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1、实验一实验一 鱼类急性毒性实验鱼类急性毒性实验实验目的掌握鱼类急性毒性实验的原理和操作掌握半致死浓度的计算方法（直线内插法）实验原理 鱼类对水环境的变化十分灵敏，运用毒理实验方法，观察鱼类在含有化学污染物的水环境中的反应，可以比较不同化学物质的毒性高低。 鱼类毒性实验方法可分为静态方法和动态方法两大类。静态实验方法操作简单，动态实验方法要求具备一定的设备。 本实验介绍静态实验方法。实验器材、试剂、实验动物 玻璃缸或搪瓷桶 有机磷农药、重金属盐 金鱼 实验步骤预备实验：参考有关资料初步估计34个浓度，每个浓度用34尾鱼，观察2448h。 找出引起实验鱼全部死亡和不引起实验鱼死亡的浓度；同时还要做
2、一些化学测定。正式实验：根据预备实验得到的浓度范围，按等比级数插入35个中间浓度。表表8-1 选择实验浓度的参考数据选择实验浓度的参考数据（根据0.1对数间距）浓浓 度度浓浓 度度对对 数数一一二二10.01.007.940.906.310.805.010.703.980.603.160.502.510.401.990.301.580.201.260.101.000.00实验要求 实验中至少选择5个不同浓度，一般以7个浓度较常用，但所选择的浓度应包括有使实验鱼在24h内死亡的浓度，以及96h内不发生中毒的浓度。表中第1纵行包括的浓度最常用。 实验中无论采用何种分组方法，都必须同时设对照组。 结
3、果的观察正式实验至少进行48h，一般是96h。实验开始后，观察并记录8h、 24h、48h和96h各组鱼的死亡数。实验过程有特殊变化应随时记录。死亡鱼必须移出实验缸，以免影响水质。鱼死亡的判断方法：是当鱼中毒停止呼吸以后，用小镊子夹鱼尾柄部，5min内不出现反应可判定为死亡。半致死浓度的计算 直线内插法是图解计算LC50、TLm、EC50的简便方法。 直线内插法，是根据两个或多个试验浓度组的动物死亡百分数作一浓度死亡反应线，内插所要求的一个数值。因此，用直线内插法求半数致死浓度时，在试验设置的浓度组中必须至少存在这样两个浓度：一个要能引起50%以上的试验动物死亡，另一个出现的死亡率则要低于50
4、%。直线内插法的具体作法 用直线内插法求LC50时，在半对数坐标纸上，以对数轴表示试验溶液的浓度，算术坐标表示试验动物的死亡百分数，绘出与试验所得数据相应的各点。将死亡率50%上下的两点做一直线，再自所作直线与50%死亡线的交点作一垂直于纵轴的垂线，该垂线与纵轴的交点即为所求的半致死浓度。如无半对数纸，也可用方格纸代替，但应先将浓度作对数转换，然后以纵轴表示之。垂线与纵轴的交点为LC50的对数，故需查反对数表才得半致死浓度。实验注意事项 先配制高浓度的储备液，实验时稀释所需浓度的使用液。 先把药液与水均匀混合后，再放入实验鱼，以免实验鱼接触到不均匀的高浓度药液而造成提前死亡。 实验水的温度、pH值（6.78.5）、溶解氧（ 4.0mg/L）、硬度和水量（ 0.5 L/克鱼）的合理与否，对实验结果影响较大。 在同一实验中要求实验鱼同属、同种、同龄。鱼的平均体长7cm以下，身宽3cm以下较合适。每个实验浓度可用鱼1020尾。 实验鱼必须健康，实验前在类似实验条件下驯养一周以上，驯养期间每天投饵一次。每天换水12次。 驯养缸中鱼最好不出现死亡，即使有死亡，也不得超过10%。