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1、会计学1生物生物(shngw)DNA重组技术的基本工具重组技术的基本工具第一页，共46页。每每100kg 猪或牛的胰腺猪或牛的胰腺(yxin)中仅可提取中仅可提取45g。1979年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌年，美国将人的胰岛素基因重组到大肠杆菌(d chn n jn)内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了内，实现了细菌生产胰岛素，大大降低了生产成本。生产成本。 据WTO调查： 2005年全世界约有糖尿病患者1.8亿人，我国约6000万。第1页/共46页第二页，共46页。第2页/共46页第三页，共46页。第3页/共46页第四页，共46页。苏云金芽孢杆菌苏云金芽孢杆菌普通棉花抗虫棉普通棉花
2、抗虫棉第4页/共46页第五页，共46页。第5页/共46页第六页，共46页。第6页/共46页第七页，共46页。第7页/共46页第八页，共46页。第8页/共46页第九页，共46页。第9页/共46页第十页，共46页。粘质沙雷氏杆菌粘质沙雷氏杆菌(gnjn)（Serratia marcesens）练习：流感嗜血杆菌的练习：流感嗜血杆菌的d d菌株菌株( ( Haemophilus influenzae d )Haemophilus influenzae d )中先后分离到中先后分离到3 3种限制酶，则分别种限制酶，则分别命名为命名为: :Hind、Hind和和Hind第10页/共46页第十一页，共46
3、页。 T12345 A12345HHHHHO T12345 A12345HHHHOH2O +第11页/共46页第十二页，共46页。O第12页/共46页第十三页，共46页。限制酶DNA解旋酶区别切割特定切割特定(tdng)(tdng)的核苷酸的核苷酸序列的磷酸二酯键序列的磷酸二酯键将将DNADNA两条链的氢键两条链的氢键(qn jin)(qn jin)打开形成打开形成两条单链两条单链限制酶DNA水解酶区别切割特定的核苷酸序列切割特定的核苷酸序列的磷酸二酯键，形成片的磷酸二酯键，形成片段的段的DNA.DNA.切割磷酸二酯键，形成切割磷酸二酯键，形成单个的脱氧核苷酸。单个的脱氧核苷酸。第13页/共4
4、6页第十四页，共46页。能被限制性内切酶特能被限制性内切酶特异性识别的切割部位异性识别的切割部位都具有回文序列：都具有回文序列：在切割部位，一条链在切割部位，一条链正向正向(zhn(zhn xinxin) )读的碱基顺读的碱基顺序与另一条链反向读序与另一条链反向读的顺序完全一致。的顺序完全一致。第14页/共46页第十五页，共46页。黏性末端黏性末端(m dun)(m dun)黏性末端黏性末端(m dun)第15页/共46页第十六页，共46页。黏性末端黏性末端(m (m dun)dun)黏性末端黏性末端(m dun)第16页/共46页第十七页，共46页。第17页/共46页第十八页，共46页。平末
5、端平末端(m dun)平末端平末端(m dun)第18页/共46页第十九页，共46页。第19页/共46页第二十页，共46页。同一种同一种第20页/共46页第二十一页，共46页。DNADNA聚合酶聚合酶DNADNA连接酶连接酶区别区别1 1区别区别2 2相同点相同点1)1)只能将单个核苷酸连只能将单个核苷酸连接接(linji)(linji)到已有的核到已有的核酸片段上，形成磷酸二酸片段上，形成磷酸二酯键酯键形成形成磷酸二酯键磷酸二酯键1)1)在在两个两个DNADNA片段之间片段之间形成磷酸二酯键形成磷酸二酯键2)2)以以一条一条DNADNA链为模板链为模板，连接成一条互补连接成一条互补的的DNA
6、DNA链链2)2)将将DNADNA双链上的双链上的两两个缺口同时连接个缺口同时连接起来起来，不需要模板不需要模板第21页/共46页第二十二页，共46页。第22页/共46页第二十三页，共46页。第23页/共46页第二十四页，共46页。催化磷酸二酯键形成催化磷酸二酯键形成第24页/共46页第二十五页，共46页。类型第25页/共46页第二十六页，共46页。xi)动植物病毒假如目的(md)基因导入受体细胞后不能复制或不能转录，转基因生物能有预想的效果吗？作为分子运输车载体，如果没有切割位点将会怎样？霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分霍乱菌的质粒多个限制酶切点，你会用它来做分子运输车吗？子运输车
7、吗？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？目的基因有没有进入受体细胞，如何去发现？ 第26页/共46页第二十七页，共46页。第27页/共46页第二十八页，共46页。第28页/共46页第二十九页，共46页。第29页/共46页第三十页，共46页。第30页/共46页第三十一页，共46页。第31页/共46页第三十二页，共46页。第32页/共46页第三十三页，共46页。A课堂练习课堂练习第33页/共46页第三十四页，共46页。课堂练习课堂练习第34页/共46页第三十五页，共46页。课堂练习课堂练习第35页/共46页第三十六页，共46页。下课了!第36页/共46页第三十七页，共46页。第37页/共46页第三十八页，共46页。第38页/共46页第三十九页，共46页。第39页/共46页第四十页，共46页。第40页/共46页第四十一页，共46页。论论第41页/共46页第四十二页，共46页。第42页/共46页第四十三页，共46页。第43页/共46页第四十四页，共46页。第44页/共46页第四十五页，共46页。第45页/共46页第四十六页，共46页。