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1、精选优质文档-倾情为你奉上罗丹明B最新检测方法 罗丹明B检测套装：固相萃取柱：HiCapt罗丹明B专用柱(500mg/6mL，订货号：25-05006)液相色谱柱：Hisep C18-T 150 mm4.6 mm i.d., 5 m（订货号：）罗丹明B又称玫瑰红B,是一种具有鲜桃红色的人工合成的染料。曾经用作食品添加剂，但后来实验证明罗丹明B会致癌，现在已不允许用作食品染色。然而, 仍有不少食品生产企业将其作为食用色素。因此，建立快速可靠的检测方法非常重要。维泰克科技成功开发了罗丹明B专用SPE柱，建立了罗丹明B的快速检测方法和实验室液相色谱检测方法，该方法快速、简单、溶剂用量少，回收率稳定重
2、现，克服了传统方法中氧化铝固相萃取柱活性不易控制，方法回收率难以保证等缺陷。方法的优势： 专利创新的罗丹明B专用萃取填料，有效去除食品中的天然色素和植物油等杂质干扰 回收率稳定、重现，克服了传统方法中氧化铝活性不稳定的缺陷 方法简单、快速、节省溶剂 现场快速检测1. 样品提取：1.1 辣椒粉 取辣椒粉一小勺（约1g）放入10mL离心管中，加入6mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v），涡混1分钟，静置，待上层液较为清澈，取上清液3mL，准备过SPE柱。1.2 辣椒油取辣椒油一小勺（约0.5g）放入5 mL离心管中，加入3mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v），涡混1分钟，准备过S
3、PE柱。2. 过固相萃取（SPE）柱：HiCapt 罗丹明B专用SPE柱（500mg/6mL）将1.1或1.2中准备的样品慢慢倒入小柱中，然后取3mL甲醇慢慢倒入小柱，含罗丹明B的样品在柱上部会出现红色条带，在紫外灯照射下为颜色明亮的桃红色荧光色带，条带边缘清晰，粉红色随含量的增加而加深和加宽，不含或者含量极低（低于0.1g/g，罗丹明B的着色下限）的罗丹明B的样品，提取液不会出现粉红色条带。发现罗丹明B的阳性样品需进行液相色谱实验确证。液相色谱检测方法1 实验部分1.1 液相色谱条件色谱柱：HiSep C18 （4.6mm X 15cm，5m）流动相：甲醇/20 mM甲酸铵溶液(用甲酸调pH
4、 2.5)=7/3(v/v)流速：1 mL/min 进样量：20 L检测器: 紫外UV/VIS）检测器检测器波长：550nm1.2 标准溶液的配制称取50 mg 罗丹明B于50 mL棕色容量瓶，用甲醇定容，即为1 mg/mL。接着取母液500 L于50mL棕色容量瓶，用提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）稀释到50 mL，即为10 g/mL，作为储备液于4 避光保存，且每周重新配制。每天所用的溶液是将储备液稀释为0.2-5 g/mL。1.3 样品前处理1.3.1样品提取：1.3.1.1 辣椒粉 取辣椒粉1.0 g，放入10 mL离心管中，加入6mL的提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/
5、v），涡混1分钟，超声10分钟，接着10000 r/min离心5分钟，取上清液3 mL，准备过SPE柱。1.3.1.2 辣椒油 取辣椒油0.5 g，放入5mL离心管中，加入3mL的提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v），涡混1分钟，准备过SPE柱。1.3.1.3 腊肠、果脯等食品将食品切成小丁，再称取1.0 g, 放入10 mL离心管中，然后步骤同2.3.1.1。1.3.2固相萃取柱净化：HiCapt罗丹明B专用柱(500mg/6mL)（1）活化：在HiCapt罗丹明B专用柱中依次加入2 mL提取液（乙酸乙酯/环己烷（1:1，v/v）活化。（2）萃取：将待净化液加入柱中，再用200L提取液
6、（乙酸乙酯/环己烷（1:1）淋洗样品管，一并加入SPE柱中，让其自然地流过萃取柱。流出液弃去。（3）清洗：待上样液完全流出后，用3 mL甲醇淋洗，淋洗液弃去。（4）解吸：3 mL 5%氨水的甲醇溶液解吸，用5mL的小样品管收集解吸液。（5）吹干及定容：解吸液50氮气吹干，加入200 L流动相溶解并定容。2 结果与讨论2.1 标准曲线与检出限将10 g/mL的罗丹明B储备液用流动相逐级稀释，配制1、0.5、0.2、0.1、0.05g/mL标准溶液，制作标准曲线。由表1可见，罗丹明B的线性关系良好，相关系数的平方为0.99999。以性噪比的3倍和10倍分别计算检出限（LOD）和定量限(LOQ),分
7、别为16 ng/g和53 ng/g。表1线性回归方程、LOD及LOQ分析物线性范围线性回归LODng/g(S/N=3)LOQng/g(S/N=10)abr2罗丹明B0.05-2.95-1088.020.999991653* y = ax + b, y = peak area, x = mass concentration g/mL2.2 回收率和精密度分别加入低、中、高3种质量浓度的罗丹明B标准溶液于辣椒油样品中，然后按照本实验方法进行测定，回收率为84.14%-88.23%（见表2）。图1为添加罗丹明B的辣椒油样品的色谱图。从该图可以看出，没有杂质干扰。且该方法具有较好的日内及日间精密度（见
8、表2），其标准偏差分别小于4.73%和3.47%。表2 方法的回收率和日内、日间精密度分析物添加水平(g/g)回收率(%)RSD%日内(n=5)日间(n=3)罗丹明B0.0285.544.733.470.184.141.711.330.588.231.611.71图1.经固相萃取净化后的加标辣椒油的色谱图(a.空白辣椒油；b.辣椒油中添加0.02 g/g 罗丹明B；c.辣椒油中添加0.1g/g罗丹明B；d.辣椒油中添加0.5g/g罗丹明B)2.3实际样品分析按本方法测定不同来源的辣椒粉、辣椒油、香肠、果脯、甜辣酱等共17件。其中从b辣椒粉中检出罗丹明（图2），经LC-MS/MS检测，确证为阳性。专心-专注-专业