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1、【精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流新型整合素v3受体拮抗剂的设计及抗肿瘤活性.精品文档.新型整合素v3受体拮抗剂的设计及抗肿瘤活性程刚英、倪广慧、张曼、赵娟、朱一婧、姜凤超*华中科技大学同济医学院药学院，武汉（430030）摘要：目的：构建v3受体拮抗剂的药效团模型，设计新型v3受体拮抗剂的先导化合物。方法：选择对v3受体具有较高拮抗活性（IC501.5 nmolL-1）的四个类型的30个化合物为训练集，构建整合素v3受体拮抗剂药效团模型。结合药效团模型和设计出新型结构的先导化合物，合成并利用MTT法检测化合物对人脐静脉内皮细胞(ECV304)与宫颈癌细胞株(Hela)的抑制
2、作用。结果：最佳药效团含一个芳环中心, 一个疏水中心和两个氢键受体，其相关系数与权重值数系数为：RMS=0.44, Correl=0.90, Weight=1.31, Config=16.26。合成的8个目标化合物经UV、IR、1H-NMR，13C-NMR等光谱确证，目标化合物对ECV304和Hela细胞的生长均有一定的抑制活性。在浓度为50mol/L 条件下，对ECV304细胞生长的抑制作用大于50%，对Hela细胞生长的抑制作用大于40%，最高达78%。关键词：整合素v3受体拮抗剂；药效团模型；抑瘤活性；先导化合物肿瘤血管生成抑制剂1是一类能破坏或抑制血管生成，有效地阻止肿瘤的生长和转移的
3、药物，整合素2是一种跨膜糖蛋白，分布于多种肿瘤细胞表面，是介导细胞与细胞、细胞与细胞外基质粘附作用的主要因子。其中v3在肿瘤诱导的血管生成过程中起重要作用3，近来被认为一种血管新生的标志。v3受体拮抗剂通过占据受体胞外区的特异性识别位点，阻止受体与内源性配体结合，从而抑制血管内皮细胞的生成以及促进血管内皮细胞的凋亡，有效地阻止肿瘤血管生成，达到有望控制肿瘤的生长和转移的目的4。v3受体拮抗剂包括含RGD三肽序列（图2）的小分子肽和拟肽化合物及模仿RGD三肽结构设计的非肽分子。由于IIb3、v5和51亦能识别RGD三肽序列，故设计v3拮抗剂时不仅要考虑其对v3受体的拮抗活性，还需注意选择性。本文
4、选择已报道的v3受体拮抗剂中拮抗活性较高的化合物为样本，构建v3受体拮抗剂药效团模型。设计相应的化合物，并利用所得的药效团模型进行虚拟筛选和类药性分析，对设计的化合物进行体外抗肿瘤活性实验，结果表明，设计的化合物对ECV304和Hela细胞均具有一定的作用。 一、药效团模型构建选择30个文献报道的活性较好，不同结构类型的v3受体拮抗剂（IC50值在1.5 nmolL-1以下）作为训练集元素。根据结构类型不同，将训练集中化合物按照中间连接部分（如烷基酰胺、哌嗪、哌啶和-内酰胺等）不同分为相应的子集等。利用计算机辅助药物设计系统的CATALYST软件，构建出相应的v3受体拮抗剂的药效团模型。其中的
5、优化模型含一个芳环中心（RA）, 一个可阴离子化部位（NI），两个疏水作用基（HP），其相关系数与权重值数等分别为：RMS=0.73, Correl=0.90, Weight=1.17, Config=14.00。检验表明，构建的药效团模型具有较好的活性预测能力，可用来指导v3受体选择性拮抗剂的设计与筛选。 a b图1药效团模型1(a)及其与化合物B-3的叠合图(b)二、设计与合成利用构建的药效团模型，在MDDR数据库中搜索符合模型的化合物，参照作用于整合素v3受体的信号分子RGD三肽的基本结构，以合成的现实性与合理性为依据，对搜索得到的化合物进行结构修饰，设计了多种不同结构类型的化合物。对设
6、计的化合物利用药效团模型进行虚拟活性预测，最后从中筛选出八个目标化合物(图2)。图2 RGD及设计的新化合物类药性分析结果表明，设计的新型化合物符合利平斯基规则，初步显示无明显口服生物利用度或代谢分布差问题。无致癌性，膜刺激性，致敏性，免疫毒性和神经毒性，除了化合物II中个别化合物具有一定致突变性外，较安全。化合物的合成路线如下所示（图3）：图3. 合成反应路线 (a) 乙酰乙酸乙酯，哌啶，95%乙醇，2050；(b) KOH，回流；(c)HCl；(d) 乙酸酐，回流；(e) 3，丙酮，室温；(f) 硫脲，碘，微波辐射；(g) 乙醚，浓氨水；(h) 3，丙酮，回流三、实验熔点由X-5型显微熔点
7、测定仪测定，温度未校正。UV：紫外光谱仪：756PC Spectrum(上海光谱仪器有限公司)；IR：Spectrum One傅立叶红外光谱仪测定。1H-NMR，13C-NMR：均采用Parian Mercury VX-300型核磁共振仪。 3.1 中间体的合成3.1.1 2，4-二乙酰基-3-芳香基戊二酸二乙酯(1a1d)的合成 搅拌下缓慢将4.0ml六氢吡啶滴加到将0.1mol芳香醛，26.0ml乙酰乙酸乙酯(0.2mol)，100 ml95%乙醇的混合溶液中，滴加完后缓慢升温，当反应瓶中出现固体后停止加热，继续搅拌两小时。减压过滤，滤饼用95%乙醇洗涤（20ml3），得白色固状物。粗产物
8、用95%酒精重结晶，得白色针状结晶，即为2，4-二乙酰基-3-芳香基戊二酸二乙酯5(1a1d)。1a，产率：91.0%，mp.155.4-156.5；1b，产率：93.9%，mp.148.2-151.5；1c，产率：96.8%，mp.148.7-149.3；1d，产率：93.9%，mp.145.7-148.2；3.1.2 2,3-芳香基戊二酸(2a2d)的合成 在55搅拌条件下，将0.05mol 2，4-二乙酰基-3-芳香基戊二酸二乙酯(1a1d)，分批加入到50ml浓度约为50%的KOH溶液中，加完后加热回流半小时后若反应体系为浊液，则加入少量水至反应体系澄清。回流1小时，停止加热，冷却至室
9、温后用浓盐酸将反应液调至PH=2，冷却。过滤所得固体，用水洗滤饼至洗液PH=5-6后，用蒸馏水重结晶，干燥，得白色晶体，即3-芳香基戊二酸(2a2d)。2a，产率：83.8%，mp.179.0-181.4；2b，产率：85.2%，mp.181.5-182.9；2c，产率：89.0%，mp.185.1-187.6；2d，产率：85.3%，mp.190.1-191.9；3.1.3 3-芳香基环戊二酸酐(3a3d)的合成 将0.03mol 3-芳香基戊二酸(2a2d)与10ml乙酸酐混合，搅拌下加热回流8小时，冷却至室温，过滤析出的固体，用乙醚洗涤（10ml3），所得粗品，用丙酮/石油醚混合液重结晶
10、，干燥得白色晶体，即3-芳香基环戊二酸酐6(3a3d)。3a，产率：69.2%，mp.105.4-107.9；3b，产率：72.4%，mp.143.3.0-144.8；3c，产率：75.0%，mp.115.4-117.9；3d，产率：63.4%，mp.161.5-163.8；3.1.4 4-苯基噻唑-2-胺(4)的合成 称取7.6克硫脲(0.1mol)， 12.7克碘(0.05mol)，研细后加入250ml单口瓶中。装上微波反应装置，粉末搅拌均匀后加入5.2ml苯乙酮(0.05mol)。P=160W， 1min；而后P=80W，5 min。反应体系稍冷后加入50ml乙醚搅拌10 min，析出黄
11、色沉淀。抽滤，用20ml乙醚洗涤滤饼至黄色。抽干后弃去滤液，滤饼投入200ml的80热水中。固体立即溶解，趁热过滤。弃去沉淀，在滤液中滴加浓氨水至pH=8，产生白色絮状沉淀。冷却后抽滤，20 ml蒸馏水洗滤饼两次，95%乙醇重结晶，干燥后得浅黄色针状结晶8.7克，即4-苯基噻唑-2-胺7(4)，产率为49.4%，熔点：147.7150.0。3.2 目标化合物的合成3.2.1 目标化合物(IaId)的合成 将0.01mol 3-芳香基环戊二酸酐(3a3d)溶于30ml丙酮后滴加到15ml含有1.8克N-苄基哌嗪(0.01mol)的丙酮溶液。滴加完毕后继续搅拌两小时。过滤，白色固体用丙酮（10ml
12、3）洗涤，用95%乙醇重结晶，真空干燥，得目标化合物(IaId)。5-(4-苄基哌嗪基) -3-苯基-5-氧代戊酸5-（4-benzylpiperazin-1-yl）-5-oxo-3- phenylpentanoic acid ,Ia ，白色晶体，产率68.2%；mp. 172.9174.6；UV(0.001mol/L NaOH水溶液，/nm)：277.00(VW，B带，*跃迁)，211.03(VS，E1带，*跃迁)；IR(KBr，/cm-1)：3440.23(O-H)， 3036.56 (=C-H)， 2955.82 (C-H)， 1690.96，1629.50 (C=O)，1461.60，
13、1518.73 (C=C，苯环骨架振动)， 749.05，705.99 (=C-H，苯环单取代) ；1H-NMR (300MHz ，NaOH，D2O ) /ppm：7.2057.147(2H，H-20，H-22，m)，7.1357.001(2H，H-9，H-13，m)，7.0986.999(3H，H-10，H-11，H-12，m)， 6.925，6.912(2H，H-19， H-23，d)， 6.738，6.724(H-21， d)， 3.4953.582(H-17，m)，3.2293.156(2H，H-3b，H-5b，m)，3.1123.135(2H，H-7，m)， 3.0762.856(2
14、H ，H-3a，H-5a，m)，2.5792.501(1H，H-16b，q)，2.4242.3043(3H，H-6b，H-2b，H-16a，m)，2.0902.023(2H，H-2a，H-6a，dd)，1.7671.520(1H，H-24b，d)，1.1280.886(1H，H-24a，d)；13C-NMR (300MHz ，NaOH，D2O)/ppm：180.464(C-25)，172.538(C-14)，142.772(C-18)，135.939(C-8)，135.473(C-20，C-22)， 131.583(C-19，C-23)， 129.95(C-9，C-13)， 128.858(C
15、-10，C-12)， 128.508(C-11)， 127.707(C-21)，62.100(C-7)，55.282(C-2，C-6)，41.193(C-24)，40.450(C-16)， 40.158(C-17)，38.993(C-3)，38.235(C-5)5-(4-苄基哌嗪基) -3-(4-甲氧基苯基)-5-氧代戊酸（Ib，5-(4-benzylpiperazin-1-yl)-3- (4-methoxyphenyl)-5-oxopentanoic acid）， 白色结晶，收率：60.5%，mp. 176.1178.2。UV(0.001mol/L NaOH水溶液，/nm)：208.03（s
16、，E2带），225.02（s，K带）， 278.00（w，B带）。IR(KBr，/cm-1)：3452.03(sb，O-H)， 3031.37 (=C-H)， 2939.65，2837.14 (C-H)， 1702.49，1630.48 (C=O)，1512.27，1461.82 (C=C，苯环骨架振动)， 830.86，743.78，702.12 (=C-H，苯环1，4取代) ；1H-NMR (300MHz ，NaOH，D2O ) /ppm：7.2317.197(2H，H-9，H-13，m)，7.0987.087(3H，H-10，H-11，H-12，m)，7.0347.021(2H，H-19
17、，H-23，m)，6.778-6.764(2H，H-20，H-22，m)，3.661(3H，H-28，s)，3.5233.503(2H，H-7，s)，3.1403.069(1H，H-17，m)，2.909(2H，H-3b，H-5b，t)，2.6162.575 (2H，H-3a，H-5a，t)，2.404，2.398 (2H，H-16，m)，2.3872.349 (2H，H-6b，H-2b，m)，2.325，2.132 (2H，H-2a，H-6a，m)，1.820，1.194 (2H，H-24，d)；13C-NMR (300MHz ，NaOH，D2O)/ppm：180.604(C-25)，172
18、.711(C-14)，157.801(C-21)，135.568(C-8)，135.337(C-18)， 130.213(C-19，C-23)，128.905(C-9，C-13)，128.597(C-10，C-12)，127.936(C-11)， 114.226(C-20，C-22)，61.989(C-7)，55.388(C-2，C-6)，51.849(C-24)，45.648(C-24)，44.171(C-16)，41.217(C-17)，40.278(C-3)，39.078(C-5)。5-(4-苄基哌嗪基) -3-(3，5-二甲氧基苯基)-5-氧代戊酸（Ic，5-(4-benzylpipe
19、razin-1-yl)-3- (3，5-dimethoxyphenyl)-5-oxopentanoic acid），白色结晶，收率：65.6%，mp. 158.9161.0。UV(/ nm)：332.97(VW，R带，n*跃迁)， 279.00(W，B带，*跃迁)，211.03( M，E1带，*跃迁)；207.03(M，E1带，*跃迁)，226.02( VS，E1带，*跃迁)；IR(KBr，/cm-1)： 3061.41， 3018.50 (=C-H)， 2939.13，2838.40 (C-H) ，1701.26，1630.31 (C=O)， 1467.08，1511.86 (C=C，苯环骨
20、架振动) ， 743.44，701.71 (=C-H，苯环单取代)；1H-NMR(300 MHz，NaOH，D2O)/ppm ：7.2537.194(2H，H-9，13，m) ，7.1047.033 (3H，H-10，H-11，H-12，m)，6.7846.770(3H，H-19，H-23，H-21，m)，3.666(6H，H-29，H-30，s)，3.5103.532(1H，H-17，m)，3.2853.264(1H，H-7b，d)，3.2253.193(2H，H-3b，H-5b，t)，3.1373.116(1H，H-7a，d)，3.0893.055(2H，H-3b，H-5b，t)，2.93
21、62.576(2H，H-3a，H-5a，t)，2.4332.360(2H，H-16，m)，2.3252.305(2H，H-2b，H-6b，m) ，2.1482.129(2H，H-2a，H-6a，d)，1.8381.808(1H，H-24b，s)，1.206(1H，H -24a，s) ；13C-NMR(300MHz，NaOH，D2O)/ppm ：180.639(C-25) 172.759(C-14)，157.843(C-20，C-22)，135.596(C-18)，130.238(C-8)，128.917(C-9，C-13)，128.650(C-10，C-12)，127.997(C-11)，11
22、4.254(C-19，C-23)，62.028(C-21)，55.423(C-7)，51.891(C-2，C-6)，51.520(C-29，C-30)，45.658(C-24)， 44.218 (C-16)，41.250(C-17)，40.300(C-3)，39.113(C-5) 5-(4-苄基哌嗪基) -3-(4-溴苯基)-5-氧代戊酸（Id，5-(4-benzylpiperazin-1-yl)-3- (4-bromophenyl)-5-oxopentanoic acid）白色结晶，收率：69.6%，mp. 199.1201.4。UV (/ nm)：208.03(M ，E1带，*跃迁)， 2
23、27.02(VS，E1带，*跃迁)；IR (KBr，/cm-1)：3031.39(=C-H)，2928.29cm-1，2837.67 (=C-H) ，1704.33，1628.64 (C=O) ， 1488.27，1462.64 (C=C，苯环骨架振动) 740.58，700.41 (=C-H，苯环单取代) ，631.39 (=C-Br)；1H-NMR (300MHz ， NaOH，D2O)/ppm：7.134(m，2H ，H-20，H-22)，7.1207.059(m，4H，H -9，H-13，H-19，H-23)，6.878-6.865(m， 3H， H-10，H-11，H-12)， 3.
24、184(m，1H，H-17)，3.1123.055(t，2H，H -3b，H-5b)，2.9362.916(m，1H，H-7b)， 2.8622.453(t，2H，H-3a，H-5a)，2.663(m，1H，H-7a，)，2.380(m，2H，H-16)，2.3662.263(m， 2H，H -2b，H-6b) ，1.9871.969(d，2H，H-2a，H-6a) ，1.436(s，2H，H-24)；13C-NMR(300MHz，NaOH，D2O)/ppm：179.968(C-25)，172.191(C-14)，142.566(C-18)，135.857(C-8)，131.791 (C-20
25、，C-22)，130.128(C-19，C-23)，129.861(C-9，C-13)，128.674(C-10，C-12)，127.932(C-11)，120.362(C-21)，62.359(C-7)，52.177(C-2，C-6)，45.646(C-24)，43.747(C-16)，41.253(C-17)，40.541(C-3)，38.403(C-5) 3.2.2 目标化合物(IIaIId) 将0.01mol 3-芳香基环戊二酸酐(3a3d)，溶于20ml丙酮，与10ml含有1.8克4-苯基噻唑-2-胺(4)(0.01mol)的丙酮溶液混合，搅拌下加热回流20小时。反应完毕后，减压蒸除
26、溶剂，得灰色固状物。用0.2mol/L 的Na2CO3溶液100ml处理上述固体，充分搅拌后过滤。滤液用稀盐酸，调节至PH=4，有固体析出。过滤所的固体，用水洗涤（20ml3），得粗产物。粗产物用丙酮/石油醚重结晶，干燥得目标化合物(IIaIId)。3-苯基-5-(4-苯基-1，3-噻唑-2-氨基 -5氧代戊酸（a，5-oxo-3-phenyl-5-(4-phenyl-1，3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid），白色结晶，收率：46.4%，mp. 108.1111.5。UV (/ nm)： 304.99 (W，R带n*跃迁)，206.03(S，E1带，*跃迁)，
27、231.02( VS，E1带，*跃迁) ；IR(KBr，/cm-1) ：3184.27 (=O-H)，3058.85 ，3029.07 (=C-H)，2965.99 (C-H)，1692.39 (C=O)，1550.15 (C=C，苯环骨架振动)， 770.76，729.82(=C-H，苯环单取代) ；1H-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm ：11.107(1H，OH，s)，8.0667.840(2H ，H-5，H-12，s)，7.4617.368(6H ，H-10，H-11，H-13，H-14，H-18，H-22，m)，7.3567.254(2H ，H-19，H-21，m)，7.1
28、857.161(1H， H-20，s)，3.8363.788(1H，H-16，m)，3.0562.968(2H，H-23，m)，2.8892.724(2H，H-15，dd)；13C-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm：173.319(C-24)， 170.265(C-7)，158.633(C-2)，150.416(C-4)，144.131(C-17)，135.961(C-9)， 129.406(C-18，C-22)，129.222(C-19，C-21)，128.514(C-12)，128.383(C-11，C-13)，127.198(C-20)，126.683(C-10，C-14)，1
29、08.196(C-5)，42.620(C-15)，40.605(C-23)，39.581(C-16) 3-(4-甲氧基苯基)-5-(4-苯基-1，3-噻唑-2-氨基 -5氧代戊酸（b，3-(4-methoxyphenyl)-5-oxo-5-(4-phenyl-1，3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid） 白色结晶，收率：47.9%，mp. 98.7100.0。UV (/ nm)：206.03(S ，E1带， *跃迁)，231.02( VS， E1带，*跃迁 )；IR (KBr，/cm-1)：3184.52 (O-H，bm)，3058.31(=C-H)， 2958.
30、49，2834.81 (C-H)， 1690.64(C=O)，1547.31，1513.36 (C=C，苯环骨架振动) ， 774.97，729.53 (=C-H，苯环单取代)，831.59(=C-H，苯环对位取代)；1H-NMR (300MHz，丙酮-6D)/ppm：11.100-11.000(1H，OH，s)，7.8787.865(2H，H-5，H-12，m)，7.3997.364(2H，H-10，H-14，m)，7.2977.254(4H，H-11，H-13，H-18，H-22，m)，6.8246.812(2H，H-19，H-21，m)，3.8053.741(3H，H-27，s)，3.7
31、123.697(1H，H-16，m)，3.0382.923(2H，H-23，m)，2.8472.810(1H，H-15b，dd)，2.7112.672 (1H，H-15，dd)；13C-NMR(300MHz，丙酮-6D)/ppm：173.640(C-24)，172.333(C-7)，170.502(C-2)，159.493(C-20)，158.447(C-4)，136.375(C-9)，134.59(C-17)，129.405(C-18，C-22)，129.321(C-12)， 128.505(C-11，C-13)，126.690(C-10，C-14) ，114.527(C-19，C-21)，
32、 108.196(C-5)，55.429(C-27)，43.143(C-15)，41.058(C-23)，38.858(C-16) 3-(3，5-二甲氧基苯基)-5-(4-苯基-1,3-噻唑-2-氨基 -5-氧代戊酸（c，3-(3，5-dimethoxyphenyl) -5-oxo-5-(4-phenyl-1,3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid）,白色结晶，收率：53.9%，mp. 108.2110.0。UV (/ nm)：277.00( W，B带，*跃迁)，208.03( M， E1带，*跃迁)；227.02( VS， E1带，*跃迁)；IR(KBr，/cm
33、-1)(附图15)：3101.35 (=C-H) ，2945.17 (C-H)，1802.12， 1761.09 (C=O)， 1460.38，1589.08 (C=C，苯环骨架振动)；1H-NMR (300MHz ，丙酮-6D)/ppm：6.540(9H，H-5， H-12， H-10，H-14，H-18，H-22，H-11，H-13 ，H-20，m)，3.7943.760(6H，H-27，H-29，m) ，3.0983.075(1H，H-16，m)，2.9002.600(2H，H-23，m)，2.0882.052(2H，H-15，m)3-(4-溴苯基)-5-(4-苯基-1，3-噻唑-2-氨
34、基 -5氧代戊酸(IId，3-(4-bromophenyl) -5-oxo-5- (4-phenyl-1，3-thiazol-2-yl)aminopentanoic acid)白色结晶，收率：49.4%，mp. 184.4186.0。UV (/nm)：296.99( VW，R带，*跃迁)，207.03( W ，E1带，*跃迁)； 227.02( VS ，E1带，*跃迁)；IR(KBr，/cm-1)：25003300 (O-H，b，m) ，3036.56(=C-H)， 1712.44 (C=O)，1495.30 (C=C 苯环骨架振动)，824.59 (=C- H苯环对位取代)；1H-NMR (
35、300MHz，丙酮-6D)/ppm：10.910.4(1H，OH，s)，8.07.8(1H，H-5，m) ，7.4717.457(5H，H-12，H-10，H-14，H-18，H-22，m)，7.3197.305(4H， H-11，H-13，H-19，H-21，m)，3.6063.576(1H，H-16，s) ，2.8232.785(2H， H-23，d)，2.6902.648(2H，H-15，s)3.3 抗肿瘤活性测定 肿瘤细胞选取v3受体高度表达的人脐静脉内皮细胞(ECV304)与宫颈癌细胞株(Hela)。将目标化合物和的8个化合物先配制成0.02mol/L的药物原液，再用含10%胎牛血清
36、的DMEM-1640培养液稀释至所需的五个浓度100mol/L、50mol/L、25mol/L、12.5mol/L、6.25mol/L，供生物活性筛选。每个药物五个浓度，以50mol/L 的5-氟尿嘧啶（5-Fu）为阳性对照、空白对照、溶剂对照(1%DMSO)进行实验。利用MTT法检测化合物对肿瘤细胞生长的抑制作用。四、结果与讨论目标化合物均为白色固体，难溶于水、苯、乙醚、氯仿等，易溶于DMF、DMSO。IaId不溶于丙酮，在乙醇中溶解度小，溶于NaHCO3溶液； IIaIId溶于丙酮，在乙醇中溶解度较大，不溶于NaHCO3溶液，溶于Na2CO3溶液。目标化合物对ECV304细胞和Hela细胞
37、的抑制作用分别见图4和图5，由图可以看出目标化合物对于ECV304细胞和Hela细胞均有一定的抑制作用，但活性均低于阳性对照5-Fu，并且的活性略低于。同时目标化合物的b和 c 对ECV304细胞的活性较强，目标化合物c与b对Hela细胞的活性略高于其他化合物。目标化合物对ECV304和Hela细胞具有有一定的抑制活性，但是抑制活性不强。由于目标化合物拟在于通过抑制细胞膜表面的v3受体，阻断细胞的粘附来抑制肿瘤细胞的生长，并不能像5-Fu一样达到杀死细胞的能力，故生物活性小于5-Fu。v3受体在血管内皮细胞以及恶性肿瘤细胞膜的表面有高度表达，这就意味着，抑制一个v3受体并不代表杀死一个细胞，当
38、拮抗剂占据细胞膜表面大部分v3受体时，细胞才因此而出现凋亡。故MTT试验所得出的半数抑制浓度并不是目标化合物对v3受体的半数抑制浓度，而是目标化合物对细胞的半数抑制浓度。MTT试验仅能反应化合物的活性作用趋势。本文所设计的目标化合物对有v3受体高度表达的ECV304细胞有一定的抑制活性并呈良好的梯度关系，暗示化合物可能对v3受体有着较强的抑制作用，其生物活性有待于进一步研究。从对细胞的抑制结果来看，有甲氧基取代的化合物的生物活性较为突出。在对ECV304的抑制作用中，b和c的活性比其他化合物更加明显；而在对Hela的抑制作用中，c和b的活性比其他化合物更加明显。参考文献1. Carmeliet
39、 P, Jain R K. Angiogenesis in cancer and other diseases. Nature, 2000, 407(6801): 249572. Shimaoka M, Springer T A. Therapeutic antagonists and conformational regulation of integrin function. Nat Rev Drug Discov, 2003, 2(9): 7037163. Martin J, Humphries A, Mould P. An anthropomorphic integrin. Scien
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