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1、精选优质文档-倾情为你奉上常用的氨基磁珠与羧基磁珠的异同点姓名:朱凡军联系方式:摘要:在蛋白的分离纯化领域中,传统的方法有很多,如柱层析分离,膜分离,有机溶剂提取法,等电点沉淀法,凝胶电泳等方法。在这些方法中都各有优缺点,但过程都比较复杂,操作步奏比较多,磁珠分离法克服了以上缺点,过程简单,步骤少。常用于蛋白质的分离纯化的磁珠有氨基磁珠、羧基磁珠、环氧基磁珠、羟基磁珠等。本文简单地叙述了氨基磁珠和羧基磁珠的异同点关键词:氨基磁珠、羧基磁珠、蛋白分离纯化、一、 相同点:1. 结构上的相同点:目前所使用的磁珠大多数都是“核-壳”结构,都是以具有超顺磁性的纳米微粒作为“核”,再在核的表面包裹上一层高
2、分子有机化合物和一层功能基层作为“壳”。2. 都是纳米级的微球颗粒,在溶液中具有较好的悬浮性,3. 在磁场中都会被磁化,在磁力的作用下聚集,极易与不具有磁性的物质分离开来。4. 功能上的相同点:都可以用于蛋白质、核酸、寡聚核苷酸等生物物质的行分离纯化,同时还可以用于微生物的检测,免疫检测,靶向给药等领域。5. 在用于提取蛋白过程中, 机理是相同的,都是利用磁场对已经负载有目标蛋白的超顺磁性磁珠的作用进行分离。6. 具有很好的生物相容性,能够在体内经肾脏排出,不参与体内的生理反应。7. 在使用过程中都不易对其进行离心、过滤等操作。否则将会使磁珠失去悬浮性,在每一次使用之前都必须进行活化。二、 不
3、同点:1. 结构上的不同点:在壳层结构中的功能基层所含的官能团不一样,氨基磁珠富含的是氨基(-NH2),羧基磁珠富含的是羧基(-COOH)2. 功能上的不同点:由于富含的功能基团不一样,所以使用的环境和机理也不一样,氨基带有负电性,显碱性,在碱性溶液里能够稳定存在,羧基显酸性,在酸性溶液里能够稳定存在。在与蛋白质偶联时,所使用的有机试剂也不一样,机理如图 氨基磁珠偶联过程中一般使用的是戊二醛,羧基磁珠使用的是EDC,氨基磁珠一般适用于提取偏碱性的蛋白,羧基磁珠适用于提取偏酸性的蛋白。三、 需要注意的几个环节1. 使用之前必须进行活化,活化试剂必须与磁珠相对应,2. 在所使用的溶液或试剂中不能够带有具有活性的氨基或羧基,否则会使磁珠失去结合位点。3. 不能够对磁珠进行离心、过滤等操作。否则会使其结团。4. 氨基磁珠不适宜在酸性溶液里使用,羧基磁珠不适宜在碱性溶液里使用。专心-专注-专业