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1、北京普利莱基因技术有限公司 电话：010-62027915, 62053186 Email: sale.NP-40裂解液 C1057描述：NP-40 裂解液是一种比较温和的细胞组织裂解液。NP-40 裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的 PAGE、Western、免疫沉淀(immunol precipitation，IP)、免疫共沉淀(co-IP)和 ELISA 等。本产品可以用于动物、植物的细胞或组织样品，也可以用于真菌或细菌样品。NP-40 裂解液的主要成分为 Tris(pH7.4)，NaCl，1% NP-40，EDTA 以及磷酸酶抑制剂。用NP-40裂解液裂解得到的蛋白样品，可以用普利
2、莱P1511 BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。由于含有较高浓度的去垢剂，不能用Bradford法测定由本裂解液裂解得到样品的蛋白浓度。储存：4保存，12 个月有效 制备细胞裂解产物：1. 800g 4离心5分钟收集培养细胞，而后用预冷的PBS洗涤细胞两次。估计细胞离心后的体积（PCV, 106 cells=20 ml, 107 cells =100 ml PCV）； 2. 每50100 ml PCV加入5倍体积裂解液（250500 ml）,涡旋震荡10秒，冰浴放置20分钟；3. 12000g 4离心15分钟，将上清转移到新的离心管中，即得细胞总蛋白产物。制备组织裂解产物：1. 取50-1
3、00 mg组织在冰上剪成碎片，用预冷的PBS洗涤2次离心弃去PBS；2. 按照每20 毫克组织加入 150-250 微升裂解液的比例加入裂解液。(如果裂解不充分可以适当添加更多的裂解液，如果需要高浓度的蛋白样品，可以适当减少裂解液的用量。)3. 4用玻璃匀浆器匀浆20-40次，直到95的细胞被破碎，涡旋震荡10秒，冰浴放置20分钟；4. 12000g 4离心15分钟，将上清转移到新的离心管中，即得组织总蛋白产物，可用于后续的免疫沉淀或者Western Blot等实验。注意： 1. 在转移上清液时不要吸入底部的沉淀物；2. 在做免疫沉淀或免疫共沉淀时最好在实验前进行蛋白的提取，以避免某些不稳定蛋白的降解；3. 在该裂解缓冲液中未加入蛋白酶抑制剂，用户可自行选择进行添加。Page 1 of 1Applygen Technologies Inc. DocRev: 201708