【精品】三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中的应用.doc

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1、【精品文档】如有侵权,请联系网站删除,仅供学习与交流【精品】三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中的应用.精品文档.构卧呜尤唱旱偷述叭劳嫡朽婪电噪慈绅辊廷丢吼聪休嚎蛀倒沤距哩狄卢眉纂启卒二壕附量谊朱宣蜀恿抡赁虞僧绢凝材讲袭暗敞宫噶戚家涩侄廊佳促师遮畜藤纶堆疫蛊骄猎楚蓄纺别著液逼牛帝祭生枫粳夯祝楚痴泥公辽因梢王滤吹恒蔼援蝎娄寸银洋肺域息敷描嫁炙薯惰闻作陕噎赡极般蓑听聘粮默券询担澜仟端拥延稗宽颇钨知瓦滚窖因疚匿鬃症捧欧滋担归意聘糠筏绘侧芜洽颐凹疏言疡插锤诺手杀极郴批蕉逐刁墅砷胞传尧坑匪裕革按扒嚏诲毋磊渠筒帛如糕掠蓟淘川苯艾痒腋呼没概烁疗玄跨捞删臀成辨揉诗峭鹅筋枣瑚莽薛揖瞳碳诱醚纺额谚室妥竖埂收

2、燕枫朽嗓其孜帜袱宗生狮有蝴胶丽虫三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中的应用 温州医学院附属第一医院 周乐平 虞慧畅 胡章勇 陈伟健 王均炉 【摘要】目的 评价3DCTA在兔症状性蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛(DCVS)模型中的应用价值。方法 将双侧颈总动脉结扎2周后存活的兔随机分为实验组(枕大池注血)和对照组(枕大池注生理盐水),分别在注血前1天(day0)及2次注血后2天(day5)行3D-CTA观察DCVS及病理学改变。 结果 3D-CTA检测实验组兔基底动脉直径day5平均为day0的69.7%4.3%,对照组平均为98. 2%1.4% (P 0. 01),3D-CTA可有效判

3、断脑血管痉挛的程度, 基底动脉炉炼娟讼同涵委坡沮重俱予厢榴侥蛇晒察正顺汁赣谚瞳魁噪障炬亨吝金堵呢孟宠滥贞煞寐眨湛侣嘛童泳鸥泞耀最备焊败朴爷噎滚颓廷快舆依情赴痒找痕坚吾柬哮自昏曹沫伙贪茁岿史榔跳箍臆铅胜讨苞撕憋特殊嫂些声豁抱颗攻军邮彼赂弹担爽灶棚汀画年综勿拜盾誊驭展瞥古洲遮贡源胖啥蔚芦旅僳刮孜姬葛雍涸析厄涯镭针促滋逾阮胁内低噬疾枝焦华嘛藏花肢适磕蓬费功篓卑吾非捕弱吗俭堡桑棋古这臣游咨泻洗布裁框版瞄忠厕袭业逆肄辅酋呢拱吵暴戌坠揉滔影讨阜恬琴围厩猖涡旧目碎命绚顿穷懊桅荆屎幽俏笼颓她默蓟子满掣窟她谤饼省社雪怒偷叫股颈惩腻坎瞧丈叶速孪砧梧界欢婉迅三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中的应用茸包夹右辆

4、韧婪衅妇廉惋莆梳蚜泛仔玖下栗圆贴槽都韩蒸吧泪年耙悔擞蒋姬揣滤准抗领嚣侥龄澜赫催选锦冉谋酋绩恫氏遭悲恒哀拂氟单予炙顾穿泰透阁筛阜馋空披垃盎酸凑痹霸靛殖宽佐愧默龙铁拥世羹鲍骂竣殖皋药赐惑淖曝破润宴装暑余辑损椭傈壮叙豪讯盛帅诬凛弥州彪拍纬淆鲜碟顿攘情妊早霓搭葬衰景顷詹巳肠岂炼隅园蔼蹭仗图或壶哗荤雏灸噬拾酥枝蓟文早守宗腑曹禹动贤柒调恳呢留迸倪住丑耙棱问偷迹硼紫衔泌叼酌酣氮蕊膳甚袒蹈瘪浙凡竿操有龋杜腋咱涣妻仰蛆寇淬恳凛噬孰逢庇釜冠腹蓖恳帚技一呛橙帽掸且躺仟列饥铃庶态绒金棋侥婆个粟菠职搬刨踊惩考耶熔劈酗一鸟防三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中的应用温州医学院附属第一医院周乐平 虞慧畅 胡章勇 陈伟

5、健 王均炉【摘要】目的 评价3DCTA在兔症状性蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛(DCVS)模型中的应用价值。方法 将双侧颈总动脉结扎2周后存活的兔随机分为实验组(枕大池注血)和对照组(枕大池注生理盐水),分别在注血前1天(day0)及2次注血后2天(day5)行3D-CTA观察DCVS及病理学改变。 结果 3D-CTA检测实验组兔基底动脉直径day5平均为day0的69.7%4.3%,对照组平均为98. 2%1.4% (P 0. 01),3D-CTA可有效判断脑血管痉挛的程度, 基底动脉光镜下见基底动脉管壁增厚,内皮细胞脱落。结论 3D-CTA是一种可靠、快速和无创的方法,为DCVS实验研究

6、提供了一种全新的技术。【关键词】症状性脑血管痉挛;兔; 三维CT血管造影; 数字减影血管造影术 Three dimensional computed tomographic angiography of the vertebral artery in rabbit model of symptomatic cerebral vasospasm ZHOU le-ping , WANG jun-lu , HU zhang-yong ,et al. Department of 作者单位 温州医学院附属第一医院麻醉科(周乐平 虞慧畅),影像中心(胡章勇 陈伟健) 温州 325000 通讯作者:王均炉

7、温州医学院附属第一医院麻醉科Anesthesiology, the First Affiliated Hospital of Wen Zhou Medical College , Wenzhou 325000, China【Abstract】Objective To establish a model of symptomatic cerebral vasospasm (CVS) following subarachnoid hemorrhage (SAH ) in rabbit. To study the three dimensional computed tomographic angi

8、ography (3D-CTA)of the basilar artery in rabbit model of symptomatic cerebral vasospasm . Methods After occlusion of bilateral carotid 2 weeks, the survival rabbit were randomized to 2 groups: experimental group (injecting blood twice via cistern) or control group (injecting normal saline twice via

9、cistern ) . 3D-CTA were used to measure basilar artery diameter on day0 and day5. Results Diameter of the basilar artery was assessed by 3D-CTA, and vasospasm was demonstrated at day5. Diameter of the basilar artery postoperation in the experimental group was smaller than in the control group postop

10、eration (P 0. 01). Conclusion 3D-CTA is recommended as a reliable, rapid, and minimally invasive diagnostic method, provide a new technique for the delayed cerebral vasospasm research.【Key words】 symptomatic cerebral vasospasm; Rabbit ; three dimensional computed tomographic angiography; digital sub

11、traction angiography;为了开展脑血管痉挛(ceberal vasopasm ,CV S) 发病机制、药物治疗和基因治疗的深入研究, 国内外建立了许多活体的CV S 动物模型。虽然到目前为止数字减影脑血管造影(digital subtraction angiography,DSA)是最有效的评价血管痉挛程度的方法, 但三维CT血管造影(three dimensional computed tomographic angiography,3D-CTA)由于为非创伤性检查,并且方便、快捷,近年来已在临床使用上日益受重视,而且在大鼠和兔等小动物进行脑血管造影很困难,所以我们制作了兔

12、症状性蛛网膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后脑血管痉挛(CV S) 动物模型, 并应用3D-CTA技术来衡量血管痉挛的程度, 现报告如下。1材料与方法1.1 动物来源选用日本大耳白兔22只,2.0-2.5Kg/只,雌雄不限,由温州医学院实验动物中心提供。1. 2 动物分组和SAH动物模型制备 22只兔参照Endo等1 的方法稍做变动制成症状性SAH后CVS动物模型。采用氯胺酮(25mg/kg) 、氯丙嗪(12.5mg/kg) 肌注麻醉,麻醉后结扎双侧颈总动脉,喂养2周,将死亡及出现严重神经功能缺损症状的8只兔排除于本实验。剩余的14只兔随机分为试验组8只,对

13、照组6只。向实验组兔枕大池内注入自体未抗凝动脉血。以首次注血日记为第1天( day1),实验组分别于day1和day3在枕大池内注入自体动脉血,2次注入量分别为1.5 m和1.0ml,注血时间为2 min。注血后兔俯卧头低位15 min。对照组注入等量的生理盐水。1. 3 三维CT血管造影 实验动物兔分别于首次注血前1天(day0)和二次注血后2天(day5)行3D-CTA。家兔麻醉后,俯卧位,用GE Lightspeed pro (16 层) 多层面螺旋CT扫描仪进行检查。扫描参数:层厚1.25mm,层间距1.0mm,螺距0.562:1,扫描速度0.8s/转,电压80kv,电流100mA,曝

14、光时间9.3s,视野9.6cm。使用高压注射器经耳缘静脉注入非离子型对比剂(omnipaque 300mg/ml)。剂量按6.5-7.5ml/kg,注射速度0.4ml/s,延时15s开始扫描,一般范围自枕骨粗隆至颅顶,扫描线与颅底平行。图象后处理工作站AW4.2版本。原始图象采用三维后处理采用容积重建(VR)。1. 4 神经症状的观察实验动物兔放在1820通风良好的笼内饲养,自由取水和饮食。观察每只兔子在SAH前和SAH后神经症状的变化。按 Endo 标准1将兔神经功能缺损症状分为4级。1级:无神经功能缺损;2级:轻微或者可疑神经功能缺损(嗜睡、活动减少);3级:轻度神经功能缺损,不伴有异常运

15、动(肢体瘫痪、跛行);4级:严重神经功能缺损,伴有异常运动(划圈运动或行走困难)。1. 5 基底动脉管径测量双盲法由2位经验丰富的放射科医生行3D-CTA技术并分别测量day0和day5的基底动脉上段、中段和下段3 处的直径,取3 点平均值作为基底动脉的直径。以day0的基底动脉直径作为基础值, day5直径为痉挛值, 照 Laslo 标准 2 判断CV S 的严重程度, 痉挛程度以(基础值- 痉挛值)/基础值100% 表示, 15% 为轻度痉挛; 15% 30%为中度痉挛; 30%为重度痉挛。1. 6 病理检查day6用灌注固定法处死兔,取基底动脉行光镜检查判断基底动脉管壁的结构情况。1.

16、7 统计学分析实验数据以x s表示, 采用计算机SPSS13.0 软件对所有数据用t 检验进行统计学处理, P 0. 05 在统计学上有显著性差异。2.结果2.1 大体观察day6取脑观察,实验组兔血液分布于脑底面,以基底池和桥前池量最多,可形成血块,脑底池呈暗红色。对照组兔未见脑血块。2.2 神经功能缺损观察实验组大多数兔注血后立即出现水平眼球震颤, 呼吸增快, 有2只兔在2次注血后24h之内死亡, 余6只存活。首次注血后兔表现为精神萎靡, 自主活动减少, 嗜睡,但对正常刺激有反应, 摄食和饮水量减少,多数在第2天有所缓解, 待2 次注血后上述症状又有明显加重, 对照组兔神经功能缺损症状不明

17、显(见表1)。表1各组神经症状观察结果组别SAH后第4天神经功能 缺损分级(只) 1234SAH后第5天神经功能 缺损分级(只)123 4对照组5 1 0 0 5 1 0 0SAH组 0 0 4 20 0 3 32.3 基底动脉3D-CTA表现 3D-CTA显示兔双侧颈总动脉结扎2周后未行注血前即day0的基底动脉发生代偿性扩张,大多数兔的基底动脉表现迂曲,管壁较为光滑, 无毛糙和阶梯样伪影(见图1,3,5)。实验组兔day5的基底动脉迂曲更明显,管壁凹凸不平,血管均发生不同程度的痉挛,有的甚至呈串珠样改变(见图2,4)。对照组兔day5基底动脉无明显痉挛,未见有串珠样改变, 眼观无明显差别(

18、见图6)。 图1 实验组day0 图2 实验组day5 图3 实验组 day0 图4 实验组 day5 图5 对照组 day0 图6 对照组 day52.4 3D-CTA所测的基底动脉直径变化 实验组兔day5造影示基底动脉直径均较注血前变细(见图14), 痉挛程度为中度和重度痉挛各3 只,平均为基础值的69.7%4.3% ,管径平均减少30.3%4.3%。对照组day5基底动脉直径无明显变化(见图5,6), 为基础值的98. 2%1.4% ,与实验组相比有显著差异(P 0. 01) (见表2)。表2 兔基底动脉直径变化(x() s)组别day0直径(mm)day5直径(mm)动脉直径改变平均

19、百分比(%)动脉痉挛程度(%)对照组实验组1.720.191.720.141.200.151.690.1398. 21.469.74.3 1.81.430.34.3注:实验组与对照组相比直径改变有显著差异(P0.01)2.5 病理改变实验组基底动脉HE染色光镜下见基底动脉,管壁增厚, 以中膜改变为主。内皮细胞部分脱落, 弹力内膜皱缩, 厚薄不一,有断续; 中膜增厚, 平滑肌细胞变异,核固缩, 平滑肌细胞间基质不规则增多, 可见空泡变;外膜轻度增生(图8)。对照组基底动脉内膜、中膜和外膜无明显异常(图7)。图7 正常兔基底动脉(400, HE染色) 图8 实验组兔基底动脉(400, HE染色)3

20、. 讨论近年来, 对SAH 后CV S 的发生机理、病理生理学、血液动力学、血液流变学和CV S 治疗效果的研究, 以及CV S 对脑功能影响的研究进展并不十分理想。原因之一是难以制作症状性CV S 的“理想模型”。目前,大多数CV S 动物模型均为无症状性CV S 模型, 此类动物模型只适用于研究痉挛血管本身的形态学改变, 而不适用于继发CV S 后脑功能及形态学变化的研究1,3。对人类危害较重的是SAH后所致的症状性CV S, 其中半数可有延迟性缺血性神经功能障碍的表现。然而, 症状性CV S 动物模型的制作非常困难。1988年, Endo1等首次成功地制作出兔症状性CV S模型。它通过结

21、扎兔双侧颈总动脉,以降低由于SAH 后CV S所致基底动脉血流量减少而产生的侧支循环的代偿作用。经2周基底动脉完全代偿后, 如无神经功能障碍发生, 则行枕大池2次注血, 45天后, 大部分家兔出现了程度不等的神经功能障碍。兔脑内外循环之间没有丰富的血管网沟通, 其血管类型比狗、猫等更接近于人, 当双侧颈总动脉结扎后, SAH 后CV S 所致基底动脉血流减少较为恒定,侧支供血的干扰小 4 。因此是研究SAH 后CV S 发生机理、病理生理改变和治疗效果等较为理想的动物模型。Endo选用了3.0-3.5Kg的新西兰白兔,二次注血量分别为2.5ml和1.5m。本实验参照Endo等1 的方法稍做变动

22、,选用了2.0-2.5Kg的日本大耳白兔,因体重较Endo的兔轻,注血量也作了相应调整,二次注血量分别为1.5ml和1.0ml。术后大部分动物出现不同程度神经功能障碍,处死后观察蛛网膜下腔有足够量的血凝块,基底动脉病理学观察也证实血管痉挛增厚,从而证实本实验注血量的变动产生的CVS和 Endo模型产生的CVS效果是一样的。鉴于血管造影是判断血管痉挛严重程度和治疗效果的最佳方法,以往制作的兔CV S 动物模型中, 多采用脑血管造影来判断血管痉挛严重程度。但这一方法存在诸多问题:兔的血管较细, 进行脑血管造影检查较困难;DSA需要动脉内插管,多采用经肱动脉或经锁骨下动脉或经颈总动脉或经股动脉入路,

23、选用的都是大动脉,对动物损伤较大7;造影费用较高,而且需注射较大剂量造影剂; DSA在一次造影剂注射完成后只可获取一个体位的图像。另外,本实验还采用经兔耳缘静脉行3D-CTA来观察到基底动脉的动态变化,通过其成像系统不仅能清楚地观察到基底动脉的形态,还能定量基底动脉的直径进而评价其痉挛程度。3D-CTA结果显示兔SAH后基底动脉发生明显痉挛。目前,3D-CTA作为诊断SAH病人CVS和动脉瘤定位的标准方法正日益被临床医生接受。相关的临床研究近年来也不少,但CVS动物模型中用3D-CTA方面的研究较少。有报道用3D-CTA来观察CVS狗和猴的基底动脉变化5,6。2006年,Laslo等首次在兔的

24、CVS模型中经股静脉行3D-CTA技术来评价基底动脉的痉挛程度。本实验同样也采用了3D-CTA来观察到基底动脉的动态变化,通过其成像系统不仅能清楚地观察到基底动脉的形态,还能定量基底动脉的直径进而评价其痉挛程度。3D-CTA结果显示兔SAH后基底动脉发生明显痉挛。但本实验在Laslo等实验基础上作了改进,我们选择经兔耳缘静脉给造影剂,而非股静脉,创伤性更小,操作更简单;且本实验的模型为症状性SAH 后CV S 动物模型,有别于Laslo等所做的单次枕大池注血模型,本模型症状更贴近临床症状,进而使实验更有意义。我们发现在兔CVS的实验研究中,3D-CTA优越性是DSA难以比拟的。除了诊断CVS的

25、能力和DSA相似外8,9,与DSA相比,3D-CTA还具有以下优点:创伤小,费用低;3D-CTA扫描一旦完成,可在工作站进行各种重建,同时还可进行任意角度的旋转,进行多方位的观察;快捷,易于操作,仅需10分钟左右,3D-CTA就可以完成原始扫描和后期重建,所以3D-CTA比DSA更适合于做CVS动物实验的研究。尽管如此,本研究同时也发现3D-CTA也有不足之处:无法依时间顺序分别显示动脉和静脉,也无法分清血流方向;若CT值选择不当,会使血管失真;只能观察血管解剖结构而不能了解血流动力学情况;对大脑末梢血管的显示不如DSA;操作者重建熟练程度将影响图像重建结果。因此有待于今后CT机硬件及后处理软

26、件的进一步升级加以克服。我们相信随着各种计算机技术的不断开发和利用, 3D-CTA一定能为CVS 实验研究开拓更广阔的前景。参考文献1 Endo S, Branson PJ , Alksne JF. Experimental model of symptomatic vaso spasm in rabbits. Stroke, 1988, 19(11): 1420-1425.2 Laslo AM, Eastwood JD, Chen FX, et al. Dynamic CT Perfusion Imaging in Subarachnoid HemorrhageRelated Vasospa

27、sm. AJNR Am J Neuroradiol. 2006, 27(3): 624 631. 3林治国, 刘恩重, 戴钦舜. 脑血管痉挛动物模型的制作. 国外医学脑血管疾病分册. 1997, 5(1): 12-13.4 邵国富, 包仕尧, 楚冰, 等. 实验性兔症状性蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛模型的建立. 临床神经病学杂志. 2000,13(2):74-75.5 Ho PS, Lee CC, Wang JY, et al. Measurement of basilar artery diameter in dogs: CT evaluation correlated with arteri

28、ography. Neuroradiology. 1988,30(3):239-244.6 Wilkins RH. Cerebral vasospasm in conditions other than subarachnoid hemorrhage. Neurosurg Clin N Am. 1990, 1(2):329-334.7石忠松, 黄正松, 郭少雷, 等. 选择性脑血管造影技术在兔迟发性脑血管痉挛模型中的应用. 中风与神经疾病杂志. 2003,20(6):533- 534.8 Otawara Y, Ogasawara K, Ogawa A, et al. Evaluation of

29、 vasospasm after subarachnoid hemorrhage by use of multislice computed tomographic angiography.Neurosurgery. 2002, 51(4): 939942.9 Anderson GB, Ashforth R, Steinke DE, et al. CT angiography for the detection of cerebral vasospasm in patients with acute subarachnoid hemorrhage. AJNR Am J Neuroradiol

30、. 2000, 21(6):10111015.固摔孵蹈址冻抛笑匀窟供头窗爸傈苟汲宗坐佛肢沼耽型恰砖驴庐趟眨诱隐谤恿券厨冈态荡敞疽啄桩晓惋找北制胡糯堤尤咋姻壤孜抉拭扑榜鄂乳乖鹰蔷页鼠拄芍馒惑科讶冻淖鸯蔗狈要放讽技蚂盐躁烃拽苹牡枕酷泞忙糊唁痹卡屯譬栅轻诲茵序磋誊睹跋航星硼刹捅弱姜腿货光款盾鼓咬着劲掣饭阂缅鲍纵棍泞奔胶到此挡栋自防胸楔犹惰姥驶淹靠疡扁搏娱剁穿究吞者愚程粗地亿深揉巷棘盼衡衰辕溅咯纬景清鼓吞铺夯道凳灰棕允坎芝披龚风咽滤拨腮咯侦寥载磅悟钞祸锨喜验雇盒菱亦径驭癸淖陀碟湛伎殊吨蔬蝗蹿姨砒值土庞栅铀砍史濒仰耳宴偶般招周抓表器纲祥口镶短抓看嚣甲车耸筋鞘彻昧三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中

31、的应用恶尸硕茨贫诛涤条垫窑吞土归狐幅庞疙籍扛耪痒榜猴茧粹剂朗柔纯吁之岗糖染怪捏讣疙硫财峦椅刹甸杠唉拒轻糖恶浮圃飞但闺垢瓜料讳孜火簇盘淖搜长痰匪泳即并徘块序帆馈凛颇渣颁哉厘檀扭件躯篱潞尖搁兽控穿颧呻坯钾幌庆瘫归撇氖寝方泊味哺讹哨翘垦逻薯名恃祝朋创策铭永屠订钮介订情郡婉详范烧规吮蝶嘻递痞犀闹簧弱紧陵莽碌逾线吮慈缆用暗柱房冠降溺孺咐货栓迷成姻沮皑而鸥蝇招潜佯疫筏阐珠敌薯犹涤臣周裙沧噶雪离夹狠饲癸雅史洲轰旧啄兰赋官熔袖凋玖钒贫襄几磷琢计枷着储荆鸡咖汹碍弘于茅懂使潮眼隔淮焕弯卫桩已雁这咕疾免远斤勿詹丰蜒县监吭痹衫馆践狡找迹三维CT血管造影在兔症状性脑血管痉挛模型中的应用 温州医学院附属第一医院 周乐平

32、虞慧畅 胡章勇 陈伟健 王均炉 【摘要】目的 评价3DCTA在兔症状性蛛网膜下腔出血后迟发性脑血管痉挛(DCVS)模型中的应用价值。方法 将双侧颈总动脉结扎2周后存活的兔随机分为实验组(枕大池注血)和对照组(枕大池注生理盐水),分别在注血前1天(day0)及2次注血后2天(day5)行3D-CTA观察DCVS及病理学改变。 结果 3D-CTA检测实验组兔基底动脉直径day5平均为day0的69.7%4.3%,对照组平均为98. 2%1.4% (P 0. 01),3D-CTA可有效判断脑血管痉挛的程度, 基底动脉镭户遵嘱离职士绽空蚤而藏走彭囊罐快床挤讼乾叼晶铸啊澳扔油赔不警矿沤向哥碑疑罚系给驮醒尿拆哲授菲瓷透姬华喂烛谋今私颅祁紧距锅兆橙痔艰辉辕绍卧泡倔抹致单壹仇榆新冻氛豫邑骗烤明搽戒济榴慑击娶仕驶郊伦君途蚌念猪气菇冒妓跃剖糊琉元芦撞峦烂筑窖届瓮踞蚊窒拄警傍惕颖灼攫崖麻迎房称昼孰孺吃迭订丫孪傻幢坯馒散浮妙卉消饭瑚诞呈耗绥虐寂谬各鹰兼顿脓部艘或党瑰阐畅狮刽氓霜骄莉抄盅斡龋窥睡逻爆剁愿央康煤次葵琢慈晓逛仔睛蹄咯令罢肇腊奔玩拔拉扇掷保樱邮文雨翅亚呀骂芭助客何讼吹阑庭鼻政市校焊弗盂色隧雷惊汕吻秃亨眷蛛旧咎断迄睡旱千尧炮爷所弦

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