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1、精选优质文档-倾情为你奉上1. 目的规范血涂片及染色操作程序,确保检测结果准确度。 2. 标本种类 人体静脉血或末梢血。3. 适用范围操作区的血涂片及染色。4染色原理血涂片染色过程既有物理吸附作用,又有化学亲和作用。由于血细胞内不同结构所含有的化学成分不同,对瑞氏染料亲和力也不同,涂片经染色后,各类细胞呈现不同的着色,从而达到辨别其形态、特征的目的。5. 试剂与器材5. 1 一次性采血针、末梢采血器、棉签、 碘酒等。5. 2 标准级显微镜载玻片、推片、瑞氏染液、OLYMPUS CH20双目显微镜(日本OLYMPUS公司)6操作步骤6.1 薄血膜推片法取血标本一滴置载玻片的一端1cm处或载玻片一
2、侧的34处。以边缘平滑的推片端,从血滴前沿方向接触血液,使血液沿推片散开,推片与载玻片保持2530的平面夹角,平稳地将血向前推动,血液即在载玻片上形成一薄层血膜;将制成的血膜在空气中挥动,使迅速干燥,以免血细胞皱缩。天气寒冷或潮湿时,应置于37温箱中保温促干,以免细胞皱缩。最后在载玻片的一端用记号笔编号。6.2 厚血膜涂片法取新鲜血液1滴于载玻片的中央,用推片的一角将血滴由内向外旋转涂布,制成厚薄均匀、直径约1.5cm的圆形血膜,待自然干燥后,滴加数滴蒸馏水,使红细胞溶解,脱去血红蛋白,倾去水,血涂片干燥后即可染色并用显微镜检查。本方法特别适合检查疟原虫、微丝蚴等。6.3 染色平置玻片于染色架
3、上加瑞氏染液35滴染色,使其迅速盖满血膜。约1分钟后滴加缓冲液布满,轻轻摇动玻片,使染色液充分混合。510分钟后,用水冲去染液,待干。7. 标本要求7.1 玻片必须清洁、干燥、中性且无油腻。7.2 最好使用非抗凝血,也可使用EDTA抗凝血,但必须在采集后4小时内制成血涂片。7.3 使用抗凝血标本不宜冷藏,用前必须混匀。8. 注意事项8.1 推制的涂片应厚薄适宜,血膜应呈舌状,头、体、尾清晰可分。8.2 涂片的好坏与血滴大小、推片与载片之间角度、推片时的速度有关,血滴大、角度大、速度快,则血膜厚;反之则血膜薄。8.3 血膜分布不匀,主要是推片边缘不齐、用力不匀或载玻片不清洁所致。8.4 瑞氏染液
4、使用后,要迅速盖好,避免挥发。8.5 血膜要干透后才能染色,否则染色时易脱落,应在1小时内染色。8.6 染色时间与染液浓度、室温及细胞多少有关,冬季室温过低时,染色时间要适当延长。8.7 冲洗时不能先倒掉染液,应以流水冲,防染料沉着。冲洗时间也不能长。8.8 染色过淡,可复染。 染色过深可用水冲洗或浸泡,还可用甲醇脱色。 参考文献1. 中华人民共和国卫生部医政司.全国临床检验操作规程(第3版).南京:东南大学出版社,2006.2. 江苏省卫生厅.医院检验科建设管理规范(第2版).南京:东南大学出版社,2013.3. 刘成玉,罗春丽.临床检验基础(第5版).M人民卫生出版社,2012.授权人:曹兴建质量负责人:史小波操作人员:急诊室人员专心-专注-专业