备课素材:EMS诱变育种的机理、特点和方法--高一下学期生物人教版(2019)必修2.docx

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1、EMS诱变育种的机理、特点和方法诱变育种是育种中的一种常见方法。某些化学药剂有诱导遗传变异的作用,早在1910年就有过少量的研究。1911年麦克顿高尔(Mcdongl),1916年鲍尔(Baur),1936年萨哈洛夫(Sacharov)等人都发现化学物质能提高动植物的突变率,但在植物中一般认为利用化学物质诱发突变的工作应从约克斯(Oehlkers)1943年用乌来糖(Urethane脲烷)诱发月见草、百合及风铃草染色体畸变的工作开始。EMS是甲基磺酸乙酯,是属于烷化剂诱变最常用的一种,诱变率很高。EMS诱变是个复杂的物理和化学过程,尤其是在构建植物突变体库中,为了获得较好的诱变效应,必须正确地

2、掌握EMS诱变剂的最佳剂量。不同的物种对EMS的敏感程度不同,因此对EMS的浓度、处理温度和处理时间的反应效应也不同,必须通过预试验来确定最佳的处理剂量。通常采用预浸种至萌动露白后进行诱变处理,此时种子吸收诱变剂达到最适宜的速率和速度,且此时开始DNA合成,是最敏感的阶段,可以产生较高的突变频率,有望创制并筛选到目的突变体植株。甲基磺酸乙酯(EMS)是一种常用的化学诱变剂,能诱发产生高密度的系列等位基因点突变,具有效率高、负作用小、易操作等优点,目前已被广泛应用于植物的相关遗传研究和诱变育种工作中。在当前种质资源极为匮乏,基因资源日益枯竭的状况下,采用EMS诱发突变技术创造有用基因资源具有极其

3、重要的意义。1.EMS诱变的机理EMS分子具有多个能被转移的活性烷基(-CH1),当这些烷基转移到一个电子云密度较高的分子上,可置换碱基中的H原子,该过程即发生了烷化作用。DNA分子上的鸟嘌呤(G)的N7位置是主要烷基化位点之一,该位置被烷基化之后,发生两种遗传效应:一 是发生嘌呤和嘧啶的转化突变,即GC突变为AT,这种类型是最主要的类型。因此,EMS能使DNA分子上的嘌呤、嘧啶分子发生烷基化来影响mRNA的转录,随后使蛋白的合成过程发生紊乱,进而改变植物的性状。物理诱变如超声波、射线、中子等对物种的损伤较大,容易引起碱基的转换、颠换、移码、染色体缺失、易位、倒位等,从而引起生物的突变和死亡。

4、2.EMS诱变特点EMS诱变育种中,诱变材料不同,使诱变效率和筛选难度也有差异。种子是理想的处理材料。也可以选择植物的器官和组织进行诱变处理。例如幼穗、花粉、芽、茎、愈伤组织等。相对于其它化学试剂诱变或者物理诱变,EMS诱变具有如下特点:(1)较高的突变频率和较少的染色体畸变主要是EMS诱变使DNA分子上产生较多的点突变,对染色体损伤轻而不致于引起染色体断裂产生畸变,可以针对农作物的某一特殊性质进行改良。(2)对处理材料损伤轻EMA诱变相对于其它物理诱变的生物损伤小,不容易引起生活力和可育性下降,尤其是无性繁殖的植物由于不经历减数分裂过程繁殖后代,相对于可产生种子的植物,这种突变更容易向后代遗

5、传。(3)成本低廉,操作简便(4)EMS诱变剂对人体更具有危险性EMS具有强烈的致癌性和挥发性,常用5硫代硫酸钠作为解毒剂,因此在操作过程中要注意安全防护,严格遵守试验规则。3.EMS处理的方法(1)浸泡法:就是把种子、芽等组织浸泡在适当浓度的诱变剂溶液中。以EMS浸泡法构建突变体库最成功的例子就是拟南芥突变体库的构建。(2)滴液法:在植物茎上划一道较浅的切口,然后将浸透诱变剂溶液的棉球经过切口浸入,此法可用于完整的植株或发育中完整的花序。(3)共培养法:在培养基中用较低浓度的诱变剂处理根或者花药共培养。在EMS诱变处理材料的过程中,必须保证有足够的溶液进入细胞,因此被处理的材料必须完全被溶液

6、浸透,如果能够附以搅拌,会增加处理效果。由于EMS容易挥发,因此处理温度最好在20左右,并且在密闭状态下效果较好。例1、甲基磺酸乙酯(EMS)可用来创建突变体库,EMS主要通过鸟嘌呤烷基化后与胸腺嘧啶配对进而引发突变。在植物组织培养中,利用EMS处理获得突变体是育种的重要手段。下列叙述正确的是()A.EMS处理获得的突变大多是有利突变B.EMS诱变处理导致基因中发生碱基对缺失C.应该用EMS处理愈伤组织以获得较多突变体D.组织培养过程中细胞在分化时最易诱发突变解析:EMS处理获得的突变大多是有害突变,A错误;根据试题的信息,EMS诱变处理导致基因中发生碱基对替换,B错误;愈伤组织有较强的分裂分

7、化能力,用EMS处理愈伤组织可以获得较多突变体,C正确;组织培养过程中细胞在分裂时最易诱发突变,D错误。故答案为C。例2、碱基类似物5溴尿嘧啶(5Bu)既能与碱基A配对,又可以与碱基G配对。在含有5Bu、A、G、C、T五种物质的培养基中培养大肠杆菌,得到突变体大肠杆菌。下列叙述错误的是()A.突变体大肠杆菌体内可能发生了多个基因的突变B.很多位点发生TA到CG的替换后,DNA分子中氢键数目增多C.该培养基中大肠杆菌的基因突变频率明显提高D.在此培养基上繁殖2代,可实现DNA分子某位点碱基对从TA到GC的替换解析:根据题干信息,碱基类似物5溴尿嘧啶(5Bu)既能与碱基A配对,又可以与碱基G配对,使得碱基对发生改变,则突变体大肠杆菌体内可能发生了多个基因的突变,A正确;AT之间有2个氢键,CG之间有3个氢键,则很多位点发生TA到CG的替换后,DNA分子中氢键数目增加,B正确;根据以上分析可知,DNA复制时,5Bu可与A互补配对,也可与G互补配对,则该培养基中大肠杆菌的基因突变频率明显提高,C正确;5溴尿嘧啶可以与A配对,又可以和C配对,TA对复制一次时有A5溴尿嘧啶,复制第二次时有5溴尿嘧啶C,复制第三次时出现CG,所以需要经过3次复制后,才能实现细胞中某DNA分子某位点上碱基对从TA到GC的替换,D错误。故答案为D。学科网(北京)股份有限公司

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