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1、精品名师归纳总结选修 1 基础学问点背诵果酒和果醋和制作一、果酒制作1. 原理:菌种,属于核生物,新陈代谢类型,有氧时,呼吸的反应式为:。 无 氧时,呼吸的反应式为:。2. 条件:繁衍最适温度,酒精发酵一般掌握在。(传统发酵技术所使用的酵母菌的来源)可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结3. 菌种来源:自然发酵:附着于葡萄皮上的野生型酵母菌 。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结人工培育:分别获得得纯洁的酵母菌菌种 。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结现在工厂化生产果酒,为提高果酒的品质,更好的抑制其它微生物的生长,实行的措施是。4. 试验设计流程图5. 依
2、据教材 P4 操作提示设计试验步骤及装置。充 气 口 作 用。排 气 口 作用。出料口作用。排 气 口 要 通 过 一 个 长 而 弯 曲 的 胶 管 与 瓶 身 连 接 , 其 目 的是。使用该装置制酒时,应当关闭。制醋时,应将充气口。6. 试验结果分析与评判:可通过嗅觉和品尝初步鉴定,并用 检验酒精存在。可观看到的现象为二、果醋的制作:1. 原理:菌种:,属于核生物, 新陈代谢类为 醋酸生成反应式是。2. 条件:最适合温度为 ,需要充分的。3. 菌种来源:到或购买。4. 设计试验流程及操作步骤:果酒制成以后,在发酵液中加入 或醋曲,然后将装置转移至0C 条件下发酵, 适时向发酵液中。假如没
3、有充气装置,可以将瓶盖打开,在瓶盖上纱布,以削减空气中尘土污染。三、操作过程应留意的问题( 1)为防止发酵液被污染,发酵瓶要用消毒。( 2)葡萄汁装入发酵瓶时,要留出大约的空间。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结( 3)制作葡萄酒时将温度严格掌握在,时间掌握在d左右,可通过对发酵的情形进行准时的监测。( 4)制葡萄醋的过程中,将温度严格掌握在,时间掌握在d,并留意适时在充气。【疑难点拨 】1、 认为应当先冲洗葡萄仍是先除去枝梗?为什么?应当先冲洗,然后再除去枝梗,以防止除去枝梗时引起葡萄破旧,增加被杂菌污染的机会。2、 认为应当从哪些方面防止发酵液被污染?需要从发酵制作的过程进行
4、全面的考虑,由于操作的每一步都可能混入杂菌。例如: 榨汁机、发酵装置要清洗洁净。每次排气时只需拧松瓶盖、不要完全掀开瓶盖等。3. 制葡萄酒时,为什么要将温度掌握在18 25 ?制葡萄醋时,为什么要将温度掌握在30 35 ?答:温度是酵母菌生长和发酵的重要条件。20 左右最适合酵母菌繁衍。因此需要将温度掌握在其最适温度范畴内。而醋酸菌是嗜温菌,最适生长温度为3035 ,因此要将温度掌握在 30 35 。4. 制葡萄醋时,为什么要适时通过充气口充气?答:醋酸菌是好氧菌,在将酒精变为醋酸时需要氧的参加,因此要适时向发酵液中充气。腐乳的制作一、腐乳制作的原理1腐乳的发酵有多种微生物的协同作用,如、等,
5、其中起主要作用的是。它是一种丝状,常见于、上。新陈代谢类型是。2等微生物产生的蛋白酶可以将豆腐中的分解 成小分子的和。脂肪酶可以将水解成和。3现代的腐乳生产是在严格的 接种在豆腐上,这样可以防止条件下,将优良,保证菌种 直 接。二、腐乳制作的试验流程:让豆腐长出毛霉密封腌制。三、试验材料含水量 70% 的豆腐,粽叶,盘子,盐,黄酒,米酒,糖,香辛料等,广口玻璃瓶,高压锅。四、试验步骤1. 将豆腐切实 3cm 3cm 1cm 如干块2. 豆腐块放在铺有干粽叶的盘内,每块豆腐等距离排放,豆腐上再铺洁净粽叶,再用保鲜膜包裹。3. 将平盘放在温度为的的方,毛霉逐步生长,大约5d 后,豆腐表面丛生直立菌
6、丝。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结4. 当毛霉生长旺盛, 呈淡黄色时, 去除保鲜膜及粽叶, 散热及水分, 同时散去霉味约 36h。5. 豆腐凉透后,将豆腐间的菌丝拉断,整齐排在容器内,预备腌制。6. 长满毛霉的豆腐块(以下称毛坯)分层摆放,分层加盐,并随层高而增加,在瓶口表面铺盐,以防止,约腌制 8d。7将黄酒、米酒和糖、香辛料等混合制成卤汤。卤汤酒精含量掌握在为宜。8广口玻璃瓶刷洗洁净,用高压锅在1000C 蒸汽灭菌 30min ,将腐乳成坯摆入瓶中,加入卤汤和辅料后,将瓶口用酒精灯加热灭菌,用胶条密封,常温下,六个月即可以成熟。【疑难点拨】1. 王致和为什么要撒很多盐,将
7、长毛的豆腐腌起来?盐在该过程中起什么作用? 盐能防止杂菌污染,防止豆腐腐败。盐能抑制多种微生物的生长。2. 配制卤汤时,一般将酒精含量掌握在12%左右,过高过低都不行,为什么? 酒精含量的高低与腐乳后期发酵时间的长短有很大关系。酒精含量越高,对蛋白酶的抑制作用也越大,使腐乳成熟期延长。酒精含量过低,蛋白酶的活性高,加快蛋白质的水解,杂菌繁衍快,豆腐易腐败,难以成块。3. 豆腐坯用食盐腌制,其作用是什么?渗透盐分,析出水分给腐乳以必要的咸味防止毛霉连续生长和污染的杂菌繁衍浸提毛霉菌丝上的蛋白酶4. 腐乳在酿造后期发酵中添加多量酒液的目的是什么?防止杂菌污染以防腐与有机酸结合形成酯,由于酒中特殊是
8、黄酒中含有酵母茼,经发酵可产生醇,并与有机酸结合形成酯,给予腐乳风味利于后期发酵5. 卤汤中香辛料的作用是什么?调味促进发酵杀菌防腐说明:(香辛料如花椒、大蒜、茴香中含有花椒酰胺、蒜辣素、茴香醚及茴香醛等,有极强的杀菌力。又有良好的调味功能。香辛料成分参加发酵过程,合成复杂的酯类,使腐乳形成特有色、香、味。 )6. 你能利用所学的生物学学问,说明豆腐长白毛是怎么一回事?答:豆腐上生长的白毛是毛霉的白色菌丝。严格的说是直立菌丝,在豆腐中仍有匍匐菌丝。7. 我们平常吃的豆腐,哪种适合用来做腐乳?答:含水量为70%左右的豆腐适于作腐乳。用含水量过高的豆腐制腐乳,不易成形。8. 吃腐乳时,你会发觉腐乳
9、外部有一层致密的“皮”。这层“皮”是怎样形成的了?它对人体有害吗?它的作用是什么?答:“皮”是前期发酵时在豆腐表面上生长的菌丝(匍匐菌丝) ,它能形成腐乳的 “体”,使腐乳成形。“皮”对人体无害。探讨加酶洗衣粉的洗涤成效一、基础学问可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结3在本课题中,我们主要探究有关加酶洗衣粉的三个问题:一是一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的成效有什么不同。二是在什么温度下使用加酶洗衣粉最好,三是的洗衣粉,其洗剂成效有哪些区分。二、试验操作1. 探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤成效( 1)试验遵循的原就:试验变量为洗涤剂,设计时应遵循原就、 原就,有效的掌握
10、其他变量,如水的用量、污染物的量、所用试验用布的质的大小、两种洗衣粉的用量,搅拌及洗涤时间。( 2)试验过程取两只大烧杯并,用量筒分别量 500mL 蒸馏水放入其中,放入400C 的水浴锅保温。将制好的污染布和洗衣粉(一组为和,另一组为和)分别放入两只烧杯中。用玻璃棒同时充分搅拌时间,一段时间后搅拌可重复进行。过相同的时间后观看洗涤成效,探究加酶洗衣粉使用时的最适温度。2. 不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤成效( 1)试验原理:不同种类的加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有,所以对不同污渍的洗涤成效不同。( 2)试验过程:依据表格设计试验步骤污渍洗涤成效类型蛋白酶脂肪酶淀粉酶复合酶一般洗衣酶1鸡
11、血2牛奶3菜油4番茄汁5墨水6染料编号【疑难点拨】1. 一般洗衣粉中包含哪些化学成分?提示:一般洗衣粉中通常包含有:表面活性剂、水软化剂、碱剂、漂白剂等成分,有的洗衣粉中仍含有增白剂、香精和色素,以及填充剂等。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结2. 在本课题中你准备使用什么方法和标准判定洗涤成效?提示:可在洗涤后比较污物的残留状况,如:已消逝、颜色变浅、面积缩小等,3. 含有蛋白酶的洗衣粉的洗剂成效好,可以用丝绸作为试验材料吗?不能。由于丝绸的主要成分是蛋白质,它会被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,损坏衣物。【典例解析】以下不属于酶制剂的是A 蛋白酶B脂肪酶C淀粉酶D 麦芽糖酶解析:目
12、前常用的酶制剂有四大类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中,应用最广泛、成效最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更强的去污才能。酵母细胞的固定化一、基础学问酶:优点:催化效率高,低耗能、低污染,大规模的应用于食品、化工等各个领域。实际问题:对环境条件敏锐,易失活。溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本。反应后的酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量。设想:固定化酶:优点实际问题:一种酶只能催化
13、一种化学反应,而在生产实践中,很多产物的形成都是通过一系列的酶促反应才能得到的设想: 固定化细胞:优点二、固定化酶的应用实例高果糖浆是指能将葡萄糖转化为果糖的酶是。使用固定化酶技术,将这种酶固定在一种上,再将这些酶颗粒装到一个反应柱内,柱子底端装上分布着很多小孔的。酶颗粒无法通过筛板的小孔,而反应溶液却可以自由出入。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过反应柱,与接触, 转化成果糖, 从反应柱的下端流出。 反应柱能连续使用半年, 大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。三、固定化细胞技术固定化酶和固定化细胞是利用或方法将酶或细胞固定在肯定空间内的技术,包括、和法。一般
14、来说,酶更适合采纳和法固定,而细胞多采纳法固定化。这是由于细胞个大,而酶分子很小。个大的细胞难以被或,而个小的酶容可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结易从中漏出。包埋法法固定化细胞即将微生物细胞包埋在不溶于水的中。常用的载体有、和等。四、试验操作 一 制备固定化酵母细胞制备固定化酵母细胞需要的材料是、和1. 酵母菌的活化活化就是处于状态的微生物重新复原正常的生活状态。2. 配制物质的量尝试为0.05mol/L 的 CaCl 2 溶液3. 配制海藻酸钠溶液加热溶化海藻酸钠时要留意:4. 海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合5. 固定化酵母细胞以恒定的速度缓慢的将注射器中的溶液滴加到配制好的溶
15、液中, 并浸泡时间 。 二 用固定化酵母细胞发酵1. 将固定好的酵母细胞用冲洗 2-3 次。2. 发酵时的温度就为,时间。五、结果分析与评判(一)观看凝胶珠的颜色和外形假如制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色, 说明。 假如形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,就说明,制作失败,需要再作尝试。(二)观看发酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了很多,同时会闻到补充:直接使用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点:类型优点不足对环境条件特别敏锐,简单失活。溶液中的酶很难可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结直接使用酶催化效率高,低耗能、低污染等。酶既能与反应物接触,又能与产物分回收,
16、不能被再次利用,提高了生产成本。反应后酶会混在产物中,可能影响产品质量。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结固定化酶离,同时,固定在载体上的酶仍可以被反复利用。很多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。固定后的酶或细胞与反应物不简单接近,可能导致可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结固定化细胞成本低,操作更简单。反应成效下降等。【疑难点拨】1. 细胞的活化。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结提示: 在缺水的状态下,微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微 生物重新复原正常的生活状态。酵母细胞所需要的活
17、化时间较短, 一般需要 0.5 1 小时。2. 如何检验凝胶珠的质量是否合格。提示: 检验凝胶珠的质量是否合格,可以采纳以下方法。一是用 镊子夹起一个凝胶珠放在试验桌 上用手挤压, 假如凝胶珠不破裂, 没有液体流出,就说明凝胶珠的 制作胜利。二是在试验桌上用力 摔打凝胶珠,假如凝胶珠很简单 弹起,也说明制备的凝胶珠是成 功的。3. 酶和细胞分别适应哪种固定方法?提示: 一般来说,酶更适合采纳化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。这是由于细胞个大,而酶分子很小。个大的难以被吸附或结合,而 个小的酶简单从包埋材料中漏出。【典例解析】酶和细胞分别适应哪种固定方法?提示:一般来说,酶更适
18、合采纳化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。这是由于细胞个大,而酶分子很小。个大的难以被吸附或结合,而个小的酶简单从包埋材料中漏出。DNA 的粗提取与鉴定一、提取 DNA的方法提取生物大分子的基本思路是。对于 DNA 的粗提取而言, 就是要利用、等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA ,去除其他成分。1) DNA的溶解性DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的中溶解度不可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结同,利用这一特点,挑选适当的盐浓度就能使充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的。此外, DNA 不溶于溶液,但是细胞中的某些蛋白质就溶于酒精。利用这一原理,
19、可以将 DNA 与蛋白质进一步的分别。2) DNA 对酶、高温顺洗涤剂的耐受性蛋白酶能水解,但是对没有影响。大多数蛋白质不能忍耐60 80oC 的高温,而 DNA 在以上才会变性。洗涤剂能够瓦解,但对 DNA 没有影响。3) DNA 的鉴定在条件下, DNA 遇会被染成色, 因此二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。二、试验设计1 ) 实 验 材 料 的 选 取凡 是 含 有的 生 物 材 料 都 可 以 考 虑 , 但 是 使 用的生物组织,胜利的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的试验材料:鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜) 、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培育基的
20、大肠杆菌2)破裂细胞,猎取含DNA的滤液动物细胞的破裂比较简单,以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入肯定量的,同时用搅拌,过滤后收集滤液即可。假如试验材料是植物细胞,需要先用溶解细胞膜。例如,提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入肯定的和,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。3) 去除滤液中的杂质4) DNA 的析出与鉴定将处理后的溶液过滤 ,加入与滤液体积、冷却的 ,静置 ,溶液中会显现,这就是粗提取的 DNA 。用玻璃棒搅拌,卷起丝状物, 并用滤纸吸取上面的水分。取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为的 NaCl 溶液 5ml ,将丝状物放入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物
21、溶解。然后,向两支试管中各加入 4ml 的。混合匀称后,将试管置于中加热 5min ,待试管冷却后,比较两支试管溶液颜色的变化,看看溶解有 DNA 的溶液是否变 。三、操作提示以血液为试验材料时,每100ml 血液中需要加入 3g,防止。加入洗涤剂后,动作要、,否就简单产生大量的泡沫,不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要,以免,导致DNA 分子不能形成絮状沉淀。二苯胺试剂要,否就会影响鉴定的成效。四、结果分析与评判【疑难点拨】1. 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞破裂?可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞
22、内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的破裂 细胞膜和核膜的破裂 ,从而释放出 DNA。2. 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜, 有利于 DNA的释放。食盐的主要成分是NaCl, 有利于 DNA的溶解。3. 假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响?答:研磨不充分会使细胞核内的DNA释放不完全,提取的DNA量变少,影响试验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。 4此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?答:可能含有核蛋白、多糖和RNA等杂质。5为什么反复的溶解与析出答:用高盐浓度的溶液溶解DNA,能够去除杂质?DNA
23、,能除去在高盐中不能溶解的杂质。用低盐浓度使DNA析出, 能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此, 通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与 DNA溶解度不同的多种杂质。6. 方案二与方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的DNA与蛋白质分开。方案三利用的是 DNA和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与DNA分别。7. DNA的溶解度与 NaCl 溶液浓度的关系:当 NaCl 溶液浓度低于 0.14mol/L时,随浓度的上升, DNA的溶解度降低。当NaCl 溶液浓度高于 0.14mol/L时,随浓度上升,DNA的溶解度上升。8. 制备鸡血细胞液时,要在新奇
24、的鸡血中加入柠檬酸钠的缘由制备鸡血细胞液时,要在新奇的鸡血中加入抗凝剂柠檬酸钠,防止血液凝固。其原理2+2+是柠檬酸钠能与血浆中Ca 发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca 大大削减,血液便不会凝固,由于鸡血红细胞,白细胞都有细胞核,DNA主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上层清液血浆。9. 提取 DNA的第一步是材料的选取,其目的是肯定要选取DNA含量较高的生物材料,否就会由于试验过程中或多或少的缺失而造成检测的困难。其次步是DNA的释放和溶解,这一步是试验胜利与否的关键,要尽可能使细胞内的DNA全部溶解。第三步是DNA的纯化, 即依据 DNA的溶解特性、对酶及高温的
25、耐受性的不同等特性,最大限度的将DNA与杂质分开。最终一步是对DNA进行鉴定,这是对整个试验的结果的检测。10. 在 DNA的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时,留意动作要轻缓,以免加剧DNA分子的断裂,导致 DNA分子不能形成絮状沉淀。11. 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破裂以后释放出的DNA,简单被玻璃容器吸附,由于细胞内DNA的含量原来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的 DNA就会更少。因此,试验过程中最好使用塑料的烧杯和试管,这样可以削减提取过程的 DNA的缺失。典例解析 本试验中有三次过滤:可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结过滤用蒸馏水稀释过的鸡血
26、细胞液过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液过滤溶解有 DNA 的 2mol/LNaCl溶液以上三次过滤分别为了获得()A 含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA 的滤液B 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、含 DNA 的滤液C 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、纱布上的 DNA D 含较纯的 DNA 滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液答案: A解析 :用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜破裂,释放出核物质,此时过滤只能得到含 DNA和其他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必需经过试验中其他步骤得相继处理,方能得到较纯的DNA 。DNA 在 0.13mol/LNa
27、Cl溶液中溶解度最低,成丝状粘稠物, 可经过滤留在纱布上。血红蛋白的提取和分别基础学问1. 凝胶色谱法凝胶色谱法也称做,是依据分别蛋白质的有效方法。凝胶实际上是一些由构成的多孔球体,在小球体内部有很多贯穿的通 道,相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同,相对分子质量较小的蛋白质进入凝胶内部的通道,路程,移动速度。而相对分子质量的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在移动,路程,移动速度。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。2. 缓冲溶液缓冲溶液的作用是。缓冲溶液通常由溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各种生物化学 反应都是在肯定的pH 下进行的,例如:血浆的pH 是,要在试验条件
28、下精确模拟生物体内的过程,必需保持体外的pH 与体内的基本一样。3. 电泳电泳是指。很多重要的生物大分子,如多肽、 核酸等都具有可解离的基团,在肯定的 pH 下,这些基团会带上。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷的电极移动。电泳利用了待 分别样品中各分子以及分子本身的、的不同,使带电分 子产生不同的,从而实现样品中各种分子的分别。两种常用的电泳方法是和,在测定蛋白质分子量时通常使用。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率取决于以及等因素。4. 蛋白质的提取和分别蛋白质的提取和分别一般分为四步:、和。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结5. 样品处理血液由和组成,其中红细胞最多
29、。红细胞具有的特点。红细胞中有一种特别重要的蛋白质,其作用是,血红蛋白有个肽链组成,包括,其中每条肽链围绕一个,磁基团可携带。血红蛋白因含有出现红色。红细胞的洗涤洗涤红细胞的目的是,采集的血样要准时采纳分别红细胞,然后用胶头吸管吸出上层透亮的 ,将下层暗红色的倒入烧杯,再加入,缓慢搅拌 ,低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直至,说明红细胞已洗涤洁净。血红蛋白的释放 在和 作用下,红细胞破裂释放出血红蛋白。分别血红蛋白溶液 将搅拌好的混合溶液离心后,试管中的溶液分为 4 层。第一层为无色透亮的,第 2 层为白色薄层固体,是,第 3 层是红色透亮液体,这是,第 4 层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试
30、管中的液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透亮液体。透析取 1mL 的血红蛋白溶液装入中,将透析袋放入盛有300mL 的物质的量的浓度为 20mmol/L 的中,透析 12h。透析可以去除样品中的杂质,或用于更换样品的。6. 凝胶色谱操作第一步要制作,其次步要,由于,所以装柱前需要依据色谱柱的内体积运算所需要的凝胶量。在装填凝胶柱时,不得有存在。由于气泡会,降低分别成效。第三步是。 疑难点拨 1凝胶色谱法分别蛋白质的原理凝胶色谱法也称为安排色谱法,它是依据分子量的大小分别蛋白质的方法之一。所用的凝胶实际上是一些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物
31、构成,小球体内部有很多贯穿的通道,当一个含有各种分子的样品溶液缓慢流经时,各分子在色谱柱内进行两种不同的运动,即垂直向下的运动和无规章的扩散运动,相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过的路程较短,移动速度较快。相对分子质量较小的蛋白质分子比较简单进入凝胶内的通道,通过的路程较长, 移动速度较慢。因此,样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量中等的分子后流出,相对分子质量最小的分子最终流出,这种现象又叫分子筛现象。此外,凝胶本身具有三维网状结构,相对分子质量大的分子通过这种网状结构上的空袭时阻力大,而相对分子质量小的分子通过时阻力小,因此不同分子量的
32、蛋白质分子可以获得分别。 2与其他真核细胞相比,红细胞的特点及这一特点对进行蛋白质的分别的意义哺乳动物及人的成熟的红细胞是双面凹圆饼状,没有细胞核和细胞器。其含有的血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分别时可以通过观看颜色来判定什么时候应当收集脱液。这使血红蛋白的分别过程特别直观,大大简化了试验操作。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结3. 电泳的作用及其原理电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。很多重要的生物大分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团,它们在某个特定的pH 下会带上正电或负电。在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移
33、动。电泳技术就是在电场的作用下,利用待分别样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、外形等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而达到对样品进行分别、鉴定或提纯的目的。4. 你能从凝胶色谱的分别原理分析为什么凝胶的装填要紧密、匀称吗?答:凝胶实际上是一些微小的多孔球体,小球体内部有很多贯穿的通道。相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过的路程较短,移动速度较快。相对分子质量较小的蛋白质分子比较简单进入凝胶内的通道,通过的路程较长, 移动速度较慢。因此,样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量中等的分子后流出,相对分子质量最小的分子最终流出,从而使
34、各种相对分子质量不同的分子得以分别。假如凝胶装填得不够紧密、匀称,就会在色谱柱内形成无效的间隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些间隙中通过,搅乱洗脱液的流淌次序,影响分别的成效。典例解析 用凝胶色谱法分别蛋白质时,分子量大的蛋白质(D) A 路程较长,移动速度较慢B 路程较长,移动速度较快C 路程较短,移动速度较慢D 路程较短,移动速度较快解析:在小球体内部有很多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质简单进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢。而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。经典例题剖析例题
35、 1、关于果酒制作过程中的表达正确选项(B )A 先去烂子粒和枝梗,再用清水冲洗污物B 发酵的温度维护在20最好C 发酵过程中需要适时打开瓶盖放气,以防发酵瓶破裂D 需要不断的充入氧气解析: 为防杂菌污染,烂子粒应当冲洗之前去除,而去枝梗应在冲洗之后。酵母菌酒精发酵需在无氧条件下进行,通气时只能拧松瓶盖不行打开瓶盖。最相宜温度为20。例题 2、关于果醋制作过程中的表达正确选项(C )A 打开发酵瓶是由于全过程需要通入氧气,排出二氧化碳B 醋酸菌在糖源和氧气充分时,能将葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳C 当糖源不足时,醋酸菌可将酒精分解成醋酸D 要使果酒变成果醋只需通入氧气,加入醋酸菌就可以了解析:
36、醋酸菌和酵母菌发酵的区分在于前者需氧,不产生二氧化碳,而且发酵的最适温度也不同。例题 3、腐乳制作过程中影响其风味和品质的因素有哪些?(A )盐的用量 酒的种类和用量发酵温度发酵时间辛香料的用量A B C D解析: 盐、酒、辛香料不仅用来调味,仍可抑菌,防腐乳变质。相宜的盐的用量和酒的浓可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结度仍影响发酵中蛋白酶的作用发挥。发酵时间和温度都会影响腐乳的风味。例题 4、将 10 毫升酵母菌液放在相宜的温度下培育,并且于不同时间内等量匀称取样4次,分别测定样品中酵母菌的数量和PH ,结果如下表。请分析回答:样品酵 母 菌 的 数(个/mm 3)量PH112
37、104.828205.4312103.7410005.0 表中样品取样先后次序是对酵母菌而言, 10 毫升该培育液的环境负荷量为个。如第五次匀称取样时,样品中的酵母菌数量为760(个 /mm3 ),产生这一结果的缘由是。解析 :(1)由于酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸都产生二氧化碳,使发酵液的酸性增强。依据样品 PH 大小,越早取样 PH 越大,由此取样次序为2、4、1、3。( 2)经过培育 10mL 培育液中有菌数 1210 个/mm3,环境负荷量应为1.21 107。( 3)培育液中的养分物质不断被消耗,pH 值减小,部分酵母菌因养分缺乏不适应而死亡并解体。答案:2、4、1、3。 1.21
38、107。培育液中的养分物质不断被消耗,pH 值减小,部分酵母菌因养分缺乏不适应而死亡并解体。例题 5、水果罐头盖上印有“如发觉盖子鼓起,请勿选购”的字样,引起盖子鼓起的最可能缘由是( B )A 、好氧型细菌呼吸,产生 CO2 和 H2O B、酵母菌呼吸,产生 CO 2 和 C2H5OH C、乳酸菌呼吸,产生 CO2 和 C3H 6O3 D、酵母菌呼吸,产生 CO 2 和 H2O解析 罐头是密封、杀菌的,但不排除有微生物的孢子等存活下来,只有进行无氧呼吸的微生物可以生存。罐头鼓胀是过期后微生物生活产气的结果,乳酸菌无氧呼吸产生乳酸, 无气体产生。酵母菌既可以在有氧条件下生活,也可以在无氧条件下发
39、酵产生酒精和二氧化碳。例题 6、有人测定了 A 、B、C、D 四种植物体内多种酶的活性与温度的关系,结果如下图所示。依据图中的信息,你认为在 25 摄氏度条件下,竞争才能最强的生物和对温度适应范畴最广的生物分别是( A )AB 和 DBB 和 CCB 和 ADA 和 C催CD化 100AB效率 50( %)0510152025303540解析 酶活性具有肯定的温度范畴和相宜温度,温度过高酶会失活,低温对酶活性抑制。 在肯定温度下,最相宜该温度的酶活性最强,该生物生活的也最好,竞争力就强。酶有活性的范畴最大,生物的生存温度范畴就越广。可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结例题 7、(
40、05 年杭州高三第一次检测)下图是人体内某个化学反应的示意图,图中代表酶的英文字母是(A )解析 酶是起催化作用的,它在反应前后的性质保持不变,据图可以说明A 所代表的物质是酶。所以在特定条件和肯定的时间内,酶的催化作用可以始终保持。例题 8、( 04 年北京东城区综合检测)试验讨论 pH 对酶活性的影响,预备5 支含有等量胃蛋白酶溶液但pH 各不相同的试管,每支试管加1 块 1 cm3 的正方体凝固蛋白块,试管均置于 25 室温条件下,将各试管蛋白块消逝的时间记录于下表:酶溶液的 pH蛋白块消逝的时间( min )可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结12345( 1)酶活性最强时
41、的pH 是。139114560可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结( 2)蛋白块消逝的时间与酶活性强弱的关系是 。( 3)请以 2 种方法改进试验,使试验在更短的时间内完成。( 4)在人体消化道中,能分泌本试验中酶的部位是 。( 5)为确认蛋白块的消逝是由于酶的作用,仍应对试验进行什么设计 答案 ( 1) 2( 2)酶活性越大,蛋白质分解越快,蛋白块消逝的时间越短( 3)方法:将题给温度由25提高至大约37。方法:将原题中正方体蛋白块处理得更小(如切成0.5 0.5 0.5=0.125 cm 3 ,这相当于消化道内进行的物理性消化( 4)胃(答小肠不给分,因pH 与题意不符)( 5
42、)另增加一个试管,放入等量的蛋白块并将pH 调得适当,但不加酶溶液例题 9、现有相同容积的玻璃缸几只,利用自然的清水、同龄且发育状态相同的小蝌蚪60只、饲喂蝌蚪的饲料、未经处理的具有生物活性的甲状腺激素,并把具有生物活性的甲状腺激素放在 50的温水中处理10 min 。依据这些现有的条件,请你设计一个试验,验证甲状腺激素经过处理以后,是否仍有生物活性。(1) 试验方案的设计第一步,取玻璃缸3 只,分别标记为甲、乙、丙。其次步,。第三步,假如甲缸每天饲喂饲料,丙缸每天饲喂用具有生物活性的甲状腺激素相拌的饲料,就乙缸怎样饲喂.。最终经过肯定时间的饲喂,观看现象,得出结果和结论。(2) 结果分析可编辑资料 - - - 欢迎下载精品名师归纳总结如乙、丙缸的蝌蚪发育同步,快速变态为小青蛙,而甲缸仍是蝌蚪状态,说明如甲、乙缸的蝌蚪发育同步,而丙缸发育变态快速,说明白。如乙缸的蝌蚪发育比甲缸快,比丙缸慢,就说明白。3 该试验设置甲、丙两组试验的目的是。 答案 (1)分别加入等量的清水和 20 只蝌蚪 每天饲喂用经过处理过的甲状腺激素相拌的饲料( 2)甲状腺激素经过 50的温水处理后, 对其生物活性没有影响 甲状腺激素经过 50的温水处理后,完全丢失了生物活性 甲状腺激素经过 50的