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精选优质文档-倾情为你奉上授课对象： 06级检验1-5班课 时： 2学时甲胎蛋白（AFP）测定目 标：1.掌握ELISA法测定AFP的原理及注意事项 2.熟练地进行AFP测定 3.了解AFP测定的主要临床意义实验用品： AFP测定试剂盒、酶标仪内 容：原理：本试剂盒采用针对抗原不同，决定簇的双单克隆抗体分别制备成包被板和酶结合物，利用ELISA双抗夹心法原理检测人血清中AFP含量。操作步骤：1. 加样：将包被孔编号，留1孔作空白对照，其余孔用微量加样器依次加入标准及待测样品各100ml。2孵育：置37温育30min。3洗涤：甩去孔内液体，在各孔内加入洗涤液2滴，轻轻震荡35次，弃之，然后用蒸馏水加满各孔，甩掉；反复5次最后在吸干纸上拍干。4加酶结合物：每孔加入酶结合物100ml，空白孔不加。5置37温育15min。6重复步骤“3”。7显色：每孔加入底物50l，再加显色剂50l，充分混匀，室温避光反应25min。8终止：每孔加终止液50l，终止反应。参考范围： 020 g/L注意事项：1操作前请仔细阅读说明书，应严格控制反应温度和时间。2试剂盒使用前要充分恢复到室温。3洗涤要彻底，防止假阳性，但不可洗涤过猛过急，而致假阴性。课后小结：专心-专注-专业