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1、第35讲细胞工程考试内容及活动要求1.简述植物的组织培育。2.简述植物的细胞培育与体细胞克隆。3.举例说出细胞融合与单克隆抗体。考点一植物细胞工程1细胞工程的概念2细胞的全能性(1)含义：具有某种生物全部遗传信息的任何一个细胞，都具有发育成残缺生物体的潜能。(2)物质基础：细胞内含有本物种全部的遗传信息。(3)植物细胞全能性表达的条件：具有残缺的细胞结构；处于离体形状；提供一定的养分、激素和其他适合外界条件。3植物组织培育技术(1)原理：植物细胞具有全能性。(2)进程4植物体细胞杂交技术(1)概念：将不同种的植物体细胞，在一定条件下融分解杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。(2)操作
2、流程进程a为去除细胞壁取得具有生机的原生质体，用到的酶是纤维素酶和果胶酶。进程b是原生质体的融合，其原理是细胞膜具有一定的流淌 性。人工诱导的办法有物理法，包括离心、振动、电激等；化学法普通用聚乙二醇(PEG)作为诱导剂来诱导细胞融合。进程c是原生质体融合后再生出细胞壁，这是原生质体融分解功的标志。进程d是植物组织培育，其原理是植物细胞的全能性。(3)意义：抑制了远缘杂交不亲和的妨碍。深化拓展植物体细胞杂交后的遗传物质剖析(1)遗传特性：杂种植株中含有两种植物的遗传物质，故杂种植株具有两种植物的遗传特性。(2)染色体组数染色体组数两种植物体细胞内染色体组数之和。植物体细胞杂交构成的杂种植株，有
3、几个染色体组就称为几倍体。假定一植物细胞含有2x条染色体，2个染色体组，基因型为Aabb，另一植物细胞含有2y条染色体，2个染色体组，基因型为ccDd，那么新植株应为异源四倍体，其体细胞中染色体数为(2x2y)条，4个染色体组，基因型为AabbccDd。5植物细胞工程的运用(1)微型繁衍：优点是能够 坚持亲本的优秀性状。(2)作物脱毒：应用茎尖、根尖等无毒组织停顿微型繁衍。(3)培育人工种子：能够 处置某些植物结实率低、繁衍困难的征询 题。(4)作物新种类的培育(5)细胞产物的工厂化消费：即应用植物组织培育技术消费蛋白质、脂肪、糖类、药物、香料和生物碱等。1有关细胞全能性与组织培育的推断 (1
4、)棉花根尖细胞经诱导构成幼苗能表达细胞的全能性()(2)植物的每个细胞在植物体内和体外都能表现出细胞的全能性()(3)在诱导离体菊花茎段构成幼苗的进程中，不会发作细胞的增殖和分化()(4)愈伤组织是外植体经过脱分化和再分化后构成的()(5)经植物组织培育失掉的胚状体用人工薄膜包装后可失掉人工种子()2有关植物体细胞杂交技术的推断 (1)应用物理法或化学法能够 直截了当 将两个植物细胞停顿诱导融合()(2)用纤维素酶和果胶酶水解法取得的植物原生质体失掉了全能性()(3)再生出细胞壁是原生质体融分解功的标志()(4)培育草莓脱毒苗所采用的要紧技术是细胞杂交()据图剖析植物体细胞杂交进程(1)植物体
5、细胞杂交依照的生物学原理是什么？提示细胞膜的流淌 性、植物细胞的全能性。(2)如何依照细胞膜表面荧光推断 该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的？提示融合的细胞表面既有白色荧光又有绿色荧光。(3)假定番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，那么“番茄马铃薯细胞在有丝分裂前期含有多少条染色体？提示2(mn)条。(4)假定杂种细胞培育成的“番茄马铃薯植株为四倍体，那么此杂种植株的花粉经离体培育失掉的植株属于几倍体植株？提示单倍体植株。命题点一植物组织培育进程的剖析1(2018太原高三二模)如以下图为培育农作物新种类的一种方式。以下说法正确的选项是()A进程分不称为细胞分裂和细胞分化B该育种
6、与传统杂交育种相比，最大的优点是繁衍速度快C该育种进程阐明已分化细胞中不表达的基因仍具有表达的潜能D该育种方式触及到转基因技术、胚胎移植技术答案C解析图中表示基因工程技术，表示植物组织培育技术，其中表示脱分化，表示再分化，表示在胚状体不处 加人工胚乳和人工种皮制备人工种子的进程，A错误；该育种办法为基因工程育种，其最大的优点是目的性强，B错误；该技术依照的要紧原理是植物细胞的全能性，已分化的细胞依然能发育成残缺的集体，阐明其中一局部不表达的基因又开场表达，C正确；该育种进程不触及胚胎移植技术，D错误。2(2018济南调研)如图是经过植物细胞工程技术取得紫杉醇的途径，以下表达正确的选项是()A该
7、途径依照的原理是植物细胞具有全能性B进程需操纵好培育基中植物激素的比例C经进程细胞的形状和结构未发作变化D进程需运用固体培育基，有利于细胞增殖答案B解析细胞全能性以细胞发育成集体为标志，而图中并没有构成残缺植物体，A项错误；进程是脱分化，而决议植物脱分化和再分化的关键要素是培育基中植物激素的种类和比例，因而该进程需操纵好培育基中植物激素的比例，B项正确；进程是脱分化，经该进程细胞的形状和结构发作了变化，成为高度液泡化的薄壁细胞，C项错误；进程需运用液体培育基，有利于细胞增殖，D项错误。生命观念植物组织培育中生长素和细胞分裂素的比值与效果生长素/细胞分裂素的比值作用效果比值高促进根分化、抑制芽构
8、成比值低促进芽分化、抑制根构成比值适中促进愈伤组织构成命题点二植物细胞工程的综合运用3(2018广东茂名下学期大联考)应用古代生物技术，科研人员对马铃薯的培育停顿了研讨，请回答相关征询 题：(1)培育马铃薯脱毒苗所依照的原理是_，该培育进程触及_和_两个阶段。(2)研讨马铃薯茎尖外植体大小对幼苗的成苗率和脱毒率的妨碍 ，后果如图。据图可知：茎尖越小，脱毒率_，成苗率_，培育脱毒苗茎尖的适合大小为_。(3)假想象培育出“番茄马铃薯植株，运用传统有性杂交能否失掉可育的杂种植株？什么缘故 ？_。答案(1)植物细胞全能性脱分化再分化(2)越高越低0.27 mm(3)否(或不能)；不同种的植物之间存在生
9、殖隔离解析(1)培育马铃薯脱毒苗是对植物组织培育技术的运用，所依照的原理是植物细胞全能性；该培育进程触及脱分化和再分化两个阶段。(2)据图可知：茎尖越小，脱毒率越高，成苗率越低；培育脱毒苗茎尖的适合大小为0.27 mm。(3)由于番茄和马铃薯属于两个不同物种，而不同种的植物之间存在生殖隔离，因而 假想象培育出“番茄马铃薯植株，运用传统有性杂交不能失掉可育的杂种植株。4应用相关工程技术能够 取得抗黑腐病杂种黑芥花椰菜植株，曾经明白野生黑芥具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病，技术人员用一定剂量的紫外线处置黑芥原生质体可使其染色体片段化，并丧失再生才干，再应用此原生质体作为局
10、部遗传物质的供体与残缺的花椰菜原生质体融合，流程如以以下图。据图回答以下征询 题：(1)该进程用到的工程技术有_和_。(2)进程所需的酶是_，进程PEG的作用是_，经过操作后，需选择 出融合的杂种细胞，显微镜下观看 融合的活细胞中有供体的叶绿体存在可作为初步选择 杂种细胞的标志。(3)原生质体培育液中需求参与适合浓度的甘露醇以坚持一定的渗透压，其作用是_。原生质体经过细胞壁再生，进而分裂和脱分化构成_。(4)假定剖析再生植株的染色体变异类型，应剪取再生植株和双亲植株的根尖，制成装片，然后在显微镜下观看 比拟染色体的_；将杂种植株栽培在含有_的环境中，可选择 出具有高抗性的杂种植株。答案(1)植
11、物体细胞杂交植物组织培育(2)纤维素酶和果胶酶促进原生质体的融合(3)坚持原生质体残缺性愈伤组织(4)形状和数目黑腐病菌解析(1)据图可知，该流程图表示先去掉两种植物细胞的细胞壁，然后诱导融合取得杂种细胞，经过植物组织培育取得杂种植株。(2)植物细胞细胞壁的要紧成分是纤维素和果胶，因而采用纤维素酶和果胶酶去掉植物细胞的细胞壁；PEG(聚乙二醇)的作用是促进原生质体的融合。(3)去掉细胞壁后取得的原生质体需求放在适合浓度的甘露醇溶液中，坚持原生质体残缺性，避免失水或吸水；在植物组织培育中，经过脱分化后构成愈伤组织。(4)由于染色体在显微镜下能看见，因而能够 制造临古装片，观看 染色体的形状和数目
12、，以确定能否发作染色体变异；对杂种植物停顿鉴定最复杂的办法是从集体水平上停顿检测，即接种黑腐病菌，观看 植物的性状。迷信思想植物体细胞杂交进程中杂种细胞类型及检测办法(1)诱导发生的细胞(假定用于杂交的两种植物细胞分不为A、B)未融合的细胞：A和B。两两融合的细胞：AA、BB和AB。多细胞融合体。(2)检测办法：对诱导发生的细胞停顿植物组织培育，然后依照失掉的植物性状停顿推断 。假定失掉的是一种植物的性状，阐明是未融合细胞。假定失掉的是具有两种亲本性状的植物，阐明是杂种植株。假定失掉的是具有两种亲本性状的植物，且一种植物的性状失掉增强，那么是多细胞融合体。假定失掉的是一种植物的性状且效果失掉增
13、强，那么是同种细胞融合的后果。考点二植物细胞培育与核移植技术1植物细胞培育(1)原理：细胞增殖。(2)培育条件无菌、无毒的环境：对培育液和一切培育器具停顿无菌处置，添加抗生素，活期改换培育液以去除代谢产物。养分：除正常的无机养分和无机养分外，通常需参与血清、血浆等一些自然成分。适合的温度和pH：温度为36.50.5_(哺乳植物)，pH为7.27.4(少数细胞)。气体环境：含95%空气加5%CO2的混合气体。(3)植物细胞的培育进程(4)运用：生物制品的消费、检测有毒物质、医学研讨。特不提示关于植物细胞培育的两组概念辨析(1)细胞贴壁与接触抑制：悬液中分散的细胞特不 快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴
14、壁。当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停顿分裂增殖，这种景象称为接触抑制。(2)原代培育与传代培育原代培育：细胞悬液第一次在瓶中培育，没有分瓶培育之前的细胞培育。原代培育的细胞核型正常。传代培育：停顿分瓶后的扩展培育，即传代培育。普通状况下，细胞传至1050代后，增殖会分明减缓，甚至完全停顿，局部细胞呈现核型异常。2植物体细胞核移植技术和克隆植物(1)原理：植物体细胞核具有全能性。(2)进程(3)后果：发生新集体。(4)运用：减速牲畜遗传改进进程，促进优秀畜群繁育；爱护 濒危物种；消费医用蛋白；作为异种移植的供体；用于组织器官的移植。归结总结植物组织培育与植物细胞培育的比拟比拟工程植
15、物组织培育植物细胞培育实际基础植物细胞的全能性细胞增殖前处置无菌、离体无菌；用胰蛋白酶处置，使组织细胞相互分散开取材植物较幼嫩的部位或花药等植物胚胎或出生不久的幼龄植物的器官或组织培育基性质固体液体培育基成分水、矿质元素、蔗糖、维生素、植物激素、琼脂等糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素、植物血清等后果最终发生新集体，表达了细胞的全能性细胞培育发生少量细胞，不构成新集体，不能表达细胞的全能性一样点都需人工条件下的无菌操作；都需求适合的温度、pH等条件；都停顿有丝分裂，都不触及减数分裂1有关植物细胞培育的推断 (1)制备肝细胞悬液时先用剪刀剪碎肝组织，再用胃蛋白酶处置()(2)肝细胞培育进程
16、中通常在培育液中通入5%的CO2安慰细胞呼吸()(3)在25 的实验条件下可顺利完成大鼠神经细胞的培育()(4)培育保管接触抑制的细胞在培育瓶壁上可构成多层细胞()(5)克隆培育法培育进程中少数细胞的基因型会发作改动()(6)二倍体细胞的传代培育次数通常是有限的()2有关植物细胞核移植的推断 (1)植物细胞核移植的受体细胞必需是卵细胞()(2)克隆植物的性状与供体植物完全一样()(3)与“多利羊等克隆哺乳植物相关的技术有胚胎移植、细胞培育和核移植()(4)用于核移植的供体细胞普通都选用10代以内的培育细胞()如图为植物细胞培育进程中细胞增殖状况的变化曲线，图中B、E两点表示经选择 、分装后接着
17、培育。据图剖析：(1)原代培育和传代培育的分界点是图中哪个点？提示B点之前的培育称为原代培育，之后的培育称为传代培育。(2)AB段和DE段繁衍速度迟缓的缘故是什么？提示AB段发作了接触抑制；DE段细胞大局部衰老失掉分裂才干。(3)E点后的细胞大少数具有异倍体核型，如此 的细胞有什么特点？提示E点后的细胞属于细胞系，能有限增殖。命题点一植物细胞培育进程的剖析1(2018聊城高三第二次调研)以下关于植物细胞工程的表达，正确的选项是()A用胰蛋白酶处置植物组织后，可用培育液将分散的细胞浓缩制成细胞悬液B少数细胞在延续培育50代后可取得不死性，是某些基因选择性表达的后果C依照在高倍镜下观看 到基因渐变
18、的比例可推知某化学药品的毒性DPEG诱导植物细胞融合构成的杂种细胞，经植物细胞培育能失掉优秀植物集体答案A解析用胰蛋白酶处置植物组织后，可用培育液将分散的细胞浓缩制成细胞悬液，A正确；少数细胞在延续培育50代后可取得不死性，是某些基因渐变的后果，B错误；基因渐变在高倍镜下是观看 不到的，C错误；由于植物细胞的全能性遭到限制，现有条件下，植物细胞融合构成的杂种细胞不能培育成植物，D错误。2(2019六安一中质检)回答以下有关植物细胞培育的征询 题：(1)在植物细胞培育进程中，当贴壁细胞分裂生长到细胞表面_时，细胞会停顿分裂增殖，这种景象称为细胞的_。如今，瓶壁上构成的细胞是_层。要使贴壁的细胞从
19、瓶壁上不离上去，需求用到的酶是_。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大局部细胞分裂停顿，进而呈现_景象；但极少数细胞能够 延续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发作改动而取得_，该种细胞的黏着性_，细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_。(3)现用某种大分子染料对细胞停顿染色时，观看 到死细胞能被染色，而活细胞不能被染色，缘故是_。(4)反省某种毒物能否能改动细胞染色体的数目，最好选用分裂_期的细胞在显微镜下停顿观看 。(5)在细胞培育进程中，通常在_条件下保管细胞。由于在这种条件下，细胞中_的活性落低，细胞_的速率落低。答案(1)相互接触接触抑制单(或一)胰蛋白酶(2)衰老甚至死亡不死性落低增加(3)活
20、细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内(或死细胞的细胞膜丧失了选择透过性，大分子染料能够 进入死细胞内而着色)(4)中(5)冷冻(或超高温、液氮)酶推陈出新解析(1)细胞接触抑制是指细胞表面相互接触时，细胞就会停顿分裂增殖的景象。基于上述特性，瓶壁上构成的细胞是单层陈列的。需求用胰蛋白酶将贴壁的细胞从瓶壁上不离上去。(2)随着细胞传代次数的增多，绝大局部细胞分裂停顿，进而呈现衰老甚至死亡景象，但极少数细胞能够 延续增殖，其中有些细胞会因遗传物质发作改动而变成不死性细胞。该种细胞由于细胞表面糖蛋白增加，其黏着性落低。(3)活细胞的细胞膜具有选择透过性，大分子染料不能经过，因而 活
21、细胞不能被染色；死细胞的细胞膜失掉了选择透过性，大分子染料能够 经过，因而 死细胞能被大分子染料染色。(4)有丝分裂中期时染色体的着丝点陈列在赤道板上，染色体形状固定、数目明晰，是观看 染色体数目的最正确时期。(5)在细胞培育进程中，通常在冷冻(或超高温、液氮)条件下保管细胞。由于在这种条件下，细胞中酶的活性落低，细胞推陈出新的速率落低。生命观念植物细胞培育的2个易错点(1)植物细胞培育时选用幼龄植物组织或胚胎停顿细胞培育，由于其分化水平低，增殖才干强，更易于培育。(2)植物细胞培育时参与CO2的要紧作用是维持培育液的pH；O2 的作用是促进细胞有氧呼吸。命题点二植物体细胞核移植进程的剖析3(
22、2018长春普通高中高三质量检测) 2018年1月25日，我国研讨人员在世界上抢先应用去甲基化酶(Kd4d)的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类植物食蟹猴，流程如以下图，表示进程，该植物可作为研讨癌症等人类疾病的植物模型。请剖析回答：(1)2001年，美国迷信家曾经培育出胚胎细胞核移植猴。取得食蟹猴的体细胞核移植技术难度分明高于胚胎细胞核移植，缘故是_，恢复其全能性较难。(2)停顿进程时，为了避免_对细胞本身形成危害，应活期改换_。(3)据图剖析，进程是应用_技术，将成纤维细胞注入猴去核的M中期卵母细胞的_之间。(4)图中进程用到胚胎移植技术，其实质是晚期胚胎在_条件下空间地位的转
23、移。(5)研讨人员在确定Kd4d(去甲基化酶)的mRNA的作用时，做了两组实验，其中A组用正常培育液培育融合细胞，B组用正常培育液培育注入了Kd4d的mRNA的融合细胞，实验后果如以以下图所示。剖析实验数据可知，Kd4d的mRNA的作用是既能提高_，又能提高_。注：X为融合细胞发育成的胚胎数，Y为囊胚数，Z为内细胞团数。答案(1)体细胞分化水平高(2)细胞代谢产物的积存培育液(3)显微注射卵细胞膜与通明带(4)一样生理(5)融合细胞发育成囊胚的成功率囊胚中内细胞团的构成率解析(1)由于体细胞分化水平高，恢复其全能性较难，因而 取得食蟹猴的体细胞核移植技术难度分明高于胚胎细胞核移植。(2)进程表
24、示植物细胞培育，应该活期改换培育液，以避免成纤维细胞代谢产物的积存对细胞本身形成危害。(3)图中进程表示应用显微注射法将成纤维细胞注入猴去核的M中期卵母细胞的卵细胞膜与通明带之间。(4)进程表示胚胎移植，其实质是晚期胚胎在一样生理条件下空间地位的转移。(5)据图剖析，B组的囊胚成活率、内细胞团成活率都分明高于A组，阐明Kd4d的mRNA既能提高融合细胞发育成囊胚的成功率，又能提高囊胚中内细胞团的构成率。4克隆羊的成功惊动世界，它不只奠定了疾病克隆性医治的基础，又处置了器官移植中供体缺乏的征询 题，同时也给人类带来了一些过来尚未遇到的征询 题。以以下图为人类对克隆羊技术的拓展和运用，请据图回答：
25、(1)图中所触及的古代生物技术有_和_等。假定让植物1能够 发生出人体胰岛素，还需求的技术是_。(2)图中两个克隆植物长大后，各方面特征与雄性植物一样，这阐明_具有全能性。(3)运用培育基停顿胚胎干细胞培育时，培育基中除了参与一些必要的养分成格外 ，通常要参与_等自然成分，除了保证被培育细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需求保证细胞生活所需的_。(4)图中“从内细胞团到胚胎干细胞的培育进程中，普通用_处置内细胞团，使之分散成单个细胞。答案(1)植物细胞核移植胚胎移植(或胚胎联系)基因工程(或DNA重组技术)(2)体细胞核(3)血清、血浆温度和pH(4)胰蛋白酶解析(1)将细胞核与去核的卵
26、母细胞构建成重组细胞，采用了植物细胞核移植技术；将重组细胞培育成晚期胚胎，采用了晚期胚胎培育技术；将晚期胚胎移植到代孕母体，采用了胚胎移植技术；从晚期胚胎中不离出内细胞团，进而培育成胚胎干细胞，离不开植物细胞培育技术和胚胎干细胞培育技术的支持；晚期胚胎分为胚胎1和胚胎2，运用了胚胎联系技术。假定让植物1能够 发生出人体胰岛素，需求借助基因工程技术将人的胰岛素基因导入相应的受体细胞，进而培育成转基因植物1。(2)克隆植物的培育成功，阐明植物体细胞核具有全能性。(3)运用培育基停顿胚胎干细胞培育时，由于人们对细胞所需的养分物质还没有完全搞明晰 ，因而 培育基中除了参与一些必要的养分成格外 ，通常要
27、参与血清、血浆等一些自然成分。除了保证被培育细胞处于无菌、无毒及充足氧气的环境中，还需求保证细胞生活所需的温度和pH。(4)从“内细胞团到胚胎干细胞的培育进程中，会呈现细胞的接触抑制景象，因而常用胰蛋白酶处置内细胞团，使之分散成单个细胞。易错警示植物细胞核移植技术中的3个易错点(1)植物细胞核移植技术，表达了植物细胞核的全能性而非细胞的全能性。(2)克隆属于无性繁衍，发生新集体的性不、绝大少数性状与供核亲本分歧。(3)核移植技术取得的植物与供核植物性状不完全一样的缘故：克隆植物线粒体中的DNA来自去核卵母细胞；性状受环境的妨碍 ；在集体发育进程中有能够发作基因渐变。考点三植物细胞融合与单克隆抗
28、体的制备1植物细胞融合(1)概念：两个或多个植物细胞结合构成一个细胞的进程，也称细胞杂交。(2)条件：需求用聚乙二醇(PEG)、灭活的病毒或电激等诱导要素。(3)原理：细胞膜的流淌 性。(4)后果：构成具有原来两个或多个细胞遗传信息的单核细胞，称为杂交细胞。(5)意义：打破了有性杂交办法的局限，使远缘杂交成为能够。成为研讨细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新种类培育等的重要手腕，为制造单克隆抗体开辟了新途径。归结总结植物体细胞杂交与植物细胞融合的比拟工程植物体细胞杂交植物细胞融合培育条件养分物质(水、无机盐、蔗糖、氨基酸和无机酸等)、激素(细胞分裂素、生长素等)及其他条件(无菌、适合的温度和pH等
29、)葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素、血清或血浆等自然成分细胞融合原理细胞膜的流淌 性、细胞的全能性细胞膜的流淌 性、细胞增殖细胞融合办法用纤维素酶、果胶酶去除细胞壁后诱导原生质体融合用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使细胞分散成单个细胞后，诱导细胞融合诱导手腕物理法：离心、振动、电激等；化学法：聚乙二醇(PEG)物理、化学法：与植物体细胞杂交的一样；生物法：灭活的病毒后果取得杂种植株取得杂种细胞，以消费细胞产品用处抑制不同生物远缘杂交不亲和的妨碍制备单克隆抗体、病毒疫苗、搅扰素等2.单克隆抗体(1)制备进程(2)优点：特异性强、灵敏度高，可少量制备。(3)用处：作为诊断试剂；用于医治疾病和运载
30、药物。(1)植物原生质体融合与植物细胞融合原理是一样的()(2)体细胞杂交技术可用于克隆植物和制备单克隆抗体()(3)小鼠骨髓瘤细胞的染色体数为40，B淋巴细胞的染色体数为46，融合后构成的杂交瘤细胞DNA分子数为86()(4)杂交瘤细胞停顿体内培育，是为了取得能发生单克隆抗体的胚胎()(5)B淋巴细胞和骨髓瘤细胞经细胞融合后有三种细胞类型(假定仅思索两两融合的状况)()以以下图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的表示图，据图剖析：(1)与多克隆抗体相比，单克隆抗体的优点有哪些？提示单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，可少量制备。(2)图中第一次选择 和第二次选择 的目的有何不同？提示第一次选择
31、的目的是选择 出杂交瘤细胞，第二次选择 的目的是选择 出能发生所需单克隆抗体的杂交瘤细胞。命题点一细胞融合的原理及进程剖析1一系列实验证明细胞膜具有流淌 性，荧光抗体免疫标志实验的确是其中的一个典型例子。以以下图表示了人、鼠细胞融合的进程，研讨中分不将带有绿色荧光、能与人体细胞膜上HLA抗原特异性结合的抗体和带有白色荧光、能与小鼠细胞膜上H2抗原特异性结合的抗体放入细胞培育液中，对人、鼠细胞停顿标志。以下有关该实验的表达不正确的选项是()A要使实验景象分明，能够 适当提高细胞培育液的温度B选取不同生物细胞停顿融合是由于不同生物细胞表面抗原差别较大C实验阐明不同种生物细胞能够 杂交，而同种生物细
32、胞不能停顿融合D实验后果能够 直截了当 证明细胞膜上的蛋白质分子能够 运动答案C2以以下图表示细胞工程的流程图(a、b表示进程)，请据图回答以下征询 题：(1)假定图示为植物细胞融合的进程，那么a特有的诱导剂是_。以植物细胞融合为基础展开起来的杂交瘤技术为制造单克隆抗体开辟了新途径，经过把能发生抗体的_细胞与能在体外少量增殖的_细胞停顿融合，失掉既能迅速少量繁衍，又能发生专注抗体的杂交瘤细胞。(2)假定图示为植物体细胞杂交进程，那么在甲、乙融合之前，需求用_(填酶)制备_。这项工程的意义是_。(3)由甲、乙融合失掉丙细胞的全然 原理是_。答案(1)灭活的病毒B淋巴骨髓瘤(2)纤维素酶和果胶酶原
33、生质体抑制远缘杂交不亲和的妨碍，扩展亲本组合的范围(3)细胞膜的流淌 性解析(1)假定a是诱导植物细胞融合，那么特有的诱导剂是灭活的病毒。在单克隆抗体的制备进程中，应用已免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，构成杂交瘤细胞，该细胞既能够 迅速少量增殖，又能够 发生专注的抗体。(2)在植物体细胞杂交进程中，需求对甲、乙细胞先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，然后再诱导甲、乙的原生质体融合。该技术能够 抑制远缘杂交不亲和的妨碍，扩展亲本组合的范围。(3)甲、乙细胞融合构成丙细胞，应用了细胞膜的流淌 性。命题点二单克隆抗体制备进程的剖析3在应用细胞融合技术消费单克隆抗体的进程中，不需求思索()A多次注射特定
34、抗原蛋白，对实验小鼠停顿免疫BB淋巴细胞和骨髓瘤细胞之间的免疫排挤C向细胞培育液中参与促融剂的种类和处置时辰 D选择特定试剂选择 能发生特定抗体的杂交瘤细胞答案B解析制备单克隆抗体进程中，要对免疫小鼠注射特定的抗原，抗原进入机体后安慰机体发生特异性免疫反响从而发生相应的B淋巴细胞，A需求思索；免疫排挤是机体对移植物(异体细胞、组织或器官)经过特异性免疫应对使其毁坏的进程，细胞之间不存在免疫排挤，B不需求思索；向细胞培育液中参与促融剂的种类和处置时辰 会妨碍 细胞的融合，C需求思索；选择特定试剂选择 能发生特定抗体的杂交瘤细胞需求思索，否那么会妨碍 单克隆抗体的产量或失掉的单克隆抗体的特异性差，
35、D需求思索。4(2018德州高三模仿)双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。以以下图是科研人员经过杂交杂交瘤细胞技术(免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术)消费能同时识不癌胚抗原和长春碱(一种抗癌药物)的双特异性单克隆抗体的局部进程。剖析回答以下征询 题：(1)进程的目的是_，制备双特异性单克隆抗体的进程中用到的技术有_(至少答出两条)。(2)进程诱导融合的办法是_，进程选用的骨髓瘤细胞_(填“能或“不能)在HAT培育基上生长。(3)经进程选择 失掉的细胞还需转移至少孔培育板中停顿进程，缘故是_。(4)请依照所学知识，用箭头和文字补全图中方框内猎取 单克隆杂交杂交瘤细胞的
36、消费进程。(5)取得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培育或_，均可提取出少量的双特异性单克隆抗体。答案(1)使小鼠发生能分泌识不癌胚抗原抗体的B淋巴细胞植物细胞融合、植物细胞培育(2)聚乙二醇(PEG)诱导、电激等不能(3)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型(选择 失掉的杂交瘤细胞发生的抗体不是单克隆抗体)(4)将取得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培育基上选择 出杂交杂交瘤细胞克隆化培育、抗体检测选择 出单克隆杂交杂交瘤细胞(5)注射到小鼠腹腔内增殖解析(1)进程表示给小鼠注射抗原，目的是安慰小鼠发生能分泌识不癌胚抗原抗体的B淋巴细胞；依照单克隆抗体制备流程可知，该进程触及到的
37、技术有植物细胞融合技术、植物细胞培育技术。(2)进程诱导细胞融合的办法有聚乙二醇、灭活病毒、电激等；HAT选择培育基的作用是选择 出杂交瘤细胞，而骨髓瘤细胞不能生长。(3)从小鼠体内提取的B淋巴细胞不止一种类型(选择 失掉的杂交瘤细胞发生的抗体不是单克隆抗体)，因而经进程选择 失掉的细胞还需转移至少孔培育板中停顿进程。(4)单克隆抗体制备进程为：将取得的B淋巴细胞与单克隆杂交瘤细胞融合在选择培育基上选择 出杂交杂交瘤细胞克隆化培育、抗体检测选择 出单克隆的杂交杂交瘤细胞。(5)取得的单克隆杂交杂交瘤细胞在体外条件下培育或注射到小鼠腹腔内增殖，均可提取出少量的双特异性单克隆抗体。矫正易错强记长句
38、1具有全能性表达(完成)全能性具有全能性：实际上，具有细胞核的活细胞都具有全能性；表达(完成)全能性：只要发育成残缺集体，才干阐明表达(完成)了细胞的全能性。2有关植物体细胞杂交的3个易错点(1)误以为植物体细胞杂交的后果只是构成杂种细胞。植物体细胞杂交的后果最终要经过组织培育构成杂种植株。(2)误以为植物体细胞杂交属于有性生殖。植物体细胞杂交进程中没有有性生殖细胞的结合，因而不属于有性生殖，应为无性生殖。(3)误以为杂种植株的变异类型属于基因重组。杂种植株的染色体数通常是两亲本细胞染色体数目之和，属于异源多倍体，因而 变异类型为染色体变异。3B淋巴细胞要经过免疫进程，才干发生相应的抗体，因而
39、 ，与骨髓瘤细胞融合的B淋巴细胞实践上是浆细胞。4在单克隆抗体制备进程中，有两次选择 ：第一次是选择 出杂交瘤细胞(用选择培育基)；第二次是进一步选择 出能发生人们所需求抗体的杂交瘤细胞(用抗原抗体结合法)。1.植物组织培育的进程要紧包括脱分化和再分化两个阶段，脱分化的后果是构成愈伤组织，再分化的后果是构成根和芽。2植物体细胞杂交需求用酶解法制备原生质体，所用的酶包括纤维素酶和果胶酶。3不论是植物体细胞杂交依然 植物细胞融合，都需求诱导。4植物组织培育需求各种养分成分和植物激素，植物细胞培育也需求各种养分成分及血清。5植物体细胞杂交可用于作物育种，植物细胞融合可用于单克隆抗体的制备。6发生单克
40、隆抗体的细胞是杂交瘤细胞，它既能发生单克隆抗体又能有限增殖。重温高考演练模仿1(2018全国，38)2018年细胞期刊报道，中国迷信家抢先成功地运用体细胞对非人灵长类植物停顿克隆，取得两只克隆猴“中中和“华华。回答以下征询 题：(1)“中中和“华华的取得触及核移植进程，核移植是指_。经过核移植办法取得的克隆猴，与核供体相比，克隆猴体细胞的染色体数目_(填“减半“加倍或“不变)。(2)哺乳植物的核移植能够 分为胚胎细胞核移植和体细胞核移植，胚胎细胞核移植取得克隆植物的难度_(填“大于或“小于)体细胞核移植，其缘故是_。(3)在哺乳植物核移植的进程中，假定分不以雌性集体和雄性集体的体细胞作为核供体
41、，通常，所失掉的两个克隆植物体细胞的常染色体数目_(填“一样或“不同)，性染色体组合_(填“一样或“不同)。答案(1)将植物的一个细胞核移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中不变(2)小于胚胎细胞分化水平低，恢复全能性绝对容易(3)一样不同解析(1)核移植是指将植物的一个细胞核移入一个已去掉细胞核的卵母细胞中，构成重组细胞。重组细胞构成的晚期胚胎可移植到受体子宫内进一步发育，最终分娩失掉克隆植物。由于染色体在细胞核中，因而 克隆植物体细胞的染色体数目与提供细胞核的集体的体细胞一样。(2)由于植物的胚胎细胞分化水平低，恢复全能性绝对容易，而植物的体细胞分化水平高，恢复全能性特不 困难，因而，植物体细胞核移植的难度分明大于胚胎细胞核移植。(3)哺乳植物雌雄集体的体细胞中，细胞核内常染色体的数目是一样的，性染色体组合是不同的。假定分不以雌性集体和雄性集体的体细胞作为核供体，那么失掉的克隆植物的体细胞中常染色体的数目一样，性染色体组合不同。2(2017海南，31)甲、乙两名同窗分不以某种植物的绿色叶片和白色花瓣为资料，应用植物组织培育技术繁衍该植物。回答以下征询 题：(1)以该植物的绿色叶片和白色花瓣作为外植体，在一定条件下停顿组织培育，均能取得试管苗，其原理是_