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1、精选优质文档-倾情为你奉上临床微生物标本采集手册*医院检验科细菌室2008年3月专心-专注-专业微生物检查的标本收集原则1.及时采集微生物标本作病原学检查。2.采样时严格执行无菌操作，将污染情形降至最低。3.在感染的急性期、使用抗生素前或伤口局部治疗前收集样本。4.收集真正感染的病灶处的样本，且避免邻近区域常居菌群的污染。5.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理，防止渗漏，但不得使用消毒剂。标本中不可添加防腐剂。6.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与容器收集足量的样本，尽量不要以棉花拭子收集样本。7.采样后立即送检，最好在2h内。为保持微生物活性，棉拭子等标本宜放入恰当的运送培养基
2、送检。如不能及时送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但存放一般不能超过24h。8.混有正常菌群的标本，不可置肉汤培养。9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关临床资料。（要标明病区、病人姓名、住院号、标本来源、采集部位、采集时间等）细菌室对微生物标本拒收的标准与处理方法拒收标准处理方式申请单注明的标本种类与送检标本不符 与原送检部门联系，退回申请单，要求审核并重送符合要求的标本。申请单上填写项目不全或与标本的标签不符或容器上未贴标签与原送检部门联系，要求补充完整申请单或重贴标签或重送标本。检验单上未注明样本来源和培养项目或仅注明身体部位者（如胸、腿） 查询申请医师
3、，补足标本信息。仅有申请单而无标本或无菌容器内无标本与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本标本外漏及明显受污染（如开塞）与原送检部门联系，退回申请单，建议重送标本。标本收集不符合采集要求 退回申请单，及时通知临床，告知正确收集方法，要求重送标本样本混入消毒液 或防腐剂退回申请单，及时通知临床，建议重送标本。送检延误，超过要求送检时限与送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。标本量过少或已明显干燥与原送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。申请项目不适合如血液培养同时要求涂片革兰染色，肛门或直肠标本要求做革兰染色检查淋球菌。 联系申请医师，建议删去请求革兰染色项目 送检容器不当或破损渗漏与原
4、送检部门联系，退回申请单，要求重送标本。穿刺液标本严重凝固，无菌部位标本（如脑脊液、脓、穿刺液、尿液等）为非无菌管采集。退回申请单，并注明标本不当，要求重送标本。一支拭子同时做细菌、支原体、衣原体及真菌培养 询问医师并补送标本，如不能补送，则按医师要求优先次序处理 同一天同一病人重复送多次同一检测目的的相同样本（血液标本除外）一般只检查一次即可，可与临床医生进行协商。各类标本储存的环境储存环境标本来源4冰箱 痰、尿液、粪便、活检组织、气管冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等室温（25） 脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、鼻、喉、血液培养、血管导管尖、体液 、厌氧菌培养标本细菌室项目检验周期表序
5、号检验项目标本送达时限标本接收至进行检验时间标本接收至出报告时间标本检验的周期（标本接收至报告送达时间）1肥达氏反应2小时1小时24小时2天2抗O、类风湿因子（RF）定性2小时2小时10点以前送检当天下午10点以后送检第二天下午3普通细菌培养+药敏（包括尿、痰、脑脊液、分泌物、粪便、咽拭子等）1小时1小时3天4尿普通培养+L型或尿L型培养2小时1小时阳性结果3天以上，阴性结果7天5血培养立即1小时阳性结果3天以上，阴性结果7天6霍乱弧菌培养立即30分钟12小时内初步报告7淋球菌培养30分钟30分钟3天8真菌培养1小时2小时3天后9解脲、人型支原体培养及药敏1小时2小时2天后10肺炎支原体培养及
6、药敏1小时2小时4-6天11淋球菌涂片革兰氏染色法1小时2小时5小时当天下午12涂片找抗酸杆菌1小时2小时5小时当天下午13新型隐球菌墨汁染色1小时1小时5小时当天下午注：1.淋球菌涂片革兰氏染色、涂片找抗酸杆菌、新型隐球菌墨汁染色只做病房标本并且周六下午、周日不做，门诊标本请送到门诊化验室检验。2.细菌室正常上班时间为周一至周五全天、周六上午，其他时间（包括中午、夜班、周六下午、周日）常规培养请与病房值班人员联系。抗O、类风湿因子（RF）定性、支原体（包括解脲、人型、肺炎支原体）培养、衣原体检查周六下午、周日休息停做，肥大氏反应周六、周日不做。3.空气培养周六、周日不做，需要培养的请周一至周
7、五送检。血培养采集操作规程1 概述当微生物侵入血液迅速繁殖超出免疫系统清除这些微生物的能力时形成菌血症或真菌菌血症。血液和骨髓的细菌学培养对菌血症的诊断具有重要价值。临床菌血症按病程可分为一过性菌血症、间歇性菌血症、持续性菌血症。菌血症患者多数为间歇性菌血症，病原菌周期性出现在血液中，随之为无细菌时期。不管临床症状经历的严重程度，患者血液中病原菌浓度相当低，据此要求临床多次采集血液标本进行培养，但24h内一般不超过3次。血培养常见菌:革兰阴性菌主要包括大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、肠杆菌,伤寒沙门菌、绿脓假单胞菌、不动杆菌属等;革兰阳性菌主要包括金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、念珠菌属等。菌血
8、症是临床医学急症,应尽快采集血液进行培养。2 物品准备与检验申请2.1. 领取专用血培养瓶。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。普通血培养领取普通双相血培养瓶（绿色帽），全自动血培养领取:成人血培养领成人瓶（灰色帽），儿童血培养领儿童瓶（粉红色帽）。2.2. 填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征一般患者出现以下一种体征时可作为采血的重要指征:发热(38) 或低温(36) ,寒战,白细胞增多(计
9、数大于10. 0109/ L ,特别有“核左移”时) ,皮肤黏膜出血、昏迷、多器官衰竭,血压降低,C 反应蛋白升高及呼吸加快,血液病患者出现粒细胞减少,血小板减少等,或同时具备上述几种体征时而临床可疑菌血症应采集血液培养。新生儿可疑菌血症,应该同时做尿液和脑脊液培养。对入院危重感染患者应在未进行抗菌药物治疗之前,及时做血培养。4 采集方法4.1 操作流程: 打开血培养瓶塑料盖用75%酒精消毒血培养瓶橡皮塞并擦干表面残余酒精消毒皮肤后用无菌注射器抽取血液从橡皮塞处注入血培养瓶内用75%酒精重新消毒血培养瓶橡皮塞并盖好塑料盖立即送检。（全自动血培养系统的专用培养瓶注入血液后不需再消毒瓶塞，也不用再
10、盖塑料盖，直接送检）4.2 严格执行规范的皮肤消毒法，推荐用三步法:(1)用75%酒精擦拭静脉穿刺部位待30s以上(2)用1%-2%碘酊作用30s或10%碘伏作用60s,从穿刺点向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上，涂擦穿刺皮肤2遍，待干燥。（3）75%酒精脱碘：用75%酒精由内向外方向涂抹去碘酒液 ,待酒精挥发干燥后采血。4.3 采血量成人采血量是810 ml ,儿童13 ml 。4.4 操作注意事项：（1）从静脉采血，不建议从动脉采血，在穿刺前或穿刺期间,为防止静脉滑动,可戴乳胶手套固定静脉,但不可接触穿刺点。（2）用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行第二次穿刺,应换针头) 直接注
11、入消毒后的血培养瓶。（3）血标本接种到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固。立即送检,切勿冷藏！（4）多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污染的可能。除非无法作静脉穿刺取血，否则不应从留置导管内取血。（5）如血培养是通过静脉植入管采集的，不用弃去起始部分的血液，应同时自外周静脉采集血液进行血培养，以协助判读血培养阳性结果。（6）抽血前应将标签贴于血培养瓶颈上，标签内容包括病人基本信息、采血时间、采血部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上，否则仪器无法识别。4.5 血培养次数和采血时间采血培养应该尽量在使用抗菌药之前进行,在患者发热期间越早越好，以发热高峰前1h内或病人寒战和发热开始时采集
12、为宜。在30-60分钟内或同时于不同部位采集23 份血培养(一次静脉采血注入到多个培养瓶中应视为单份血培养) ；除非怀疑有感染性心内膜炎或其他静脉内感染如导管相关性感染时，才可分开时段采集。24h内采血一般不超过3次。在采取血培养后的2-5天内，不需要再重复采取血培养，因为进行治疗后的2-5天血液中的感染细菌不会马上消失。特殊的全身性和局部感染患者采血培养的建议: (1) 可疑急性原发性菌血症、真菌菌血症、急性脑膜炎、骨髓炎、关节炎、细菌性肺炎、肾盂肾炎发热患者,应在不同部位（如两臂）采集23 份血标本（应在抗生素治疗前完成）。(2)不明原因发热,如隐性脓肿,伤寒热和波浪热,第1天内相隔1h在
13、不同部位连续采集23 份血标本,当培养2448h后若为阴性，应再采集2-3份血培养。(3)可疑菌血症或真菌菌血症,但血培养持续阴性,应改变血培养方法,以获得罕见的或苛养的微生物。(4)可疑细菌性心内膜炎：急性病例，在抗生素治疗或改变前12h内从不同部位采集3份血标本；亚急性病例，第1天24h内相隔1h连续采集3次血标本，若2448h全部阴性，再采集23次血标本；若已经抗生素治疗患者，连续3天，每天取2次血标本。婴幼儿血培养采集要求：(1)采血量不能超过全血量的1%。（2）一般只抽一瓶需氧瓶进行培养，无需常规做厌氧瓶。5 标本运送和验收5.1 采血后应该立即送检,如不能立即送检,需室温保存,切勿
14、冷藏。5.2 血培养瓶验收: (1) 检查培养瓶是否有渗漏、破裂或明显污染。(2)检查瓶子上的标签与申请单是否相符。(3)检查血液标本是否适量，血液是否凝固。5.3 不合格血培养标本的处理: (1)拒收培养瓶:血培养瓶标识与化验申请单不符,培养瓶破裂或明显污染，血液凝固的培养瓶。处理方法:立即与临床医师联系,报告拒收的具体理由。(2)补做培养瓶:血标本采集后放置12h以上(手工法除外),用不适当类型的培养瓶收集标本,用过期的培养瓶收集标本,采血量不足等。处理方法:立即与临床医师联系,报告标本不合格的具体理由,建议补做血培养。附 细菌室杂项采样须知抗链球菌溶血素O（ASO）、类风湿因子（RF）定
15、性检测、肥达氏反应试验：均抽血3ml，置于普通试管（红色帽）中送检。ASO与RF定性可与其他实验室共用标本。抗酸染色、墨汁染色及薄膜试验可与常规培养共用一份标本（拭子标本需单独取一份）尿培养采集操作规程1概述尿路感染是指尿道内有大量微生物繁殖而引起的尿路炎症。尿路感染并非是一种单一的疾病，而是一种临床综合征。尿液的细菌学检查对于尿路感染的诊断具有重要价值。正常人体内的尿液是无菌的，而外尿道有正常菌群寄居。尿液经尿道排出时受到尿道中细菌的污染而混有细菌，但细菌数不超过103cfu/ml。患有泌尿系感染时，尿中的菌数高于104105cfu/ml,因而可以此界限作为诊断泌尿系感染的依据。2物品准备与
16、检验申请2.1领取无菌试管。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。注意：未留标本之前不要打开试管帽！2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征有下列体征之一者，应进行尿培养：（1）有典型的尿路感染症状；（2）肉眼脓尿或血尿；（3）尿常规检查表现为白细胞或亚硝酸盐阳性；（4）不明原因的发热，无其他局部症状；（5）留置导尿管的患者出现发热；（6）膀胱排空功能受损；（7）泌尿系统疾病手术前。4 采集方
17、法标本采集应力争在未使用抗生素之前或停用抗菌药5d后留取尿液，注意避免消毒剂污染标本。采集方法有：（1）清洁中段尿法：是最常用的方法。最好留取早晨清洁中段尿标本，嘱咐患者睡前少饮水，清晨起床后用肥皂水清洗会阴部，女性应用手分开大阴唇，男性应翻上包皮，仔细清洗，再用清水冲洗尿道口周围；开始排尿，将前段尿排去，中段尿约510 ml直接排入专用的无菌试管中，不少于1ml，立即送检。婴儿消毒其阴部后，将无菌小瓶直接对准尿道口以橡皮膏贴于皮肤上，待排尿后立即送检。该方法简单、易行，但易受到会阴部细菌污染，注意正确采集。 （2）耻骨上膀胱穿刺法：使用无菌注射器直接从耻骨上经皮肤消毒穿入膀胱吸取尿液，是评估
18、膀胱内细菌感染的“ 金标准”方法，尤其做厌氧菌检查时必须采用膀胱穿刺法。但本法有一定的痛苦，患者难以接受。穿刺时膀胱应充盈，皮肤严格消毒后用装有19或20号针头的注射器在耻骨联合距脐1/3处穿刺。主要用于厌氧菌培养或留取标本困难的婴儿尿标本的采集。（3）直接导尿：按常规方法对会阴局部进行消毒后，用导尿管直接经尿道插入膀胱，获取膀胱尿液，一般插入导管后先让尿流15ml再留取培养标本。本法极易将下尿道细菌引入膀胱，导致继发感染，一般不提倡使用。禁止把导尿管与尿袋拔开后收集尿液。（4）小儿收集包：对于无自控能力的小儿可应用收集包收集尿液，这种装置由于很难避免会阴部菌群污染产生假阳性，所以只有在检验结
19、果为阴性时才有意义。如果检验结果为阳性，应结合临床进行分析，必要时可使用耻骨上膀胱穿刺或导尿法留取尿液进行复检。（5）留置导尿管收集尿液：应先消毒导尿管外部，按无菌操作方法用注射器穿刺导尿管吸取5-10ml尿液，置于无菌试管中送检。操作时应防止混入消毒剂，注意不能从尿液收集袋中采集尿液，导尿管末端的尿液也不能用于培养。本法中滞留导管会使膀胱带有细菌，尽可能不采用。5 标本运送和验收5.1 标本采集后后应该立即送检,如不能立即送检,室温保存时间不得超过2h，4保存不超过24h。规定每日1次。5.2申请单验收：要求尿培养申请单除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等，
20、验收时应检查申请单是否填写完整。5.3 标本验收：（1）检查标本标识是否与申请单相符；（2）检查标本容器有无溢漏、渗出，是否加盖；（3）检查送检时间是否超过规定的标本保存时间。5.4 不合格标本处理:（1）对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系；（2）对标识不符、送检容器不合格、送检时间超过规定时间的标本应注明原因，退回，要求重新留取标本，并做记录。（3）标本离心镜检，凡有较多鳞状上皮，脓细胞较少而细菌较多的或有大量尿结晶析出的均为不合格标本，应拒收。痰及下呼吸道标本采集操作规程1概述临床通常将正常人喉以上部位称之为上呼吸道，上呼吸道定植有大量的正常菌群，而气管以下包括气管、支气管和肺泡称
21、下呼吸道，通常无菌。下呼吸道分泌物经过上呼吸道排出时常受该处的正常菌群的污染。下呼吸道感染包括急性气管-支气管炎、慢性支气管炎急性发作、支气管扩张继发感染及肺实质感染（肺炎、肺脓肿）等。病原体有细菌、病毒、衣原体、支原体、真菌、立克次体和原虫等。上呼吸道感染临床诊断一般不难。细菌学检验能明确感染病原及药敏结果，有助于疾病治疗、流行病学调查和医院感染的监测。2物品准备与申请2.1领取清洁痰盒，推荐到采购办领取专门痰盒。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括
22、：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征痰液标本是临床微生物学检验最常见的的标本，但不是下呼吸道感染的最佳标本。有下列体征之一，应进行痰培养：（1）咳嗽 咳嗽咳痰是下呼吸道感染最常见的症状。（2）咯血包括泡沫血痰、鲜血和痰中带血等。（3）呼吸困难呼吸急促或哮喘，常伴有胸痛。（4）发热伴白细胞增高尤其是中性粒细胞或CRP明显增高。（5）胸部影像学检查提示有感染可能。4 采集方法4.1 自然咳痰法以晨痰为佳，采集标本前应用清水、冷开水漱口或用牙刷（不用牙膏）清洁口腔和牙齿，有假牙者应取下假牙。尽可能在用抗菌药物之前采集标本。用力咳出呼吸
23、道深部的痰，痰液直接吐入痰盒中，标本量应1ml。咳痰困难者可用雾化吸入加温至45C的10% NaCl水溶液，使痰液易于排出。对难于自然咳痰患者可用无菌吸痰管抽取气管深部分泌物。4.2 支气管镜采集法、防污染毛刷采集法、环甲膜穿刺经气管吸引法、经胸壁针穿刺吸引法和支气管肺泡灌洗法，均由临床医生按相应操作规程采集，但必须注意采集标本时尽可能避免咽喉部正常菌群的污染。其中气管穿刺法仅用于昏迷患者。4.3 小儿取痰法用弯压舌板向后压舌，将拭子伸入咽部，小儿经压舌刺激咳痰时，可喷出肺部或气管分泌物粘在拭子上送检。幼儿还可用手指轻叩胸骨柄上方，以诱发咳痰。5 标本运送和验收5.1 标本应尽快送检，不能及时
24、送检的标本，室温保存2h，4冰箱保存24h。规定每日1次。5.2 下呼吸道细菌学检验标本验收与拒收见下：（1）呼吸道有大量的正常菌群存在，咽拭子、咳痰、吸出的分泌物厌氧菌培养无意义。（2）申请单填写应完整无误。标本标识必须唯一，并与申请单相符，未标采集时间、部位或检验要求等拒收。（3）痰标本呈水样或唾液样，有明显食物残渣、灰尘纸屑者拒收。（4）涂片白细胞和鳞状上皮细胞计数：白细胞10低倍镜或鳞状上皮细胞25低倍镜，表示该标本已污染正常菌群，建议重送标本。（5）送检时间超过2h拒收。（6）同时同部位或同一天两份相同检测的标本，应与申请医生协商处理。粪便标本采集操作规程1概述急性感染性腹泻可以由细
25、菌、病毒及原虫引起，实验室常规检查是细菌培养。沙门氏菌、志贺氏菌、邻单胞菌和气单胞菌应作为实验室常规培养的主要腹泻病原菌。住院3天以上发生腹泻的患者进行常规培养意义不大，秋冬季，儿童(2岁以内)腹泻多以病毒性肠炎为主，应在腹泻病毒筛选阴性之后，再考虑做细菌培养。2物品准备与申请2.1领取清洁便盒。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征当腹泻患者出现以下任
26、何一种情况时建议采集粪便标本，进行细菌培养：（1）粪便涂片镜检白细胞5个/HP；（2）重症腹泻；（3）体温大于38.5；（4）血便；（5）便中有脓液；（6）未经抗菌药物治疗的持续性腹泻患者；（7）来自疫区的患者。4 采集方法标本采集尽可能在发病早期和应用抗菌药物治疗之前。在不同的时间采集23份标本可以提高致病菌的分离率。方法有:4.1 自然排便法直接留置粪便标本于清洁、干燥广口容器中送检。本法为常规方法。注意若有脓血、粘液、组织碎片，则取有脓血、粘液、组织碎片部分的粪便23g，液体粪便则取絮状物，一般取13ml。4.2 直肠拭子法 用无菌拭子插入肛门2-4cm，轻轻旋转拭子，可在拭子上明显见到
27、粪便，插入运送培养基内，立即送检。本法只适用于排便困难患者或婴幼儿，不推荐使用拭子做常规性病原菌培养。5 标本运送和验收5.1 标本应尽快送检，不能及时送检的标本，室温保存2h。如采便后2h内未培养,标本应放入运送培养基如Cary -Blair运送培养基中4冰箱保存，一般可保存24h。5.2 粪便标本验收与拒收程序：采用一次性无菌杯（盒）,杯（盒）盖严密，无明显灰尘纸屑，留取时间符合要求者为合格标本。否者为不合格标本应拒收。当怀疑沙门菌、志贺菌、弯曲菌以外的细菌引起的腹泻时，临床医生必须通知实验室，因为分离弧菌、耶尔森菌、气单胞菌、大肠埃希菌O157：H7需要特殊的实验程序和培养基。粪便标本一
28、般不做厌氧培养。 脑脊液标本采集操作规程1概述正常人体脑脊液是无菌的。当人体患有脑脊髓膜炎症时，在脑脊液中可以出现病原菌。常见的病原菌有细菌、真菌、结核分枝杆菌等。做脑脊液的细菌培养有助于诊断脑膜炎病因。2物品准备与申请2.1领取无菌试管。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征有脑膜炎症状，临床怀疑有脑膜炎感染，应进行细菌培养。4 采集方法病人应先禁食，
29、由医师以无菌手续在病人第3和第4腰椎间隙或稍低处穿刺取得，小儿则于第4和第5腰椎间隙穿刺，必须装入戴帽(盖)的无菌容器，立即送检。5 标本运送和验收5.1 标本采集后应置于无菌试管内尽快送检，绝不可冷藏！每种检验需要最小量：细菌培养lml，真菌2ml，抗酸杆菌2ml。5.2标本验收与拒收：标本未收集于无菌管或送检延误或冷藏保存，则拒收标本，通知临床要求重新采集标本。无菌体液标本采集操作规程1概述无菌体液是指除血液、骨髓和脑脊液外的羊膜腔液、后穹窿穿刺液、透析液、心包液、腹膜穿刺液和滑膜液，正常的穿刺液是无菌的，在感染的情况下，只要检出细菌，通常都可视为病原菌。2物品准备与申请2.1领取无菌试管
30、或血培养瓶。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。2 采集指征局部组织或器官怀疑有细菌感染，应进行细菌培养。4 采集方法由临床医生按相应规程无菌采取适量标本送检。当留取标本时，为防止无菌体液凝固，应在无菌容器内先加入灭菌肝素0.5mg（可抗凝5ml标本），再注入各种穿刺液，轻轻混合。5 标本运送和验收5.1 标本采集后应置于无菌试管内尽快送检。5.2标本验收与拒收:
31、未置于无菌容器内或未及时送检者应拒收。眼、耳、鼻、喉标本采集操作规程1概述正常人的中耳及鼻窦内是无菌的。健康人的咽峡部有口腔的正常菌群。做细菌培养有助于明确感染病原菌。鼻咽部标本有助于诊断百日咳、白喉和衣原体感染，以及识别出脑膜炎奈瑟菌或金黄色葡萄球菌的携带者，但不能用于中耳炎、鼻窦炎的诊断。2物品准备与申请2.1领取无菌试管。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。
32、3 采集指征局部有炎症症状或怀疑有细菌感染，应进行细菌培养。4 采集方法4.1 眼结膜标本 预先沾湿拭子，在结膜上滚动采集标本。标本在15min内送达实验室。4.2 眼角膜标本 在麻醉下，用刮勺在溃疡或创伤边缘刮取碎屑，立即送检。眼部感染所获得的标本量很少，建议医师取样后直接接种在培养基平板上培养。4.3 口咽部标本 先用一个拭子揩去溃疡或创面表浅分泌物，第二个拭子采集溃疡边缘或底部，常规培养2h送检。4.4 患有外耳炎者，需要深部拭子，因为浅表拭子可能遗漏链球菌引起的蜂窝织炎。4.5 鼻标本 用一根无菌棉拭子伸进一侧鼻孔约2.5cm，与鼻黏膜接触，轻轻旋转拭子，蘸取黏膜上分泌物，缓慢取出，直
33、接送检。4.6 注意事项:（1）眼、耳、鼻、喉标本采集后应立即送检，防止干燥，禁止冷藏。（2）应注明标本来源如眼标本注明是眼睑、结膜还是角膜等，并注明左眼还是右眼。结膜标本最好取双眼、双份，每眼取一份用于培养，一份做革兰染色。（3）不建议用鼻咽拭子标本做常规细菌培养。（4）眼、耳、鼻、喉拭子标本一般不能做厌氧培养。5 标本运送和验收5.1 标本采集后应置于无菌试管内尽快送检，不超过 2h送至实验室。5.2标本验收与拒收：标本送检时间过长或未置于无菌容器内，标本有污染者应拒收。脓液标本采集操作规程1概述组织或器官的化脓性感染，其病原菌的来源可分为两类：内源性（感染源是炎症局部周围器官中的正常菌群
34、）和外源性（感染源是存在于外界的微生物）.2物品准备与申请2.1领取无菌试管。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征局部组织或器官有化脓性感染表现，应进行细菌培养。4 采集方法4.1 开放脓肿 用无菌盐水或70酒精擦去表面渗出物，用拭子深入溃疡基底部或边缘部，采集两个拭子，分别做培养和革兰染色，也可对渗出物做需氧培养。开放病灶不能做厌氧培养。4.2 闭锁
35、脓肿 不能用拭子，要消毒脓肿表面皮肤后用无菌注射器抽取，刺入无菌橡皮塞中送检。4.3 烧伤伤口 清创，出现渗出物后用拭子用力采集，仅做需氧培养。也可送组织标本。4.4 脓疱或水疱 酒精消毒，干燥，用针头（小儿用23号针头）挑破脓疱，用拭子采集脓疱液和基底部标本。4.5 注意事项：对大多数开放伤口，采集前应先清创，去除表面菌群。除非有渗出物，干燥、结痂伤口一般不做培养。闭合脓肿应取穿刺物和脓肿壁标本。开放脓肿处理同开放伤口。不要仅仅送检脓液，应在病灶活动区域或基底部采集标本，最好是组织标本。5 标本运送和验收5.1 标本采集后应尽快送检，如果在1h内不能培养，应将标本冷藏。5.2标本验收与拒收:
36、标本拭子未装入无菌容器内或注射器渗漏污染者，送检时间过长者应拒收。标本涂片革兰染色若发现上皮细胞，提示标本已被污染，一般不适合再做培养。生殖道标本采集操作规程1概述生殖道标本的细菌学检验是协助诊断生殖道感染的重要手段。生殖器官标本中常见的病原菌有葡萄球菌、肠球菌、链球菌、酵母样菌、淋病奈瑟菌、肠杆菌科菌、铜绿假单胞菌、阴道加德纳菌等。2物品准备与申请2.1领取无菌拭子。请拿检验申请单到病房二楼细菌室登记领取。细菌室周一到周六上午正常上班。其他时间如中午、夜班、节假日请到生化室联系。2.2填写检验申请单。用钢笔填写，字迹清楚，填写完整。填写内容包括：患者姓名、性别、年龄、科别、病区、床号、住院号
37、、临床诊断、送检目的、申请医生及送检时间。3 采集指征怀疑有生殖道细菌感染，应进行细菌培养。4 采集方法应由临床医师采集，收集于无菌试管内送检。淋球菌检查时，不论男女尿道及子宫颈均需用拭子插入尿道及子宫颈3cm深取样送检，要避免受阴道分泌物污染。4.1 男性标本: (1) 如疑为急性淋病奈瑟菌或其他化脓性细菌感染应在清洗龟头部后,以碘伏或其他非粘膜刺激性消毒剂消毒后,挤出分泌物立即以无菌棉拭子采取,立即送检,或以专用的细拭子插入尿道口12 cm ,旋转采取。(2) 如疑为前列腺炎、精囊炎或慢性淋病奈瑟菌感染应由医师按摩前列腺,以无菌手续自尿道口采取前列腺液送检。4.2 女性标本: (1) 成年
38、妇女自宫颈采取标本,应在扩阴器的支持下,选取有炎症或分泌物部位,先以无菌棉拭子拭去表浅层分泌物,再用另一拭子取宫颈分泌物送检。如做厌氧或真菌培养应另外采取标本。如怀疑淋球菌感染，应同时另外采集一份肛门拭子标本。(2) 如未成年幼女疑患性传播疾病时,不应使用扩阴器,应以无菌拭子在阴道口处采取分泌物送检。5 标本运送和验收5.1 标本采集后应置于无菌试管内尽快送检，禁止冷藏。5.2标本验收与拒收:未置于无菌容器内、淋球菌检查置于冰箱保存或未及时送检者应拒收。由于可能受其他形态相似的细菌干扰，阴道和宫颈标本一般不做革兰染色查淋球菌。参考文献1 叶应妩，王毓三，申子瑜.全国临床检验操作规程M.第3版,
39、南京:东南大学出版社,2006.738-7532 徐英春. 临床微生物学血培养操作规范J.中华检验医学杂志,2004,27(2):124-1253 CLSI, Principles and Procedures for Blood Cultures;Approved Guideline M47-A,20074 童明庆. 临床微生物学尿培养操作规范J.中华检验医学杂志,2005,28(10):10855 王金良，倪语星，徐英春.细菌性腹泻实验诊断规范M.上海:上海科学技术出版社, 4-56 倪语星，王金良，徐英春，胡必杰.病原学检查标本采集、运送和保存规范M.上海：上海科学技术出版社，2006.7 周惠平，王金良，周贵民等.临床微生物学标本采取和处理的规范化要求J.中华检验医学杂志，2000，23（5）：312-31