗糖浓度偏低;培养温度偏高;细胞分裂素浓度偏高;乙烯的影响;光照偏弱;培养基含量偏高等因素。 防止玻璃化苗发生的措施:提高培养基硬度;降低培养基水势;提高蔗糖含量;增加培养瓶气体交换降低湿度;增加光照降低温度等。 褐化:是由于培养材料中的酚类物质被氧化形成。 第 4 页 共 4 页