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1、精选优质文档-倾情为你奉上实验二 紫外-可见分光光度计法测定高锰酸钾溶液浓度一、实验目的1. 熟悉掌握UV-9600型分光光度计的使用方法。2. 学习标准曲线定量方法。并利用吸收曲线测定样品中组分的含量。二、原理：紫外-可见光谱是用紫外-可见光测量获得的物质电子光谱，它研究由于物质价电子在电子能级间的跃迁，产生的紫外-可见光区的分子吸收光谱。当不同波长的单色光通过被分析的物质时，测得不同波长下的吸光度或透光率，以ABS为纵坐标，波长为横坐标作图，可获得物质的吸收光谱曲线。一般紫外光区为波长范围为190-400nm，可见光区的波长范围为400-800nm。根据朗伯比尔定律：A = lgI0/I
2、= abcA：吸光度；I0：透过光的强度；I：入射光的强度；a：物质对光的吸光系数（通常只和物质性质有关）；b：吸收池的长度；c：待测物的浓度。如果固定吸收池的长度，已知物质的吸光度和其浓度成线性关系，这是紫外可见光谱法进行定量分析的依据。采用外标法定量时，首先配制一系列已知准确浓度的高锰酸钾溶液，分别测量它们的吸光度，以高锰酸钾溶液的浓度为横坐标，以各浓度对应的吸光度值为纵坐标，作图，即得到高锰酸钾在该实验条件下的工作曲线。取未知浓度高锰酸钾样品在同样的实验条件测量吸光度，就可以在工作曲线中找到它对应的浓度。三、仪器和试剂1ml和10ml移液管各一支 10ml比色皿1. UV-9600型分光
3、光度计，比色皿1cm的4个；2. 容量瓶100ml的4个；3. 移液管 1 ml、5 ml和10 ml各一个；4. 容量瓶1000 ml的1个；5. 烧杯 500 ml的1个；四、实验步骤1KMnO4溶液的配制称取1.58g高锰酸钾固体，置于烧杯中溶解，定容至1000mL，混匀，该溶液浓度为0.01 molL-1。2KMnO4溶液吸收曲线的制作用吸量管移取上述高锰酸钾溶液1.0、2.0、4.0、8.0mL，分别放入四个100mL容量瓶中，加水稀释至刻度，充分摇匀，各溶液KMnO4浓度分别为0.0001 molL-1、0.0002 molL-1、0.0004 molL-1、0.0008 molL
4、-1。在525 nm波长测定A525值，以高锰酸钾溶液浓度为横坐标，A545值为纵坐标，绘制标准曲线。项目12345KMnO4浓度/molL-100.00010.00020.00040.0008A5253. 样品测试配制待测高锰酸钾溶液1ml，加入蒸馏水3ml，摇匀，测定A525，从标准曲线中查出高锰酸钾溶液浓度。五、注意事项：1、比色皿透光面不要沾污，不能有指印，禁止用粗糙的纸张擦拭，溶液不要倒得太满（约3/4）以免溅出。2、比色皿座位置应统一为靠近单色光孔的一面。3、仪器在使用时，应经常关闭光路闸门来核对检流计的“0”点的位置是否改变。4、测定时应尽量使吸光度值在0.10.8的范围内进行，以获得较高的准确度。5、比色皿使用完毕，应用蒸馏水洗净，用细软而易吸水的擦镜纸擦干，存放于比色皿盒中，使用时保护好比色皿的透光面。专心-专注-专业