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1、百蕊草亲水性化学成分分析摘要目的对百蕊草中亲水性化学成分进行研究。方法采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等分离手段,对百蕊草水提取物经大孔树脂吸附,乙醇洗脱的亲水性组分进行分离纯化,应用核磁共振波谱分析、结合文献报道鉴定化合物构造。结果从中分离纯化得到个化合物,分别鉴定为:山奈酚,紫云英苷,山奈酚,二吡喃葡萄糖苷,山奈酚吡喃鼠李糖基吡喃葡萄糖苷,山奈酚吡喃鼠李糖基乙酰基吡喃葡萄糖苷,芸香苷。结论中主要成分为以山奈酚为母核的黄酮苷类化合物,化合物、为初次从百蕊草中分离得到。关键词百蕊草;化学成分;黄酮苷百蕊草为檀香科百蕊草属多年生寄生草本,别名细须草、一棵松、青龙草等,常附着在其他植物的根上生长,在我国
2、分布较广,主要产地为安徽、浙江和湖北等省。百蕊草性寒,味辛、涩,归肺、肾二经,有清热解毒、补肾固精之成效,具有良好的抗炎、解热、镇痛、抗菌等作用。本课题组研究发现,百蕊草水提取物对肾病综合征大鼠和肾病大鼠均有良好的治疗效果,其水提取物经大孔树脂吸附,乙醇洗脱的亲水性组分显示出良好的肾脏保护作用,提示组分是其有效成分的富集部位,。本研究在前期药理实验结果的基础上,采用硅胶柱色谱、凝胶柱色谱等方法对百蕊草的亲水性组分进行化学成分分离纯化,通过理化性质及波谱测定鉴定其化学构造。从中分离得到个黄酮及黄酮苷类化合物,分别为:山奈酚,紫云英苷,山奈酚,二吡喃葡萄糖苷,山奈酚吡喃鼠李糖基吡喃葡萄糖苷,山奈酚
3、吡喃鼠李糖基乙酰基吡喃葡萄糖苷,芸香苷,其中,化合物、为初次从百蕊草中分离得到。仪器与材料核磁共振仪德国布鲁克仪器有限公司;磁式质谱仪,色谱泵,紫外检测仪日本岛津公司,色谱工作站浙江大学智能信息工程研究所;旋转蒸发仪上海申生科技有限公司;离心沉淀器上海手术器械厂;电子分析天平梅特勒托利多;循环水式多用真空泵上海大颜仪器设备有限公司。大孔吸附树脂天津欧瑞生物科技有限公司;凝胶公司;色谱用硅胶、层析用硅胶板烟台江友硅胶开发有限公司;色谱纯甲醇、乙腈德国默克股份两合公司;其他试剂均为分析纯。百蕊草样品购自河南驻马店,于年月采集自河南泌阳县金满农场,由第二军医大学药学院生药学教研室孙莲娜副教授鉴定为檀
4、香科百蕊草属百蕊草的枯燥全草。提取分离百蕊草全草,切成左右小段,洗净,加水煎煮次,每次。合并煎液,加水至,搅拌,冷却后静置过夜。上清液经大孔树脂柱吸附次,纯化水洗涤至洗出液无色后,树脂柱依次用、乙醇梯度洗脱。减压回收洗脱液中的乙醇后分别得到百蕊草大极性组分位干浸膏,中等极性组分。取组分,经硅胶分散,上硅胶柱色谱,二氯甲烷甲醇梯度洗脱,薄层色谱检测,分别得到个组分。各组分经反复胶柱色谱分离,以氯仿甲醇,为流动相,凝胶柱色谱纯化,和纯度分析,得到化合物、。构造鉴定各化合物核磁共振波谱测定、委托第二军医大学药学院分析测试中心进行。百蕊草的主要化学成分为黄酮及黄酮苷类化合物,其乙酸乙酯提取部位为其抗炎
5、、止痛作用的有效部位,主要有效成分是山奈酚和紫云英苷。本研究的对象组分对肾脏损害具有较好的保护作用,从中分离得到的个单体化合物,除了芸香苷,其余均为山奈酚或以山奈酚为母核的黄酮苷类化合物,且含量较高,提示山奈酚及其苷类化合物是百蕊草抗炎、抗氧化等药理活性的主要活性物质。国内对百蕊草最早的化学成分研究报道,从中分离得到了全草中含量较高的黄酮苷百蕊草素,其构造中葡萄糖以位羟基和鼠李糖的羟基缩合而连接。本实验分离得到的化合物在百蕊草中含量最高,谱图显示,其构造中鼠李糖与葡萄糖相关,异核多键相关谱显示,与葡萄糖存在明显相关,其他波谱数据与文献报道一致,因而能够确证化合物分子构造中,葡萄糖和鼠李糖以的方式连接。基于此前文献中未有明确数据支持葡萄糖和鼠李糖的连接方式,且此后均未有百蕊草素的波谱数据文献报道,因而,笔者初步推定,化合物与百蕊草素应为同一化合物,而百蕊草素的构造应该加以修正为山奈酚吡喃鼠李糖基吡喃葡萄糖苷。