实验动物学考试重点.doc

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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流1、2、3、4、5、6、 实验动物学考试重点.精品文档.7、 实验动物及实验用动物的概念及种类: 实验动物(laboratory animal):经人工培育,对其携带的微生物和寄生虫实行控制,遗传背景明确或者来源清楚,用于生命科学研究、药品与生物制品生产和检定以及其他科学实验的动物。特点:遗传限定动物遗传背景明确,来源清楚的动物;微生物、寄生虫限定动物;主要用于科学实验;具备的要求:对实验处理表现出极高的敏感性;个体反应表现出极强的均一性;模型性状具有遗传上的稳定性;动物来源具有易获得性 实验用动物(animals for research)

2、:实际上指一切可以用于实验的动物,包括野生动物、经济动物、警卫动物、观赏动物和实验动物。分类:实验动物主要为哺乳类动物 野生动物在自然环境中生长、繁育并延续其种族的物种 无脊椎动物(海胆、蟑螂、蝇、蚊)、鱼类(鲫鱼、泥鳅)、两栖类(蛙、蟾蜍)、啮齿目(黑线姬鼠)、灵长目(猿猴) 经济动物 为人类社会生活需要而驯养、培育和繁殖生产的动物产业家畜(猪,马、牛、羊、鸡、兔、鱼)及社会家畜(犬、猫、金鱼) 观赏动物供人类玩耍和公园里供游人观赏而饲养的动物8、 实验动物学的分支学科 动物实验:以实验动物为实验对象的科学实验在生命科学领域可用于:研究生命过程的组织形态、机能反应的变化;在动物自然发生的疾病

3、及人为制作的病理模型观察疾病发生、发展的规律;药物等因素对动物的作用。(1)实验动物遗传育种学:利用遗传调控原理,控制动物的遗传特性,培育出新的动物品种、品系和各种动物模型,以及使野生动物和家畜、家禽实验动物化的科学(2)实验动物微生物学与寄生虫学:研究实验动物的微生物和寄生虫分类学,实行对实验动物携带的微生物与寄生虫进行质量监控,探讨与实验动物疾病作斗争的措施,以达到控制和消灭实验动物疾病的目的。(3)实验动物环境生态学:研究实验动物生存环境与条件的科学,研究环境中的物理因素、化学因素、栖居环境、生物因素等对实验动物的影响作用(4)实验动物营养学:研究饲料中的营养成分对实验动物的生长、发育、

4、繁殖、抗病力以及对实验结果所产生的影响作用的科学,最终实现实验动物营养的标准化。(5)实验动物的饲育管理:对实验动物本身进行繁育和生产管理的科学,从宏观上对各种实验动物进行标准化和法规化管理(6)实验动物医学:研究实验动物疾病的诊断、预防、治疗以及在生物医学领域中应用的科学。(7)比较医学:研究实验动物与人类的基本生命现象,开发并建立各种人类疾病的实验动物模型,以实验动物作为人类的替身,通过比较、识别,以了解人类疾病的发生、发展过程,从而进行病理、生理、药理和毒理等方面的实验研究,为增进人类的健康服务。(8)动物实验技术:进行动物实验时的各种操作技术、实验方法和技术标准,以及饲养管理技术和各种

5、质量监测技术等的研究。(9)中医实验动物学:以中医药理论为基础,运用实验动物学的理论和方法,进行中医药研究的学科。3、3R原则 1959年提出,目前被普遍接受,并正努力付诸实施其含义是替代、减少和优化替代:用低等实验动物或非实验动物替代高等实验动物进行实验 体外培养器官、组织、细胞等替代实验动物 物理或化学方法替代动物实验减少:尽可能减少使用实验动物的数量 合用动物;改进统计学设计;用低等动物替代高等动物,减少高等动物特别是非人灵长类动物的用量;使用高质量动物优化:优化实验设计和操作,以减轻动物的痛苦 改进动物实验操作技术;减少社会和环境因素对实验动物的影响;改良仪器设备4、 近交系动物、封闭

6、群动物和杂交群动物的概念和遗传学特征 近交系:在一个动物群体中,任何个体基因组中99%以上的等位位点为纯合时定义为近交系。近交系经至少20代的同胞兄妹交配或亲子交配培育而成。品系内所有个体都可追溯到起源于第20代或以后代数的一对共同祖先。近交系动物的特点: (1)基因纯合性:纯合子的纯合度在理论上达最高点98.6%。所有基因位点都是纯合子,无暗藏隐性基因。(2)遗传组成的同源性:可追溯到其原始的一对共同祖先,基因型完全一致。也称同基因性。(3)表型的一致性:相同基因型动物,在相同环境因素下,其表现型是均一的,反应性是一致的。类似精密天枰,任何可遗传的体征都一致如形态(毛色、体重)、行为类型、血

7、型、组织型等。 (4)对外界因素的敏感性:由于高度近交,近交系动物某些生理功能稳定性降低,因而对外界因素反应更为敏感。 (5)遗传特征的可辨别性:每一种近交系都有自己独特的遗传概貌,可建立遗传概貌图,可根据遗传监测方法将两个外貌相同的近交系分开。 (6)遗传组成独特性:每个近交系在遗传组成上都是独一无二的,因而具有独特的表现型。 (7)背景资料可查性:背景资料和数据较为完整,培育和保种过程中都有详细记录,分布广泛,生物学特性和应用的范围广,积累大量资料文献,方便应用。(8)国际分布广泛性:任何个体都携带该品系的全部基因库,引种只要12对就可将该品系传下去,容易广泛分布,世界各地可重复、验证。

8、(9)长期的遗传稳定性:人为选择不会改变基因型,可世代相传。 封闭群动物:封闭群又称远交群动物,以非近亲交配方式进行繁殖生产的一个实验动物种群,在不从外部引入新的血缘条件下,至少连续繁殖四代以上称封闭群。 遗传学特征:基因库大,杂合率高,群体基因频率基本保持稳定,在封闭群内个体差异程度主要取决于其祖代起源,具有较强的繁殖力和生产力,对有害的基因突变具有较强的承载力。1、繁殖率高2、重复性差。广泛应用于教学、预实验、一般实验及药物筛选和独立安全实验、生物制品、化学制品的鉴定等。此外,封闭群动物可能携带大量隐性有害突变基因,因此可用于遗传病研究。杂交群动物概念:由两个不同近交系杂交产生的后代群体称

9、为杂交群动物。子一代简称F1。杂交群动物一般是在两个近交系动物之间矜持那个交配说繁殖的第一代动物。在杂交群动物,其个体的杂合性一致,及其遗传型和表现型都一致,但其后代一般不宜继续繁殖和培养近交系,因为子二代会发生遗传上的性状分离。特点:(1)具有杂交优势,因而生命力强,适应性和抗病力强,繁殖旺盛。在很大程度上可克服近交系繁殖引起的各种近交衰退现象。(2)具有与近交系动物基本相似的遗传和表现型均质性。(3)采用杂交群动物所作的各种实验,其结果重复性好。(4)具有亲代双亲的特点。(5)国际分布广,广泛应用于各类实验研究,其研究结果易于重复,便于国际交流。5、 近交系动物的命名 近交系的命名规则:一

10、般用1至4个大写英文字母表示:如A、AE、BA、AKR、DBA、NZB、STAR 有些品系在大写字母间可加写12个阿拉伯数字来表示: 如C3H、C57BL、C57BR、C57L等; 非正规命名,如已被国际广泛承认则可保留沿用:如129、101、615等 关系相近,同来源的不同品系,其名称基本相似,差异部分用一个不同大写英文字母表示。如NZB、NZO、NZW、NZX、NZY等 近交代数表示:一般是在品系符号后面括号里写上代数,并在代数前加上F(Filial的缩写), 如A(F78),如资料不全可写上已知代数,其前面加?如AKR(F?+10)6、 常用的小鼠、大鼠近交系、封闭群小鼠:近交系:BAL

11、B/c,C57BL,C3H,BDA,A系,AKR,CBA,TA1,TA2,和615封闭群:昆明小鼠(KM),NIH,ICR和LACA大鼠:近交系:F344/N,Lou/CN等 封闭群:Wister大鼠,SD,Long-Evans等7、实验动物微生物学和寄生虫学分类(国际分级法)等级种类饲养条件控制程度备注三级无菌动物Germfree animal隔离系统Isolation system以封闭的无菌技术获得,用现有方法不能检出任何微生物和寄生虫的动物。三级悉生动物Gnotobiotics animal隔离系统Isolation system确知已带的微生物,经无菌条件饲养的动物。明确所带的微生物

12、。二级无特定病原体动物Specific pathogen free animal屏障系统Barrier system不带有指定的致病性微生物和寄生虫的动物。带有非特定的微生物和寄生虫一级普通动物Conventional animal开放系统Open system不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病的病原。对微生物携带状况不明确实验动物微生物学和寄生虫学分类(国内标准)等级种类饲养条件四级无菌动物Germfree animal GF隔离系统Isolation system四级悉生动物Gnotobiotics animal GN隔离系统Isolation system三级无特定病原体动物S

13、pecific pathogen free animal SPF屏障系统Barrier system二级清洁动物Clean animal CL屏障系统Barrier system一级普通动物Conventional animal CV开放系统Open system(1)普通动物(CV):不携带所规定的人兽共患病病原和动物烈性传染病病原的实验动物小鼠、大鼠不设普通级(GB149222011)在普通环境里饲养,房舍要有防野鼠、防昆虫设施,饲料和垫料只消毒不灭菌,饮水须符合城市饮用水标准微生物控制要求最低外貌健康、正常的饮食,眼角、鼻腔无分泌物附着,尸检无眼观病灶主要用于教学示教;科学研究的预试验;

14、没有培育出高等级的实验动物(2)清洁动物(最少疾病动物):除普通动物应排除的病原外,不携带对动物危害大和对科学研究干扰大的病原的实验动物.小鼠排除病原10种(必检项目4种),病毒5种(必检3种),寄生虫5种(类)(必检3种);大鼠排除病原菌10种(必检5种),病毒2种(必检2种);寄生虫5种(类)(必检3种)来源于SPF动物或剖腹产动物在屏障环境里饲育,所用垫料、用具应经高压蒸汽灭菌,饮水进行酸化、饲料通过放射线照射灭菌,工作人员需着无菌工作服、靴、帽、口罩进入屏障环境,进行饲育或实验可应用于生物医学研究的各个领域(3)无特定病原体动物(SPF动物):除清洁动物应排除的病原外,不携带主要潜在感

15、染或条件致病菌和对科学实验干扰大的病原的实验动物。小鼠排除病原菌16种(必检8种),病毒11种(必检6种),寄生虫7种(类)(必检5种);大鼠排除病原菌15种(必检9种),病毒7种(必检7种);寄生虫7种(类)(必检5种)来源于无菌动物或悉生动物在屏障环境里饲育适用于所有的科研实验(国际公认的标准实验动物)(4)无菌动物现有的检测技术,在动物体内外的任何部位均检不出任何活的微生物和寄生虫的动物必须用人为的方法培育出来,在隔离环境里饲育特点:形态学、生理学无菌动物的特点形态学上消化系统: 盲肠膨大,肠壁菲薄,易发生盲肠扭转,导致破裂循环系统:心脏变小免疫系统:胸腺上皮细胞变大,胞浆泡状结构和溶酶

16、体变小生理学上免疫功能:免疫应答慢,过敏反应、对异体移植物的排斥反应以及自身免疫现象消失或减弱。对微生物感染非常敏感生长率:豚鼠、兔生长率降低,大、小鼠改变不大代谢:水分代谢周期延长,肠管对水的吸收率低营养:体内不能合成VitB、VitK抗辐射能力:增强寿命:长于普通动物悉生动物:人为地将指定微生物丛定居在无菌动物体内外所形成的动物与无菌级别相同可分为单菌、双菌和多菌8、 GB14922清洁级小鼠大鼠应排除的细菌和病毒(必检)(p30) 小鼠:病毒:鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒 病原菌:沙门菌、支原体、鼠棒状杆菌、泰泽病原体大鼠: 病毒:汉坦病毒、仙台病毒 病原菌:沙门菌、支气管鲍特杆菌、

17、支原体、鼠棒状杆菌、泰泽病原体9、无菌动物的应用 动物模型研究:GF可用于建立具有正常菌丛或致病菌丛的动物模型 老年病研究:研究微生物在机体衰老过程中的作用 心血管疾病研究:许多心血管疾病与机体胆固醇代谢相关,而微生物直接影响胆固醇代谢,利用无菌动物研究肠道菌群的变化与胆固醇代谢的关系 免疫学研究:抗体产生的机制;免疫抑制剂的研究;微生物维持机体非特异性和特异性免疫力的作用 肿瘤研究:研究特殊微生物与肿瘤发生的关系以及阐述致癌物质的作用机制 药理与毒理研究:研究某些物质、药物的药理和毒理与体内微生物的关系10、无菌动物、无特定病原体动物和普通动物的比较项目无菌动物SPF动物普通动物传染病无无有

18、或可能无寄生虫无无有或可能无试验结果明确明确有疑问应用动物数少量少量多或大量统计价值很好可能好不准确长期实验可能好可能好困难自然病死率很少少高长期实验存活率约100%约90%约40%实验的准确设计可能可能不可能实验结果的讨论价值很高高低11、必检应排除的细菌小鼠:沙门菌、支原体、鼠棒状杆菌、泰泽病原体大鼠:沙门菌、支气管鲍特杆菌、支原体、鼠棒状杆菌、泰泽病原体必检应排除的病毒小鼠:鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒、仙台病毒大鼠:汉坦病毒、仙台病毒必检应排除的寄生虫体外寄生虫(节肢动物)、弓形虫、全部蠕虫应排除的细菌除清洁动物应排除的外还包括:小鼠、大鼠:嗜肺巴斯德杆菌、肺炎克雷伯杆菌、金黄色葡萄球菌、铜

19、绿假单胞菌应排除的病毒除清洁动物应排除的外还包括:小鼠:小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒型、小鼠细小病毒大鼠:小鼠肺炎病毒、呼肠孤病毒型、大鼠细小病毒RV株、大鼠细小病毒H-1株、大鼠冠状病毒/大鼠涎泪腺炎病毒除清洁动物应排除的寄生虫外不应检出的寄生虫纤毛虫、鞭毛虫12、GB14925影响实验动物环境的因素气候因素:温度、湿度、气流与风速、通风与换气理化因素:光照、噪声、空气的洁净度、梯度压差、有害气体、信息素生物因素:同种生物、异种生物1) 气候因素 温度:大多数实验动物属于恒温动物环境温度对实验动物的影响:影响生长发育和繁殖;影响代谢;影响健康和抗感染能力;激发应激反应;影响实验结果GB14925

20、-2010规定大小鼠合适的温度为2026,日温差不超过4 湿度:湿度过高,微生物易于繁殖和传播,垫料、饲料也易发生霉变高温高湿导致机体蒸发散热受阻,易引起代谢紊乱和抵抗力下降 湿度过低,易致粉尘飞扬,空气中变态反应原的含量随湿度的下降而上升引起动物和人的呼吸道疾病;大鼠易发生环尾病我国规定实验动物室空气相对湿度基准值为40%70% 气流与风速:主要影响动物皮肤的体表蒸发、对流散热及环境的空气质量合理的气流和风速能调节温度和湿度,使动物感觉舒适,有效降低室内粉尘和有害气体,控制传染病的流行,有利于实验动物和工作人员的健康。气流速度过小,空气流通不良,有害气体浓度升高,散热困难,易造成呼吸道疾病的

21、传播;气流速度过大,动物体表散热量增加,同样危及动物的健康,影响动物实验结果。动物饲育间的气流值一般为0.10.2m/s(笼具处不超过0.2m/s) 通风与换气:目的是供给动物新鲜合乎要求的空气,除去室内恶臭物质过于频繁,动物将消耗过多的能量用于维持体温,导致生育率下降在封闭的空间一旦人为的通风停止,室内空气质量下降,甚至可能造成实验动物的窒息死亡屏障环境换气次数不低于15次/h、隔离环境换气次数不低于20次/h2)理化因素 光照动物房应有合适的人工光源合适的光周期模拟自然界的昼夜更替(光周期可影响动物生殖腺的成熟和性周期的活动)持续黑暗可使卵巢和子宫的重量下降,持续光照动物持续发情,大鼠和小

22、鼠可出现永久性阴道角化合适的光强不致损伤动物的视网膜和方便工作人员的观察和操作。国家标准要求实验动物照明度为1020lx,工作照明度为不低于200lx,照明时间为12/12或10/14(1lx指一支蜡烛从1米外投射在1m2的表面上的光的数量) 噪声:动物的听阈比人更宽噪声产生于:外界传入、室内机器产生、动物自身产生噪声对动物的影响包括神经系统心血管系统听源性痉挛消化及内分泌系统繁殖及幼小动物的生存国家标准,饲育室噪声应控制在60dB以下 空气洁净度:空气净化(过滤)的程度(5um以下的颗粒物可吸入支气管或肺部,引起损害或成为微生物的载体)分为三级5级饲育无菌动物、7级饲育SPF动物、8级饲育清

23、洁动物 梯度压差:动物房内相通的区域之间存在着一定的压力差避免室外或结净度较低的空气向洁净度较高的环境内渗透造成污染。压差方向从高级别洁净区向低级别洁净区清洁走廊动物室污染走廊外界动物室清洁走廊污染走廊外界梯度压差屏障环境不低于10pa,隔离系统不低于50pa 有害气体:氨气、甲基硫醇、硫化氢、硫化甲基、三甲胺、苯乙烯、乙醛和二硫化甲基等八种,以前三种为主 氨气是由细菌分解尿素产生,氨含量增多刺激动物粘膜引起流泪、咳嗽,严重者引起肺水肿和肺炎。长期处于高浓度氨的环境中,实验动 物上呼吸道出现慢性炎症,失去使用价值。250ppm下,豚鼠49天内死亡率达80% 家兔408ppm可刺激咽喉,500p

24、pm可见气管及支气管出血,698ppm可刺激眼部,1720ppm出现咳嗽硫化氢产生于动物的粪便和肠中,是有强烈臭鸡蛋味的气体,能刺激粘膜、神经,降低动物的妊娠率标准规定氨气浓度不高于14mg/m3(20ppm) 信息素(引物信息素):由动物释放至体外的一类物质,对其它动物的繁殖等多种行为产生明显的影响小鼠可产生:假性妊娠和发情周期混乱(Lee-Boot);怀孕初期的小鼠与交配对象以外的雄性动物接近或同居时产生的中止妊娠的反应(Bruce)3)生物因素 同种生物因素:社会因素: 直线型猴、兔、鸡、狗、猪; 专制型小鼠、大鼠、猫 势力范围: 群养动物时,每个个体都有自己的势力范围,哪怕地位最低劣的

25、动物面对最强的个体,为了保卫自己的势力范围也有防卫的习性饲养密度:一定面积内饲养动物的数量饲养密度可影响:环境的空气洁净度、有害气体的浓度、动物体内微生物的种类及含量、甚至影响实验动物的内分泌不同种类动物、同种动物不同体重动物每只所需的最小空间不同(书P53)动物群养时,笼具底板每平方米可收容成年实验动物最大密度大约是:小鼠100只、大鼠50只、豚鼠20只、兔4只、犬1只、猴1只175mm245mm125mm的空间最多可容纳体重为20g的小鼠10只、30g的小鼠8只异种动物因素:不同种的动物应分室饲育。影响动物的习性;传染疾病;生活的适宜条件不同微生物因素:引起动物的疾病或潜在感染。人为因素:

26、反应在对实验动物的饲养管理、试验处理或技术操作过程中。影响动物的发育、实验结果13、小鼠、大鼠繁育生产设施及动物实验设施环境指标项目实验动物生产间动物实验间屏障环境隔离环境屏障环境隔离环境温度,20262026日温差,44相对湿度,%4070最小换气次数,次/h15201520动物笼具处气流速度(m/s)0.2相通区域的最小静压差,Pa10501050空气洁净度,级75或775或7落下菌数,个/皿3无检出3无检出氨浓度,mg/m314噪声,dB60照度,lx最低工作照度200动物照度1520昼夜明暗交替时间,h12/12或10/1414、实验动物设施及组成实验动物设施:界定实验动物生存空间、维

27、持其需要的建筑物和设备根据功能不同可分为:(1)实验动物生产设施、(2)动物实验设施和(3)实验动物特殊实验设施(1)是指用于实验动物繁育、生产的建筑物和设备的总和(2)是指以研究、试验、教学、生物制品和药品及其相关产品生产、检定为目的而进行实验动物饲育、试验的建筑物和设备的总和(3)包括感染动物实验设施(动物生物安全实验室)和应用放射性物质或有害化学物质等进行动物实验的设施三者在环境指标控制上有相似之处实验动物设施的选址:大气含尘浓度及化学污染程度较低,自然环境较好的区域;空气含菌水平低,避开自然疫源地;能保证水电供应,交通方便;远离有严重震动和噪声干扰的区域。组成:饲育室或动物实验室、检疫

28、室、洗刷消毒室、废弃物处理设施、实验动物监测室、办公室、资料室、库房和机械设备室布局原则:有利于防止动物疾病和人兽共患病的传播,各级、各类、各种动物须保持各自的独立性、相互隔离,避免互相干扰、交叉感染;方便工作人员的饲育操作、实验操作及设施设备的维护,并有足够的储物空间,易于保持相应的净化标准和各项环境指标达标;人员、动物、物品和净化空气按单向路线移动,以避免交叉污染和相互影响。根据用途分为:普通环境、屏障环境、隔离环境15、普通环境:符合实验动物居住的基本要求,控制人员和物品、动物出入,不能完全控制传染因子。一定的环境控制:空调机、送风、排风装置和初、中效过滤器一定的微生物控制:有防野鼠、防

29、虫设施 饲料、饮水要符合卫生要求,垫料要消毒分三个区:前区:检疫室、库房、办公室、休息室等控制区:饲育室或动物实验室、清洁走廊、清洁物品储存室等后勤处理区:污物走廊、洗刷消毒室、污物处理设施等16、屏障环境:符合实验动物居住的基本要求,严格控制人员和物品、动物出入用于清洁级或SPF级实验动物饲养或实验的场所分三区清洁区:饲养室或实验室、清洁走廊、清洁准备室、清洁物品贮存室、检疫室等污染区:污物走廊、洗刷消毒室等外部区:接受动物室、饲料加工室、库房、焚烧炉、更衣淋浴间、值班室、办公室、机械设备室等空气经过滤后(初、中、高效)进入(空气洁净度为7级);设施内不同的区域之间存在着一定的空气压力差(不

30、小于10Pa);物品经高压蒸汽灭菌等方法处理后进入;人员需经一定的消毒程序后方可进入;运送的动物经一定步骤的消毒后方能进入人、实验动物、物品和空气的移动路线人:更衣淋浴更衣清洁走廊饲养室或动物实验室污染走廊洗刷消毒室更衣外部区域物品:消毒的物品传递窗或渡槽清洁准备室储存室饲养室或动物实验室包装处理污物走廊外部区域实验动物:外来实验动物传递窗检疫室清洁走廊饲养室实验动物污物走廊外部区域空气:洁净空气清洁走廊、清洁准备室、清洁物品储存室饲养室或动物实验室污物走廊外部区域人员入室前要求: 经常保持手脚、衣服的清洁,保持口腔清洁卫生;有病时,严禁进入;最好不去其他的动物饲养室和实验室,去过的要有一周以

31、上的隔离期方能进入入室操作要求: 在指定处换鞋 开关门迅速,每扇门关闭后才能开下一扇门 按规则换衣,不得将外用物品带入 手表饰物等不得带入 淋浴时间不得少于15分钟 淋浴顺序:手头(含头发)脸口上身下身脚手 用肥皂和洗发剂及热水充分洗浴并漱口5次以上 将脚踏入药水槽(2%新洁尔灭)浸泡23分钟跨入通道内并用干浴巾擦抹身体 进入清洁区缓冲间,穿无菌衣,口罩帽子短裤脚套上衣塑胶手套 打开紫外灯,将手伸入药水槽(2%新洁尔灭)浸泡3分钟,再走入清洁走廊,进入饲养观察室17、独立通气笼盒(individually ventilated cages, IVC) 在密闭独立单元(笼具或笼盒)内,洁净气流独

32、立通气,废气集中外排,并可在超净工作台内进行操作和实验的微型SPF级实验动物饲育和实验的设备。由主机、笼架、笼盒和送排风系统等组成。在影响实验动物的因素中,由IVC控制的主要有换气次数、气流速度、笼盒内外的静压差、空气的洁净度、噪声和落下菌数。18、隔离环境:隔离环境是以隔离器及其他附属装置所组成的饲养系统,以保持无菌状态或无外源性污染物。饲养SPF、无菌动物、悉生动物或进行同级动物实验的场所;要求人不能与动物直接接触;进入的物品必须包装消毒后经灭菌渡舱或传递舱移入;隔离器的正压要求达到不低于50Pa。19、GB14925空气洁净度洁净度0.5um(pc/m3)1um(pc/m3)5um(pc

33、/m3)5级(352,3520(83,832297级(35200,352000(8320,83200(293,29308级(352000,3520000(83200,832000(2930,2930020、实验动物的营养素能够在动物体内被消化吸收,具有供能或构成体组织或调节生理功能等作用的物质。1) 蛋白质:由氨基酸组成的大分子物质(粗蛋白:饲料中含氮物质的总称)对动物的营养作用包括:蛋白质是动物维持生命、生长和繁殖不可缺少的物质;蛋白质是构成体组织、体细胞的基本原料;蛋白质是修补体组织的必需物质;蛋白质组成酶和激素参与并调节机体内的代谢过程;蛋白质还可代替碳水化合物及脂肪提供能量;是乳、肉、

34、蛋、皮、毛等一切动物产品的原料;几个基本概念必需氨基酸:在动物体内不能合成或合成速度及数量不能满足正常生长的需要,必须由饲料来供给的氨基酸(K、W、T、V、H、R、L、I、M、F)。非必需氨基酸:在动物体内合成较多或需要较少,不需要由饲料来供给,亦能满足动物的正常的需要。限制性氨基酸:食物中氨基酸的含量和比例相对机体的需要不足。氨基酸的互补作用 :由于动物体内的蛋白质、氨基酸与饲料的组成不完全一致,单独使用某一种饲料就不能满足动物合成蛋白质的需要,通常使用两种以上的饲料,其氨基酸可以得到相互补充,取长补短,有效地利用氨基酸。饲料中蛋白质对实验动物的影响:含量不足或某些必需氨基酸缺乏或比例不当:

35、动物生长发育缓慢、抵抗力下降,体重减轻,并出现贫血、低蛋白血症等,长期缺乏可导致水肿,并影响生殖。 含量过高:引起代谢紊乱,甚至出现酸中毒2) 脂类:脂肪、磷脂、胆固醇(粗脂肪:能溶解在有机溶剂中的物质,包括真脂肪、有机酸、类脂、叶绿素、胡萝卜素等)对动物的营养作用包括:是动物体组织的重要组成成分;是重要的能量来源;提供必需脂肪酸(植物油脂中所含的三种多不饱和脂肪酸:亚麻酸、亚油酸和花生四烯酸);是脂溶性维生素的溶剂;具有保温和保护脏器的作用。饲料脂肪含量对动物的影响:必需脂肪酸缺乏可引起严重的消化系统和中枢神经系统功能障碍;过多使动物肥胖而影响健康,并且不利于实验研究。3) 碳水化合物:可溶

36、性:单糖、双糖、多糖(淀粉)粗纤维(膳食纤维):指植物性饲料中那些对水、稀酸、稀碱难溶解的物质,如纤维素、半纤维素等,是植物细胞壁的主要成分营养作用包括:动物能量的主要来源;合成脂肪和非必需氨基酸;为泌乳动物合成乳糖及乳脂提供原料;构成细胞的基本成分;促进肠道蠕动4) 矿物质(粗灰分):饲料燃烧后的剩余成分,主要是一些无机化合物 常量元素钙、磷、钾、钠、氯、镁、硫; 微量元素铁、锌、铜、锰、碘、钴、钼、硒对动物的作用:机体重要的结构物质;维持机体渗透压平衡;调节酸碱平衡;保持神经、肌肉的兴奋性。矿物质不足的影响:机体自身不能合成,必须由饲料提供,若不足将会影响动物的生长发育,甚至导致动物的死亡

37、。5) 维生素:机体维持正常功能所必需的,但在体内不能合成或合成量少,必须由食物供给的一组低分子有机物质。脂溶性维生素:A、D、E、K; 水溶性维生素:B1、B2、B6、B12、C、PP、泛酸、生物素、叶酸、硫辛酸作用:参与骨骼的形成(A、B1、D);防止出血(K);防止贫血(A、B12、D);刺激正常的繁殖(E、A、C);维持神经系统的机能(A、B族维生素);提高预防疾病的能力(A、B1)。6) 水:水是动物必需的营养成分,动物机体内水分含量可达45-80%。 动物体所需要的水分主要来源于饮水、饲料水和动物自身的代谢水作用:重要的溶剂;调节体温;润滑剂;调节渗透压水分缺乏对动物的影响:生长发

38、育:幼龄动物生长发育减慢,哺乳动物泌乳减少;食欲下降,导致食欲废绝,消化机能下降;免疫力和抗病力显著减弱。21、实验动物的营养需要:实验动物对蛋白质、碳水化合物、脂类、矿物质、维生素、水等营养物质的日平均需要量。不同动物的解剖生理特性不同,摄食习性也有所差异,可分为草食性、肉食性和杂食性三类维持需要:是指健康动物体重不增不减,不进行生产,体内各种营养处于平衡状态时对营养素的需要量。即维持动物正常体温、呼吸、 心跳等基本生命活动的营养需要。生长需要:动物进行物质积累,细胞数量增多和组织器官体积增大,从而使动物的体积和重量增加过程中对于营养物质的需要量。繁殖需要:能够满足动物母体自身的营养需要和为

39、胎儿生长发育与哺乳提供各种优质、充足的营养物质。22、 饲料中必需氨基酸的种类: 缬氨酸、赖氨酸、异亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、色氨酸、苏氨酸、酪氨酸、胱氨酸、精氨酸、组氨酸23、大鼠、小鼠、豚鼠、家兔生物学特性和应用家兔的主要生物学特性及其选择应用主要生物学特性应用繁殖力高、抗病力强、较温驯、易饲养耳静脉便于注射给药及采血应用广泛:急性实验、内分泌实验、物质代谢研究、遗传学研究、药理学实验等体温调节稳定、反应灵敏解热药的研究、注射液的热原检查、研究环境因素引起体温过高或过低的反应典型的刺激性排卵动物避孕药研究中观察药物对排卵的影响胸腔解剖特殊,开胸和打开心包胸膜暴露心脏时,只要不弄破纵

40、膈膜,动物不需做人工呼吸开胸及心脏实验心脏在离体条件下仍可搏动很久观察药物对心脏的直接作用颈部的交感神经、迷走神经和主动脉减压神经独立行走观察减压神经对心脏的影响注射四氧嘧啶可形成持续性高血糖复制糖尿病模型食用高胆固醇、高脂肪饲料后易形成动脉粥样硬化病变复制动脉粥样硬化及高脂血症模型对日本血吸虫易感复制日本血吸虫病模型皮肤对刺激物的反应接近于人观察毒物对皮肤的局部作用洋地黄、乌头碱可诱发心律失常复制性心律失常眼球大,便于手术操作和观察复制眼科动物模型呕吐反应不敏感、缺乏咳嗽反射、对射线十分敏感,照射后常发生休克样反应不适于观察致呕吐、致咳嗽和放射病的实验研究小鼠解剖生理学特点和生物学特性 小鼠

41、外观:嘴尖、头呈锥体形,嘴脸前部两侧共有19根胡须。尾约与体长相等(散热、平衡、防御),尾部有短毛和环状角质鳞片(尾有4条血管)。 下颌骨和牙齿:下颌骨喙状突较小,髁状突发达,形态有品系特征,遗传力较高(可判断品系)。上下颌各有两个门齿和六个臼齿,齿式为:1003/1003=16。门齿终身不断生长,需要不断啃咬有一定硬度的食物,以磨损门齿维持适当的长度。 内部脏器:食道细长,约为2cm;胃容量小(1.0-1.5ml),胃分为前胃和腺胃(不会呕吐);肠道较短(不耐饥饿),盲肠不发达。 有胆囊;胰腺分散在十二指肠,胃底及脾门处,似脂肪组织。(脾脏,雄鼠大于雌鼠50%) 没有腭或咽扁桃体。 心脏由左

42、、右心房和左、右心室组成。心尖位于近胸骨端第4肋间,此处为小鼠心脏采血的进针部位。 雌性子宫呈“Y”字型,卵巢有系膜包绕不与腹腔相通,故无宫外孕。 乳腺发达,胸部3对、鼠鼷部2对乳头。 雄性为双睾丸,幼年时藏于腹腔内,性成熟后下降至阴囊。前列腺分背、腹两叶。 生长发育:成熟早,繁殖力强,便于提供同胎和不同品系动物。 小鼠多为发情动物,6-7周性成熟(35-40日龄,45-60日龄),妊娠期19-21d,哺乳期20-22d。性周期4-5d。每胎产仔6-15只,年产仔胎数6-9胎;出生时仅1.5g左右,生后1-2h可吃奶,3d脐带脱落,皮肤变为白色,开始长毛,3周后可独立生活断奶。(新生小鼠无毛,

43、全身通红。夜间分娩,4分钟1个) 雌鼠交配后2-4h在阴道口形成一个白色的阴道栓,防止精子倒流,可提高受孕率,阴道栓常作为受孕成功的标志,依次计算交配日期。 生活习性:体型小,易于饲养管理。饲料消耗量少,饲养条件简单,饲养占地小。成熟体重18-25g,20-40g(哺乳一月后可达12-15g),哺乳饲养1.5-2月可达20g以上,体重增长的快慢与品系、营养状态等有密切关系,一般以其体重判断周龄。(表格见书P25作了解)性情温顺,易抓拿;对外来刺激及为敏感;喜居于较暗的安静环境,昼伏夜动,喜欢啃咬,喜食香脆、有一定硬度的食物。 胆小怕惊。体小娇嫩,不耐饥渴,不耐冷热,对环境的适应性差。 对饮水量

44、不足更为敏感,饮水量4-7ml/d,食量4-8g/d。气管及支气管腺不发达,无咳嗽反射。 无呕吐反应;缺乏汗腺,体温调节不稳定。 不易形成动脉粥样硬化病变。营养对蛋白质的要求较其他动物高,应高于20%比例,对VE缺乏敏感,可影响受孕,可体内自身合成VC。(喜群居) 常用生理生化指标:详见书,不考这条。P26大鼠解剖生理学特点和生物学特性大鼠外观:与小鼠相似,个体较大,成年体长18-20cm,尾上有短毛和角质鳞片,数量多于200片。下颌骨和牙齿:大鼠上下颌各有2个门齿和6个臼齿,门齿终生不断生长,需不断啃咬磨损维持恒定。齿式为1003/1003=16。内部脏器:无扁桃体;味觉不发达;无胆囊,来自各叶的胆管形成胆总管。食道长约4-5cm;不会呕吐,胃分为前胃(非腺胃)和胃体(腺胃),由界限嵴隔开,食管通过界限嵴的1个褶进入胃小弯。胃容量约为4-7ml。 肝有六叶(中叶、右叶、左外叶、左中叶、尾状叶和乳突叶),再生能力强,切除60%-70%仍有再生能力。 肺结构特别,左肺为1个大叶,右肺分为4叶(前、中、副、后叶)。 长骨长期有骨骺线存在,不骨化。 肠道较短,盲肠较大,盲肠功能不发达。 垂体位于视交叉之后,较脆弱地附着在漏斗的下部,不需要很大吸力就可除去而不破坏鞍膈和脑膜,适于做去 垂体模型。 双子宫,呈“Y”形。 胸部和鼠蹊部各有3对乳头。 胰腺很分散,位于胃和十

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