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1、精选优质文档-倾情为你奉上实验二 血清胆固醇含量的测定的实验报告实验目的:学会利用氧化酶法测定血清胆固醇含量的原理和方法。实验原理:血清胆固醇由游离胆固醇(30%)和胆固醇酯(70%)组成。血清胆固醇经酯化酶水解后,生成游离胆固醇和脂肪酸;在胆固醇氧化酶的作用下,游离胆固醇产生的H2O2与4-氨基安替比林和DHBS反应生成微红色的醌亚胺。醌亚胺在520nm有特异吸收,反应产生的颜色与胆固醇含量成正比。胆固醇酯+ H2O胆固醇+脂肪酸胆固醇+O24胆甾烯酮+ H2O2H2O2+4-氨基安替比林+DHBS醌亚胺+ H2O实验步骤:1、取2支试管分别加入0.2mL的血清和标准胆固醇溶液,并分别标注为
2、“H”和“SH”试管。往每支试管加入0.2mL的沉淀剂,在室温下静置15min,用2000rad/min的离心机分离10min。2、准备5支试管分别标注为“T”(总胆固醇)、“H”(高密度脂蛋白胆固醇)、“ST”(标准总胆固醇)、“SH”(标准高密度脂蛋白胆固醇)、“B”(空白实验)。按照下表准备各支试管:(标准胆固醇浓度为50mg/dL)试管TSTHSHB上层清液0.20.2血清0.02标准胆固醇0.1蒸馏水0.18010.2酶试剂0.20.20.20.20.23、准备好以上试管后,充分混合并在37。的温度下放置20min,用波长520nm的分光光度计测量各支试管的吸光度值。实验结果:试管TSTHSH吸光度值0.1670.2520.6050.430计算公式:总胆固醇=50高密度脂蛋白胆固醇=50代入数据得:总胆固醇=50=165.7(mg/dL) 高密度脂蛋白胆固醇=50=70.3(mg/dL)专心-专注-专业