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精选优质文档-倾情为你奉上流式细胞术的原理及操作一、概述1. 原理：特定波长的激光束直接照射到高压驱动的液流内的细胞，产生的光信号被多个接收器接收，一个是在激光束直线方向上接收到的散射光信号，一个是在激光束垂直方向上接收到的光信号，包括散射光信号（侧向角散射）和荧光信号。散射光信号和荧光信号被相应的接收器接收，根据接收到的信号的强弱波动就能反映出每个细胞的物理化学特征。2.流式细胞术的三大要素1）流式细胞仪：根据功能不同可以分为分析型流式细胞仪和分选型流式细胞仪，前者只能流式分析，不能分选纯化目标细胞；后者能够同时进行流式分析和分选。2）样品细胞：流式细胞术的检测对象是细胞，而且是呈独立状态的悬浮于液体中的细胞，即单细胞悬液。流式细胞术不能直接检测组织块中的细胞及分子。3）荧光染料或者荧光素偶联抗体：流式细胞术对样品细胞的物理化学特征的定量检测以光信号为基础，通过分析接收到的激光照射到细胞后的散射光信号和荧光信号完成定量分析。3.流式细胞术关注的是细胞的群体信息，而并非关注其中某一个细胞的特征。所以，流式细胞术得到的经常是一个比例值（如阳性比例），或者平均荧光强度等群体信息。4.流式细胞仪的基本结构：液流系统、光路系统、检测分析系统和分选系统1）液流系统：鞘液流和样品流2）光路系统：激光器3）检测分析系统：通道（光电倍增管）4）分析系统专心-专注-专业