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1、专题强化练(十一)时间：45分钟总分值：120分1(15分)科研人员以猕猴桃为原料，选用优良菌种，制备猕猴桃酒和猕猴桃醋，其简化工艺流程图如下，答复以下问题：(1)在榨汁过程中清洗和破碎的顺序是_，原因是_。(2)酒精发酵时一般将温度控制在_，发酵过程中绝大多数微生物不能生长的原因是_。(3)最初的猕猴桃酒中含有少量尿素，脲酶可以分解尿素。根据电荷性质别离脲酶的方法是_，脲酶不宜直接投入酒中，原因是_。(4)固定化菌种常用的方法是_，固定化酶不宜用此方法的原因是_。解析：(1)为了防止杂菌污染，在榨汁过程中应先清洗再破碎。(2)酒精发酵时一般将温度控制在1825 ，发酵过程中绝大多数微生物不能
2、生长的原因是酒精发酵的条件为缺氧、酸性，抑制绝大多数微生物生长。(3)根据电荷性质别离脲酶的方法应为电泳法，脲酶不宜直接投入酒中，原因是不能再次利用，产品难以纯化。(4)固定化菌种常使用包埋法。由于固定化酶分子很小，易从包埋材料中漏出，因此不宜采用包埋法。答案：(除注明外，每空2分，共15分)(1) 先清洗再破碎防止杂菌污染(2)1825(1分)酒精发酵的条件为缺氧、酸性，抑制绝大多数微生物生长(3) 电泳法 不能再次利用，产品难以纯化(4)包埋法体积小的酶容易从包埋材料中漏出2(15分)(2022揭阳市高三测试)利用微生物降解可以将废弃烟草的茎秆制成有机肥。某实验小组尝试用实验室微生物筛选方
3、法，筛选出耐高温的纤维素分解菌，请答复以下问题：(1)纤维素分解菌是一类能产生纤维素酶的微生物，纤维素酶是一种复合酶，它包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分，其中能将纤维二糖分解为葡萄糖的酶是_。(2)利用样品稀释和涂布平板操作对纤维素分解菌进行纯化过程中，不需要以下哪种仪器？_(填“酒精灯“培养皿 “显微镜“无菌水)。(3)假设要别离出耐高温的能分解纤维素的真菌，同时抑制细菌的繁殖，可采取的措施是：培养基中以纤维素为唯一碳源，_ (答出2点)。(4)纤维素分解菌也能以葡萄糖为碳源，但是实验室中培养纤维素分解菌的培养基一般选用纤维素粉而不选用葡萄糖，该培养基不选用葡萄糖作为碳源的原因是_。(
4、5)为了鉴別纤维素分解菌，培养基中要参加_以形成红色复合物。甲同学在实验时筛选得到了几株有透明降解圈的菌落，降解圈大小与纤维素酶的_有关。解析：(1)根据以上分析可知，葡萄糖苷酶能将纤维二糖分解为葡萄糖。(2)利用样品稀释和涂布平板操作对纤维素分解菌进行纯化过程中，需要用到的仪器有酒精灯、培养皿，也需要用到无菌水，但是不需要用显微镜观察。(3)耐高温的纤维素分解菌具有耐高温和分解纤维素的能力，而其他微生物没有这些能力，因此假设要别离出耐高温的能分解纤维素的真菌，同时抑制细菌的繁殖，可采取的措施是：培养基中以纤维素为唯一碳源，并参加一定量的抗生素，在高温环境下培养。(4)葡萄糖是微生物均可利用的
5、碳源用葡萄糖作为碳源时，能分解纤维素和不能分解纤维素的细菌都能生存(利用葡萄糖)，不能起到筛选作用，因此实验室中培养纤维素分解菌的培养基一般选用纤维素粉而不选用葡萄糖。(5)在培养基中参加刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明降解圈，从而可筛选纤维素分解菌；透明降解圈的大小与纤维素酶的量与活性有关。答案：(除注明外，每空2分，共15分)(1)葡萄糖苷酶(2)显微镜(3)并参加一定量的抗生素，在高温环境下培养(3分)(4)葡萄糖是微生物均可利用的碳源，用葡萄糖作为碳源时，能分解纤维素和不能分解纤维素的细菌都能生存
6、(利用葡萄糖)，不能起到筛选作用(4分)(5)刚果红量与活性3(15分)(2022沈阳市高三期末)烧伤病人容易感染绿脓杆菌，引起化脓性感染，比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都是非常经典的抗绿脓杆菌的药物。临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，从病人身上获取少量样本，按照一定的实验步骤操作，以确定该病人体内的绿脓杆菌对不同抗生素的敏感性。(1)获取绿脓杆菌单菌落：配制适于绿脓杆菌生长的培养基，培养基中的营养成分一般含有_、_、水和无机盐，调节pH至7，灭菌处理，待培养基冷却至50时，在酒精灯火焰附近倒平板。经过选择培养、鉴别等步骤获得单菌落。(2)检测绿脓杆菌对不同抗生
7、素的敏感性：取该单菌落适当稀释，用_接种于固体培养基外表，使其均匀生长，布满平板。将分别含等剂量的比阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素的相同大小的滤纸片均匀置于该平板的不同位置，适宜条件下培养一段时间，结果是含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，这说明绿脓杆菌对上述抗生素_；含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，这说明_；含比阿培南、碳青霉烯类的滤纸片周围的透明圈也比含美罗培南的小，且比阿培南透明圈中出现了一个菌落，请推测此菌落产生的可能原因：一是_，二是_。(3)根据上述实验结果，为到达抗绿脓杆菌的目的，对于该患者来说最好应选用抗生素_。解析：(1)微生物培养基的成分一般
8、都含有碳源、氮源、水和无机盐。(2)适宜条件培养一段时间，含不同抗生素的滤纸片周围均出现透明圈，说明绿脓杆菌比照阿培南、美罗培南、头孢菌素和碳青霉烯类抗生素都敏感；如果含头孢菌素的滤纸片周围的透明圈比含美罗培南的小，那么说明绿脓杆菌对头孢菌素面敏感性比对美罗培南弱；比阿培南透明圈中出现了一个菌落，可能的原因是杂菌污染，或者是绿脓杆菌产生耐药性突变个体形成的菌落。(3)分析(2)中的实验结果可知，该病人体内的绿脓杆菌对美罗培南最敏感，是该病人首选的抗生素。答案：(除注明外，每空1分，共15分)(1)碳源氮源(2)稀释涂布平板法(或涂布平板法)(2分)敏感绿脓杆菌对头孢菌素的敏感性比对美罗培南弱(
9、4分)杂菌污染比阿培南的绿脓杆菌形成的菌落(绿脓杆菌产生耐药性突变形成的菌落)(4分)(3)美罗培南4(15分)(2022榆林市高三模拟)乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖，具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固化步骤如下：(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用_作为培养基中的唯一碳源。从功能上讲，这种培养基属于_。(2)在倒平板前，宜采用_方法对培养基进行灭菌，筛选该生物时可用_或涂布平板法进行接种。(3)纯化后的乳糖酶通常可用_法进行蛋白质纯度的鉴定以及检测其分子量大小。在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越_。(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价链结合法)进行固定化，可
10、通过检测固定化乳糖酶的_确定其应用价值，而制备固定化细胞一般常采用_。解析：(1)筛选产乳糖酶的微生物L时，宜用乳糖作为培养基中的唯一碳源；由于只有能利用乳糖的微生物才能在该培养基上生存，因此从功能上讲，这种培养基属于选择培养基。(2)对培养基进行灭菌应该采用高压蒸汽灭菌法；接种微生物常用平板划线法或涂布平板法。(3)纯化后的乳糖酶通常可用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行蛋白质纯度的鉴定以及检测其分子量大小：在相同条件下，带电荷相同的蛋白质电泳速度越快，说明其分子量越小。(4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价链结合法)进行固定化，可通过检测固定化乳糖酶的(酶)活性确定其应用价值，而制备固定化细胞一般
11、常采用包埋法。答案：(除注明外，每空2分，共15分)(1)乳糖(1分)选择培养基(2)高压蒸汽灭菌平板划线法(3)SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳小(4)(酶)活性或(酶)活力包埋法5(16分)(2022山师大附中高三模拟)生物技术拥有巨大的开展空间，给人们的生活带来了深刻的变化。某兴趣小组翻阅资料发现橙皮精油和乳酸菌素都具有抑菌的效果，如图为制备橙皮精油和乳酸菌素的流程及其抑菌实验结果，答复以下问题：(1)筛选乳酸菌A时，所用培养基需经_法进行灭菌。将某种细菌接种到培养基上并形成菌膜，最可能采用的接种方法是_。(2)图中，橙皮精油或乳酸菌素接种在培养基上_所在的位置。(3)橙子的果肉可用于制备果酒和
12、果醋。为监测发酵状况，可用_法对发酵菌种进行计数，一段时间后统计结果分析可发现，培养液中的菌种种群数量的增长曲线变化规律是种群数量经过一定时间的增长后，趋于稳定。(4)用蒸馏法提取玫瑰精油时，如果想提取较高品质的产品，对温度和时间的要求是_。(5)果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括_、果胶分解酶和果胶酯酶。(6)凝胶色谱法是根据_别离蛋白质的有效方法。“血红蛋白的释放步骤中，在_的作用下，红细胞破裂，释放出血红蛋白。解析：(1)培养基常用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。接种微生物常用平板划线法和稀释涂布平板法，图中进行抑菌实验时，接种的方法最可能是稀释涂布平板法。(2)图中进行抑菌实验时，最终可通过测量
13、透明圈的直径(或大小)来比拟橙皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。(3)检测培养液中的菌种种群数量的变化可以采用抽样检测法，对发酵菌种进行计数，一段时间后统计结果分析可发现，培养液中的菌种种群数量的增长曲线变化规律是种群数量经过一定时间的增长后，趋于稳定，呈现S型曲线。(4)用蒸馏法提取玫瑰精油时，由于水中蒸馏有时会导致原料焦糊，如果想提取较高品质的产品，蒸馏时温度不宜过高，并且适当延长时间。(5)果胶酶是分解果胶的酶的总称，包括多聚半乳糖醛酸酶、果胶分解酶和果胶酯酶等。(6)凝胶色谱法是根据相对分子质量的大小别离蛋白质的有效方法。“血红蛋白的释放步骤中，在蒸馏水和甲苯的作用下，红细胞破裂，释放出血红
14、蛋白。答案：(除注明外，每空2分，共15分)(1)高压蒸汽灭菌稀释涂布平板法(2)透明圈(1分)(3)显微镜直接计数法(抽样检测)(4)温度不宜过高，适当延长时间(5)多聚半乳糖醛酸酶(6)相对分子质量大小蒸馏水和甲苯6(15分)漆树种子中的油脂(不溶于水，易溶于脂溶性溶剂)可开发为食用油或转化为生物柴油。目前常用溶剂法萃取漆树种子油脂，其过程为：漆树种子粉碎加溶剂水浴加热溶剂不断回流提取蒸发溶剂收集油脂。答复以下问题：(1)漆树种子中的油脂通常可用_进行染色，染色结果是_。(2)对漆树种子油脂进行萃取时，为不影响油脂品质和提取效果，应使用_(填“自然晾干、“高温烘干或“新鲜)的漆树种子。粉碎
15、漆树种子的目的_。(3)利用不同溶剂进行萃取时，对油脂的萃取得率和某些重要理化性质的影响不同，实验结果如下表。工程萃取得率酸值过氧化值丙酮23.72%8.269.82石油醚26.35%7.965.73乙醛25.30%8.125.83正己烷26.17%7.986.13混合溶剂28.73%8.317.53注：萃取得率(%)(M样品M残渣)/M样品100%；酸值高，说明油脂品质差；过氧化物是油脂变质过程中的中间产物，其含量常用过氧化值来表示。实验结果说明，_作为萃取溶剂较为合理，理由是_。(4)萃取过程中，影响萃取的因素除漆树种子和溶剂外，还有_(写出两点即可)。萃取液的浓缩可直接使用_装置。解析：
16、(1)漆树种子中的油脂通常可用苏丹(或苏丹)染液进行染色，染色结果是橘黄色(或红色)。(2)因为新鲜的种子含水量高，用于提取的有机溶剂会被水稀释，进而降低对油脂的提取效果，而高温烘干会改变油脂的结构，所以对漆树种子油脂进行萃取时，为不影响油脂品质和提取效果，应使用自然晾干的漆树种子。为了便于材料和溶剂充分接触，提高萃取效率，应粉碎漆树种子。(3)依据表格数据可知：与用其他有机溶剂作为萃取溶剂时相比，用石油醚作为萃取溶剂时，萃取得率最高，可得到较多的油脂，酸值和过氧化值最小，说明油脂品质较高，因此用石油醚作为萃取溶剂较为合理。(4)萃取过程中，影响萃取的因素除漆树种子和溶剂外，还有萃取温度(水浴
17、温度)、萃取时间等。萃取液的浓缩可直接使用蒸馏装置。答案：(除注明外，每空2分，共15分)(1)苏丹(或苏丹)橘黄色(或红色)(2)自然晾干便于和溶剂充分接触，提高萃取效率(2分)(3)石油醚萃取得率最高，可得到较多的油脂，酸值和过氧化值最小，说明油脂品质较高(2分)(4)萃取温度(水浴温度)、萃取时间等(2分)蒸馏(1分)7(15分)(2022大庆市第四中学高三模拟)随着人类基因组方案的进展以及多种生物基因测序工作的完成，人类跨入了蛋白质时代。对蛋白质进行研究和应用，首先需要获得高纯度的蛋白质。请答复以下问题：(1)如果要从红细胞中别离出血红蛋白，实验前取新鲜血液时要在采血容器中预先参加柠檬
18、酸钠溶液，这样做的目的是_。(2)凝胶色谱法是根据_的大小别离蛋白质的有效方法在凝胶色谱法别离过程中，血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动_。(3)装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，一旦发现有气泡，凝胶色谱柱必须重新装填。原因是_。色谱柱制作成功的标志是_。(4)富集培养自生固氮菌时，为到达筛选自生固氮菌的目的，在配制培养液时，不应添加_。培养时，要将锥形瓶放在摇床上震荡，目的是_。解析：(1)柠檬酸钠可以防止血液凝固。(2)凝胶色谱法是根据相对分子质量大小别离蛋白质的有效方法，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，路程长，移动的速度慢，相对分子质量较大的蛋白质不容易进入凝
19、胶内部的通道，路程短，移动的速度快，因此血红蛋白比分子量较小的杂蛋白移动快。(3)装填凝胶色谱柱时，要注意色谱柱内不能有气泡存在，原因是气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低别离效果。装填凝胶色谱柱时，红色区带均匀一致地移动是色谱柱制作成功的标志。(4)富集培养自生固氮菌时，为到达筛选自生固氮菌的目的，应将其放置在未添加氮源(含氮物质)的培养液中。培养时，要将锥形瓶放在摇床上震荡，目的是增加培养液中溶解氧的浓度，使培养液中营养物质与菌体充分接触。答案：(除注明外，每空2分，共15分)(1)防止血液凝固(2)相对分子质量快(3)气泡会搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序，降低别离效果(3分)红色区带均
20、匀一致地移动(2分)(4)氮源(含氮物质)增加培养液中溶解氧的浓度，使培养液中营养物质与菌体充分接触8(15分)生产果汁时，用果胶酶处理果泥可提高果汁的出汁率。答复以下相关问题：(1)某同学用三种不同的果胶酶进行三组实验，各组实验除酶的来源不同外，其他条件都相同，测定各组的出汁量，据此计算各组果胶的活性的平均值并进行比拟。这一实验的目的是_。(2)现有一种新别离出来的果胶酶，为探究其最适温度，某同学设计了如下实验：取试管16支，分别参加等量的果泥、果胶酶、缓冲液，混匀，平均分为4组，分别置于0、5、10、40下保温相同时间，然后，测定各试管中的出汁量并计算各组出汁量的平均值。该实验温度设置的缺
21、乏之处有_和_。(3)某同学取5组试管(AE)分别参加等量的同种果泥，在A、B、C、D、4个实验组的试管中分别参加等量的缓冲液和不同量的同种果胶酶，然后，补充蒸馏水使4组试管内液体体积相同；E组参加蒸馏水使试管中液体体积与实验组相同。将5组试管置于适宜温度下保温一定时间后，测定各组的出汁量。通过AD组实验可比拟不同实验组出汁量的差异。本实验中，假设要检测参加酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，E组设计_(填“能或“不能)到达目的，其原因是_。解析：(1)据题意可知实验的自变量是果胶酶的来源不同，因变量是果胶酶的活性，因此该实验目的是探究不同来源果胶酶的活性。(2)据实验设计可知，该
22、实验是探究果胶酶的最适温度，所以自变量是温度，因此该实验方案中，温度应该在常温范围内设置系列温度梯度且梯度差值相等。另外探究温度对酶活性的影响时，应保证酶促反响只能在设定的温度下进行，同一实验组的反响温度只能是一个，所以实验操作应该是将各组盛有果胶酶的试管与盛有果泥的试管分别在设定温度下处理一定时间后再将两只试管混合，才能保证实验在设定的温度下进行。(3)本实验的自变量是果胶酶的量，因变量是出汁量，对照实验的设计应遵循单一变量原那么和对照原那么，根据实验设置，通过AD组实验可比拟不同实验组出汁量的差异。假设要检测参加酶的量等于0而其他条件均与实验组相同时的出汁量，那么E组应参加缓冲液而不是蒸馏水，使试管中液体体积与实验组相同，才符合实验设计应遵循的单一变量原那么。答案：(除注明外，每空3分，共15分)(1)探究不同来源果胶酶的活性(2)温度范围设置不适宜温度梯度设置不合理(或各组的酶促反响受两个不同温度影响)(3)不能(1分)E组参加蒸馏水而不是缓冲液违背了单一变量原那么(5分)