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1、. .一、 解释概念菌落：在固体培养基上，有单个细菌繁殖形成的肉眼可见的子细菌群体荚膜：某些细菌在其生活中可在细胞壁的外周形成一层包围整个菌体、边界清楚地粘液样物质黏液层：有些细菌分泌一层很疏松、与周围边界不明显、易与菌体脱离的黏液样物质，称为黏液层鞭毛：多数弧菌、螺菌、许多杆菌、个别球菌的菌体表面长有一至数十根弯曲的丝状物，称为鞭毛培养基：是人工配制的基质，含有细菌生长繁殖必需的营养物质杀菌作用：是指某些物质或因素具有在一定条件下杀死微生物的作用。抑菌作用:是指某些物质或因素具有抑制微生物生长、繁殖的作用。抗菌作用:某些药物具有的抑制或杀灭微生物的作用，统称为抗菌作用灭菌：消灭物体上所有微生
2、物的方法，包括杀灭细菌芽胞、霉菌孢子在内的全部病原微生物和非病原微生物消毒：杀灭物体上病原微生物的方法仅要求达到消除传染性的目的，而对非病原微生物及其芽胞、孢子并不严格要求全部杀死防腐：阻止或抑制物品上微生物生长繁殖的方法，微生物不一定死亡无菌操作：采取防止或杜绝任何微生物进入动物机体或其他物体的方法的进行的操作称为无菌操作抗生素：某些微生物在代谢过程中产生的一类能抑制或杀死另一些微生物的物质称为抗生素植物杀菌素：某些植物中存在有杀菌物质，这种杀菌物质一般称为植物杀菌素细菌素：是某些细菌产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与它同种不同菌种的细菌以及与它亲缘关系相近的细菌噬菌体：噬菌体是寄
3、生于细菌、真菌、螺旋体、放线菌等的一类病毒，也称细菌病毒感染：是指病原微生物在宿主体内持续存在或增殖病原菌：是指那些导致机体发病的细菌，是一群高度特化了的微生物，为了自身的生存，已适应而且必须在宿主生物体内持续存在或增殖，有时可造成宿主发病半数致死量：是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内死亡一半所需的微生物量或毒素量半数感染量：某些病原微生物只能感染实验动物、鸡胚或细胞，但不引致死亡。是指能使接种的实验动物在感染后一定时限内感染一半所需的微生物量或毒素量侵袭力：病原菌在机体内定殖，突破机体的防御屏障，内化作用，繁殖和扩散，这种能力称为侵袭力细菌的遗传：是指亲代细菌与子代细菌的相似性，它使细
4、菌的性状保持相对稳定，是细菌存在的依据质粒：质粒是细菌染色体外的遗传物质，多为环状双螺旋DNA分子。转化：供体菌裂解游离的DNA片段被受体直接摄取，使受体菌获得新的遗传性状的过程称为转化转导：以温和噬菌体为媒介把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中通过交换与整合使受体菌获得供体菌部分遗传性状称为转导接合：是两个完整的细菌细胞通过性菌毛直接接触，由供体细菌将质粒DNA转移给受体细菌的过程病毒（粒）子：一个形态和结构上完整的病毒颗粒称为病毒(粒)子核衣壳：由核酸组成的芯髓被衣壳包裹，衣壳与芯髓在一起组成核衣壳原代细胞：动物组织经胰蛋白酶等消化、分散，获得单个细胞，再生长于培养皿中。二倍体细胞株：将长
5、成的原代细胞消化分散成单个细胞，继续培养传代，其细胞染色体数与原代细胞一样，仍为二倍体。传代细胞系：与原代细胞与二倍体细胞株不同，这类细胞在体外可无限制分裂，亦可无限制传代。细胞病变：细菌感染导致的 细胞损伤称之为细胞病变空斑：病毒样本接种吸附于单层细胞，经一段时间培养，进行染色，原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞会形成一个近似圆形的斑点，类似固体培养基上的菌落形态，称之为空斑。包涵体：是某些病毒感染细胞产生的特征性的形态变化，可通过固定染色而后在光学显微镜下检测。隐蔽期：在病毒感染细胞之后的一个短时间内，病毒完全消失，甚至在细胞内也找不到传染性的病毒颗粒，直至感染数小时后子代病毒出现为止
6、，这阶段称为隐蔽期。血凝作用：某些病毒能凝集红细胞，称为病毒的血凝作用。血凝抑制作用：病毒的特异抗体可抑制其血凝作用，称为血凝抑制作用。螺旋体：是一类菌体细长，柔软、弯曲呈螺旋状、能活泼运动的原核单细胞微生物钩端螺旋体：菌体纤细、螺旋致密，一端或两端弯曲呈钩状的螺旋体支原体： 支原体是一类无细胞壁的微生物，具多形性，可通过细菌滤器立克次氏体：立克次氏体是一类专性细胞内寄生的小型革兰阴性原核单细胞微生物 衣原体：是一类形态相似，能通过滤器、营严格细胞内寄生，有独特生活周期的革兰氏阴性的原核生物真菌：真菌是一大类真核微生物，不含叶绿素，无根、茎、叶、营腐生或寄生生活；仅少数类群为单细胞，其余为多细
7、胞；大多数呈分支或部分支的死状体；能进行有性和无性繁殖。 菌丝：是单条管状细丝，为大多数真菌的结构单位孢子：孢子是生物所产生的一种有繁殖或休眠作用的细胞，能直接发育成新个体细菌素：某种细菌在生长繁殖过程中产生的一种具有杀菌作用的蛋白质，只能作用于与他同种不同菌株的细菌以及与他亲缘关系相近的细菌毒性噬菌体：能使宿主细胞 迅速裂解引起溶菌反应的噬菌体温和噬菌体：有些噬菌体侵入宿主细胞后，将其基因整合与细菌的基因组中，与细菌DNA一道复制，并随细菌的复制传递给后代，不形成病毒粒子，不裂解细菌空斑形成单位（PFU）：将噬菌体按一定倍数稀释，通过噬菌体计数，可测的每毫升容积内的空斑形成单位数。致病性：一
8、定种类的病原菌在一定的条件下，能在宿主体内引起感染的能力毒力：病原菌致病力的强弱程度，是菌株的特征内化作用：某些细菌粘附于细胞表面后，能进入吞噬细胞或非吞噬细胞内部的过程毒力岛：指病原菌的某个或某些毒力基因群，分子结构和功能有别于细菌染色体，但位与细菌染色体之内变态反应：动物患某些慢性传染病时，可对病原体或其产物的再次进入产生强烈的反应串珠反应：在含青霉素0.5U/ml的培养基中，幼龄炭疽杆菌因细胞壁的肽聚糖合成受到抑制，形成原生质体相互连接成串Ascoli沉淀反应：用加热抽提待检炭疽菌体多糖抗原与已知抗体进行的沉淀实验1.试述脂多糖和外膜蛋白的组成和功能。答：脂多糖：为革兰阴性细菌所特有，位
9、于外膜的最表面，厚8-10nm，由类脂A，核心多糖和侧链多糖三部分组成。具有控制细胞的透性，提高Mg2+浓度，决定细胞壁抗原多样性等作用，因而可用于传染病的诊断和病原的地理定位，其中的类脂A更是G-病原致病物质内毒素的物质基础。外膜蛋白：微孔蛋白 分子筛作用，与细菌的粘附和特定物质摄取有关；脂蛋白 使肽聚糖与外膜层牢固，噬菌体吸附的受体，参与营养物质转运。2.试述细菌特殊结构的概念和功能。仅在部分细菌中才有的或在特殊环境条件下才行成的构造称为特殊构造。主要是荚膜，S层，鞭毛，菌毛，性菌毛和芽孢等。荚膜 某些细菌在其细胞壁外包绕一层粘液性物质，用理化反应消除后并不影响细胞的生命活动1）抗吞噬作用
10、2）抗有害物质的损害作用3）营养物质的贮存场所与废物排出之地。 S层 某些细菌的一种特殊的表层结构，完整包裹菌体，由单一的蛋白质亚单位组成，排列规则呈晶格样结构 1）分子筛和离子通道2）屏障作用3）粘附宿主细胞4）重要的表面抗原。鞭毛 由鞭毛丝，鞭毛钩基体组成鉴定价值，鞭毛是细菌的运动器官，细菌能否运动可用于鉴定。致病作用：鞭毛运动能增强细菌对宿主的侵害，因运动往往有化学趋向性，可避开有害环境或向高浓度环境的方向移动。抗原性：鞭毛具有特殊H抗原，可用于血清学检查。 菌毛 普通菌毛是细菌的粘附器官，细菌藉菌毛的粘附作用使细菌牢固粘附在细胞上，并在细胞表面定居，导致感染 性菌毛 具有向雌性菌株传递
11、遗传物质的作用，有的还是RNA噬菌体的特异性吸附受体。 芽孢某些细菌在一定的环境条件下，能在菌体内部形成一个圆形或卵圆形小体，是细菌的休眠方式。所有产生芽孢都是革兰阳性菌。其特点是：芽胞的抵抗力很强；代谢停止，处于休眠状态，但保持潜在的萌发力；不是繁殖器官，一个芽孢只产生一个营养状态得细胞 研究芽胞的意义：1）芽孢的抵抗力强，是重要的传染源2）芽孢可作为可靠的灭菌指标。3.试述革兰氏染色的意义和原理。 其重要的临床意义在于：1.鉴别细菌 2.选择药物 3.与致病性有关：革兰氏阳性菌能产生外毒素，革兰氏阴性菌能产生内毒素，两者的致病作用不同。原理如下：通过结晶紫初染和碘液媒染后，在细胞壁内形成了
12、不溶于水的结晶紫与碘的复合物，革兰氏阳性菌由于其细胞壁较厚、肽聚糖网层次较多且交联致密，故遇乙醇或丙酮脱色处理时，因失水反而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇处理不会出现缝隙，因此能把结晶紫与碘复合物牢牢留在壁内，使其仍呈紫色；而革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层类脂含量高、肽聚糖层薄且交联度差，在遇脱色剂后，以类脂为主的外膜迅速溶解，薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘复合物的溶出，因此通过乙醇脱色后仍呈无色，再经沙黄等红色染料复染，就使革兰氏阴性菌呈红色。4.细菌新陈代谢的特点是什么？1.细菌生长和繁殖地速度极快、超过动物细胞的10100倍；2.细菌利用各种化合物作为能源的能力远远强于动物
13、细胞3.细菌对营养的需求比动物细胞更为多种多样，因为他们有多种代谢旁路4.细菌可利用超常流水线式生产地方式生成大分子物质5.细菌能产生诸如肽聚糖磷壁酸等特殊物质5.物质摄取的方式有哪几种？各有何特点？答：单纯扩散：靠浓度差转运；不需要能量；不需要载体；速度慢 促进扩散：靠浓度差转运；不需要能量；有特异性载体蛋白参加；速度快主动运输：需要特异性的载体蛋白；逆浓度梯度；需要能量基因转位：需要载体蛋白；需要能量；在转运过程中物质发生了化学变化；主要存在厌氧菌和兼性厌氧菌中5. 细菌群体生长分期和各个期的特点是什么？答：迟缓期：菌体增大，代谢活跃，合成并积累所需酶系统。对数期：细菌此时生长迅速，以恒定
14、速度进行分裂繁殖，活菌数以几何级数增长，达到顶峰，生长曲线接近一条斜的直线。稳定期：此时营养的消耗、代谢产物的蓄积等，细菌繁殖速度下降，死亡数逐步上升，新繁殖的活菌数与死菌数大致平衡。衰亡期：细菌开好似大量死忙，死菌数超过活菌数。6.按功能细菌培养基分几类？答：鉴别培养基：用于培养和区分不同种类细菌的培养基，如：伊红 美兰和麦康凯琼脂。选择培养基：在培养基中加入某种化学物质，如：SS平板。厌氧培养基：是为培养厌氧菌而设计的，方法是在培养基中加入还原剂如巯基乙酸钠等7.试述主要的细菌生化反应及用途。答：氧化酶试验：在有分子氧或细胞色素存在时，可氧化对二苯二胺出现紫色反应。试验用于检验细胞是否有氧
15、化酶的存在。触酶试验：触酶又名接触酶或过氧化氢酶，滴加过氧化氢能立即出现气泡，因过氧化氢被催化分解为水和氧气。乳杆菌等许多厌氧菌为阴性氧化发酵试验（O/F试验）：不同细菌对不同糖的分解能力及代谢产物不同，有的能产酸并产气，有的则不能。而且这种分解能力因是否有氧的存在而异，在有氧条件下称为氧化，无氧条件下称为发酵。试验时往往将同一细菌接种相同的糖培养基一式两管，一管用液体石蜡等封口，进行发酵，另一管置有氧条件下。培养后观察产酸产气情况。O/F试验一般多用葡萄糖进行VP试验：大肠杆菌和产气肠杆菌均能发酵葡萄糖，产酸产气，两者不能区别。但产气肠杆菌能使丙酮酸脱羧，生成中性的乙酰甲基甲醇，后者在碱性溶
16、液中被空气中的分子氧所氧化，生成二乙酰与培养基中含胍基的化合物发生反应，生成红色化合物，是为阳性。大肠杆菌不能生成乙酰甲基甲醇，故为阴性甲基红试验:在VP试验中，产气肠杆菌分解葡萄糖，产生2分子酸性的丙酮酸转变为1分子中性的乙酰甲基甲醇，故最终的酸类较少，培养基PH5.4，以甲基红作为指示剂时，溶液呈橘黄色，是为阴性。大肠杆菌分解葡萄糖时，丙酮酸不转变为乙酰甲基甲醇，故培养液酸性较强，PH4.5,甲基红指示剂呈红色，则为阳性8.什么是火焰灭菌法、热空气灭菌法、煮沸灭菌、巴氏消毒法、间歇灭菌法、高压蒸汽灭菌法、滤过除菌？叙述各方法的应用。答：火焰灭菌法：火焰直接灼烧，如接种环热空气灭菌法：指利用
17、干热灭菌器，以干热空气进行灭菌的方法。适用于高温下不损坏、不变质、不蒸发的物品。在干热情况下，由于热空气的穿透力较低，需在160C维持2h，才能达到杀死所有微生物及其芽孢、孢子的目的。煮沸灭菌：用于饮水一般器械如刀剑的消毒巴氏消毒法：是以较低温度杀灭液态食品中的病原菌或特定微生物，而又不致严重损害其营养成分和风味的消毒方法。目前主要用于葡萄酒，啤酒，果酒及牛乳等食品的消毒。具体方法分三类：低温维持巴氏消毒法，高温瞬时巴氏消毒法，超高温巴氏消毒法。 间歇灭菌法;用于一些不耐高温的培养基，如血清培养基 高压蒸汽灭菌法：即用高压蒸汽灭菌器进行灭菌的方法，是应用最广泛的、最有效的灭菌方法。凡是耐高温、
18、不怕潮湿的物品，如各种培养基、溶液、玻璃器皿、金属器械、敷料、橡皮手套、工作服和小动物尸体等均可用这种方法灭菌滤过灭菌：通过机械阻留作用将液体或空气中的细菌等微生物除去的方法，主要用于不耐高温的营养液，血清，抗生素，空气等除菌9.叙述紫外线杀菌法及其应用。答：波长200-300nm的紫外线（包括日光中的紫外线）具有杀菌作用。紫外线波长：136-400nm，以250-300nm很强，265-266nm最强。但其穿透力弱，紫外线的部分波长与DNA的吸收光谱X围一致，作用于DNA使同一条DNA链上的相邻的两个胸腺嘧啶共价结合而形成二聚体，干扰DNA复制与转录时的正常碱基配对，导致细菌致病性突变而死亡
19、。此外紫外线还可使空气中的分子氧变为臭氧，释放氧化能力强的原子氧，具有杀菌作用。用于微生物实验室、无菌室、手术室、传染病房、种蛋室等的空气消毒，或用于不能用高温或化学药品消毒物品的表面消毒10.试述细菌具有致病性的主要依据（柯赫法则）。 答：第一，特殊的病原菌应在同一疾病中查见，在健康者不存在。第二，此病原菌能被分离培养而得到纯种。第三，此纯培养物接种易感动物，能导致同样病症。第四，自实验感染的动物体内能重新获得该病原菌的纯培养。11.如何从分子水平上解释柯赫法则？答：第一，应在致病菌株中检出某些基因或其产物，而无毒力菌株中没有；第二，如有毒力菌株的某个基因被损坏，则菌株的毒力应减弱或消除。或
20、者将此基因克隆到无毒菌株内，后者成为有毒力菌株；第三，将细菌接种动物时，这个基因应在感染的过程中表达；第四，在接种动物检测到这个基因产物的抗体，或产生免疫保护。12.什么是细菌外毒素？其基本特性是什么？细菌外毒素在生长过程中由细胞内分泌到细胞外的毒性物质。能产生外毒素的细菌大多数是革兰氏阳性菌，少数是革兰氏阴性菌。将产生外毒素的细菌的液体培养物用滤菌器过滤除菌，即能获得外毒素。其特点是：（1）化学成分是蛋白质，分子量为27000900000道尔顿；（2）不稳定，易被热、酸及酶所灭活；（3）可经甲醛（0.30.4）处理，脱毒成为类毒素；（4）抗原性强，可刺激机体产生高效价的抗毒素；（5）具亲组织
21、性，但作用于组织有选择性。一般不引起宿主发热，但常可抑制宿主蛋白质的合成，对宿主有细胞毒及神经毒性；（6）毒性极强，极微量就可使实验动物死亡。13.什么是细菌内毒素？其基本特性是什么？内毒素特指革兰氏阴性菌外膜中的脂多糖(LPS)成分，细菌在死亡后破裂或人工裂解后释放。革兰氏阳性菌细胞壁中的脂磷酸(LTA)具LPS活性，不致热。特性：内毒素耐热：100，1h不破坏；不能被甲醛脱毒成类毒素；抗原性弱，抗体无中和内毒素作用。14.什么细菌的遗传和变异？ 答：所谓遗传，系指亲子代细菌与子代细菌的相似性，它使细菌的性状保持相对稳定，是细菌存在的根据。所谓变异，系指亲代与子代细菌之间的不相似性，它使细菌
22、得以进化。15. 质粒有哪些主要特征？可赋予宿主菌那些主要特性？答：质粒是细菌出染色体外的遗传物质，编码细菌的各种重要的遗传生物学性状。特点：可以自身复制；编码各种重要的生物学性状；可自行丢失或经人工方法消除；不仅可以发生在同种属之间，还可以发生在不同种属之间；具有相容性和不相容性16.叙述细菌的遗传与变异的实际应用意义。答：微生物学诊断；疾病治疗和预防17. 细菌基因转移和重组的方式有哪些？答：转化：供体菌游离的DNA片段直接进入受体菌，使受体菌获得新的性状 转导：以温和噬菌体为媒介，把供体菌的DNA小片段携带到受体菌中，功过交换和整合，使受体菌获得供体菌的部分遗传性状。普遍性传到：被装入的
23、DNA片段可以是供菌体染色体上的任何部分。局限性传导：为噬菌体所介导的供体染色体ishang个别特定基因的转导。18.螺旋体，霉形体、立克次体、衣原体的主要生物学特性答：螺旋体1.形态：螺旋状，有些可通过细菌滤器或滤膜。2.结构：原生质柱、轴鞭毛、外鞘。3.运动性：运动活性4.繁殖方式：以二分裂法繁殖5：核酸：核酸兼有RNA和DNA。6.染色：革兰氏阴性，但大多数不易着色。7.培养特性：多数需厌氧培养，营养要求较高，有些不能用人工培养基培养。霉形体1.无细胞壁，细胞柔软，多形性，能通过细菌滤器2.在人工培养基中生长繁殖，形成“煎荷包蛋状”菌落3.含有DNA和RNA4.以二分裂或芽生方式繁殖5.
24、对青霉素有抵抗力立克次体1.多形性，主要是球状杆2.大小介于细菌和病毒之间，多数不能通过细菌滤器3革兰氏阴性，有细胞壁4.专性细胞内寄生5.以二分裂方式繁殖6.对理化因素抵抗力不强，犹对热敏感7.主要寄生于节肢动物中，通过叮咬感染人和动物衣原体：革兰氏阴性，圆形或椭圆形2.含DNA和RNA两种核酸3.有由黏肽组成的细胞壁4.细胞内寄生5.独特地发育周期，并以二分裂方式繁殖6.对某些抗生素敏感病毒总论1.病毒的核衣壳对称型有那些？各自的特点是什么？答：病毒的核衣壳主要有螺旋状对称和20面体对称两种对称类型，少数为复合对称。各自的特点为：（一）螺旋状对称 病毒衣壳呈螺旋状的空心圆筒，衣壳单体直接与
25、螺旋状的核酸相连接，并不聚集成壳粒。衣壳的直径因病毒的种类不同而差异。有的盘曲，有的不易弯曲。（二）20面体对称 由20个等边三角形构成，有20个面、12个角、30条边。凡是20面体的衣壳必然是2：3：5对称。在衣壳上排列的圆形颗粒，称为壳粒子。它是衣壳的形态单位，每一壳粒基本上由5个或6个单体组成，前者称为五邻体，后者称为6邻体。（三） 复合对称 其壳粒排列既有螺旋对称又有立体对称的型式，如痘病毒、噬菌体。2.病毒的概念及特点答：形体微小，结构简单，仅含有一种核酸DNA或RNA，具有超级寄生性，且必须在电子显微镜下才能观察到的一类非细胞形态的微生物。特点：1.形体微小，缺乏细胞结构2.只含有
26、一种核酸，DNA或RNA；3.以自身的核算为模版进行复制；4.缺乏完整地酶和能量系统；5.严格的细胞内寄生3.病毒的化学组成答：一.核酸：决定病毒的遗传和变异。1.病毒只含有一种核酸，构成病毒的芯髓。2.核酸类型多样化3.病毒基因组核算复制多样化4.基因组结构简单，所含基因组数目多。5.病毒核酸更易受宿主细胞的影响而发生基因突变和重组6.有些病毒去除囊膜和衣壳，裸露的DNA或RNA也能感染细胞，这样的核酸成为感染性核酸。具备条件：病毒核酸能作为mRNA或者能利用宿主细胞的RNA聚合酶转录病毒的mRNA 病毒核酸不分节段。二、 蛋白质：1.非结构蛋白：指由病毒基因组编码的，在病毒复制或基因表达调
27、控过程中具有一定功能，但不结合于病毒颗粒中的蛋白质2.结构蛋白：是指构成一个形态成熟的有感染性的病毒颗粒所必须的蛋白质。是构成病毒衣壳的全部成分和囊膜的主要成分。4.病毒的复制和复制周期答：病毒在活细胞内，以其基因为模板，在酶的作用下，分别合成病毒基因及蛋白质，在组装成完整的病毒颗粒，这种方式成为复制。从病毒进入宿主细胞开始，经过基因组复制给病毒蛋白合成，至释放出子代细胞的全过程，成为一个复制周期。5.试述双股DNA病毒，单链正股RNA病毒、单股负股RNA病毒和逆转录病毒的增殖过程。6.病毒的基本特征是什么？答：1、病毒只含有一种核酸，DNA或RNA，而其他微生物有两种核酸同时存在。2、病毒是
28、严格的胞内寄生微生物，它没有完整的代谢酶系统，也无进行独立生长、增殖的其他结构。3、病毒没有核糖体和tRNA，也无合成蛋白质所必需的酶。在其mRNA进行转录时，完全利宿主细胞的物质。4、病毒不经过繁殖，而是通过其核酸通过复杂的生物合成，获得大量不同组分，进行装配增殖。5、病毒对抗生素和作用于微生物代谢途径的药物不敏感。绝大多数病毒对干扰素敏感。6、有些病毒的核酸能整合到宿主细胞的DNA中去，从而诱发潜伏性感染。 7、简要叙述病毒的增殖过程。答：吸附期，病毒要进入细胞内，首先要吸附在易感细胞表面。（2）进入期病毒通过吞饮方式或直接进入方式进入细胞内。（3）脱壳期，病毒进入细胞内后，脱去衣壳，才开
29、始复制（4）生物合成期，病毒进行基本复制和子代蛋白质的合成。（5）病毒的装配和释放，病毒在细胞内装配成完整的病毒子，然后通过不同方式释放到细胞外8、列举出动物病毒转录mRNA的基本模式。P3049、有囊膜的病毒如何成熟与释放？答：有囊膜的病毒以出芽的方式成熟，有细胞膜出芽及胞吐两种形式10、病毒病的微生物学检验程序。答：(一)、样品采集和递送及处理(二)、镜检1、光学显微显镜检查 包涵体：内基氏小体；细胞的病变特征：非化脓性脑炎。2、电子显微镜检查：主要有：形态、大小、构造；目前尚难培养的病毒；免疫电镜等。优点是：快速、肯定、无需培养，可以检查到混合感染；缺点是：不敏感（106ml）、判别困难
30、、效率低。成本昂贵。常用的技术：负染法、超薄切片法和免疫电镜法等。(三)、病毒分离培养鉴定分离培养：动物接种原动物/实验动物 鸡胚接种尿囊腔、卵黄囊、尿囊膜、羊膜腔等 细胞培养原代细胞 ； 二倍体细胞 ； 技术克隆/扩增； 传代细胞组织块培养肠管、气管环等 鉴定：生物学特性鉴定；血清学鉴定（对病毒）；病毒特性： 如血凝性；分子生物学技术等(四)、血清学检查： 双份血清法（检抗体）HA、HI、补反、 放射元素荧光酶标记 中和试验(五)、分子生物学技术 核酸酶切图谱 核酸探针 PCR技术等 其他病原微生物7、支原体的一般特性是什么？答：支原体属是一类能营独立生活的最小、最简单的原核生物。特征是生长
31、时需要外源脂肪酸和甾醇。支原体细胞柔软，高度多形性，基本形态为球形和丝状。支原体无细胞壁。由细胞膜、细胞质、核糖体和原核细胞核组成。革兰氏染色阴性，但不易着色，姬姆萨染色呈淡紫色。支原体可在人工培养基上繁殖，营养要求较高。生长适宜PH7.68.0。5%CO2可促进其生长。固体培养基上生长缓慢,2-6天长出微小“荷包蛋”样菌落。支原体也可在鸡胚绒毛尿囊膜和细胞培养中生长。在动物血清和鸡蛋黄培养基上生长后，形成“薄膜”及“斑点”。“薄膜”在菌落表面，内含胆固醇和磷脂；“斑点”位于菌落下方或周围，由钙镁等盐类组成。 支原体广泛分布于污水、土壤、植物、动物和人体中，腐生、共生、寄生，常污染实验室的细胞
32、培养及生物制品，有30多种对人或畜禽有致病性。阳性：金黄色葡萄球菌（无不） 链菌属（无不） 李氏杆菌（无运） 丹毒丝菌属（无不） 炭疽芽胞杆菌（有不） 梭菌（产气（有不），破风（有运）分支杆菌（无不）阴性;大肠杆菌（不）沙门杆菌（运）弧菌属 嗜水气单胞菌 巴氏杆菌 里氏杆菌（无不） 嗜血杆菌（无不） 布氏杆菌（无不）革兰阳性球菌葡萄球菌属 一、致病性和毒力因子毒力因子主要包括酶和毒素，可引起侵袭性疾病：主要引起化脓性炎症。通过各种途径侵入机体，导致皮肤或器官的多种感染，甚至败血症。毒素性疾病：与葡萄球菌产生的外毒素引起。1. 毒素 损伤细胞膜的毒素，对多种哺乳动物红细胞有溶血作用2. 肠毒素，
33、按抗原性不同，分为A、B、C1、C2、C3、D和E7个血清型均可引起急性肠胃炎即呕吐为主要症状的食物中毒3. 凝固酶 能使含有抗凝剂的血浆发生凝集的酶类物质，分为游离凝固酶：是液体纤维蛋白原变成固体纤维蛋白。结合凝固酶：是纤维蛋白原与菌体交联而使菌体凝聚。作用：有助于致病菌株抵抗吞噬细胞和杀菌物质。4. 耐热核酸酶，纤维蛋白溶酶，透明质酸酶等有利于细菌扩散 二、微生物学诊断 1.标本的采集；2.直接涂片检查；3.分离培养 ；4.鉴定：纯培养物 1致病性葡萄球菌的鉴定：（1）产生凝固酶和耐热核酸酶（2）产生金黄色色素，有溶血性（3）发酵甘露醇2 葡萄球菌肠毒素的检查：做细菌分离鉴定的同时，接种至
34、肉汤培养基，培养后取滤液注射至6-8周的幼猫链球菌属 一、兰氏分群法 兰氏用温热的稀盐酸浸出C抗原，与特异性血清作沉淀反应，将链球菌分为20个血清群（A-V，缺I和J）。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同，又分为不同型。二、根据溶血现象分类（1）型：菌落周围又不透明溶血环型：完全透明无色的溶血环，致病力强型：不产生溶血素，无溶血环三、微生物学诊断 1.标本的采集；2.直接涂片检查；3.分离培养 接种血平板，观察菌落形态和溶血情况；4.鉴定：菌落形态、溶血特性、生化特征、细菌形态。如定群定型，则需要做血清学实验肠杆菌科埃希菌属一、培养特性 1.普通培养基上生长良好，光滑湿润、半透明、灰白色菌落；
35、2.麦康凯琼脂上形成红色菌落，伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属光泽菌落3.致病菌株在绵羊血平板上 呈型溶血；4.生化特性：糖发酵试验；IMVIC实验（+）；H2S阴性 。周毛菌，最常见的大肠埃希菌俗称大肠杆菌 二、微生物学诊断 1.标本的采集；2.检查方法 分离培养 ：选择培养基；生化实验：糖发酵、IMVIC实验（+）、H2S阴性 血清学实验：玻片凝集试验鉴定血清型沙门氏菌属 一、培养及生化特性 在选择培养基上因不发酵乳糖而呈无色菌落。IMVIC实验：+；多数菌株H2S阳性 二、微生物学诊断 1.标本的采集；2.检查方法 分离培养 ：选择培养基；生化实验：糖发酵、IMVIC实验（+）、H2S阳性
36、血清学实验：玻片凝集试验鉴定血清型弧菌属一、形态和培养特性：G-血平板生长有溶血性。嗜盐，大多数副溶血弧菌菌株对弧菌抑制剂0/129不敏感，而鳗弧菌极为敏感。 二、微生物学诊断 ：1. 细菌分离培养2. 生化试验3. 0/129敏感试验或血清学实验嗜水气单胞菌一、培养特性1.血平板可产生溶血圈2.麦康凯培养基上生长良好3.对弧菌抑制剂0/129不敏感，多数不发酵乳糖二、微生物学诊断1.细菌分离培养2.生化实验3.判定致病性，则需检测胞外蛋白酶等毒力因子巴氏杆菌科及相关属巴氏杆菌属一.形态及染色 两端钝圆，中央微凸的短杆菌，单个存在，有时成双排列，病料涂片用瑞氏染色或美蓝染色时，可见典型的两级着
37、色，培养物所做的涂片，两级着色不明显。二、培养特性 对营养要求比较严格。在普通培养基上生长贫瘠，不溶血，麦康凯上培养不生长。 三、微生物诊断1.涂片或触片镜检，染色，两级着色2.分离培养 麦康凯琼脂不生长，血平板不溶血3.动物实验病料悬液或培养物接种小白鼠，引起小白鼠迅速死亡里氏杆菌属一.培养及生化特性：生化试验大多阴性，不发酵葡萄糖和蔗糖，与多杀性巴氏杆菌相区别。二.微生物诊断1.涂片镜检：两级着色2.分离培养：巧克力培养基3.生化试验：不发酵葡萄糖和蔗糖嗜血杆菌属 嗜血杆菌是一群酶系统不完全的革兰氏阴性菌，生长需要血液中的生长因子，尤其是X因子和V因子 一.培养特性：初次分离培养时供给5%
38、10%CO2可促进生长。本菌属生长需提供X因子和V因子，在巧克力平板上生长较佳。毒力因子包括荚膜、菌毛、内毒素等。 二、微生物诊断1.显微镜检查：两级着色2.分离培养：血平板，巧克力平板3卫星现象4.生化试验5.血清学实验革兰氏阴性需氧杆菌布氏杆菌属一.形态及特征特性：不形成荚膜和芽孢，无鞭毛不运动，科兹洛夫染色法染成红色，其它菌呈绿色 二.种类及致病性：1分类 六个种 马耳他，流产 ，猪绵羊，沙林鼠，犬2.致病性 侵袭力强，可通过完整的皮肤、粘膜进入体内。孕期动物对布氏杆菌最敏感，感染后常引起流产三.微生物学诊断1细菌学检查：意义不大2.血清学实验：用已知的布氏杆菌检查动物的血清抗体 1）凝
39、集实验感染初期检查2）补体结合试验慢性布氏杆菌诊断3.变态反应检测：不宜做早期诊断。布氏杆菌水解素注射，观察红肿反应。1-2CM为弱+，2-3CM为+4-6CM为强+李氏杆菌属一.微生物学诊断1.镜检：G+小杆菌2.分离培养：蓝绿色光泽的菌落，溶血3.纯培养：溶血检查、运动性检查、生化特性鉴定4.动物实验：小鼠腹腔注射，剖检肝脏坏死，分离细菌5.血清学检查：凝集反应丹毒丝菌属一.微生物诊断1.镜检：G+小杆菌2.分离培养：血平板3细菌鉴定：培养特性和生化特性4.血清学诊断：凝集实验革兰氏阳性产芽孢杆菌炭疽芽胞杆菌一.培养特性1.需氧菌或兼性厌氧，营养要求不高2.在血琼脂上一般不溶血，但个别菌株
40、也可轻微溶血3.液体培养基中呈絮状沉淀生长4.明胶穿刺培养，呈倒松树状，表面液化呈漏斗状5.在含青霉素的培养基中，可形成串珠反应 二.微生物学诊断1.细菌学检查（1）镜检：大杆菌，两端平截，竹节状（2）分离培养：用普通琼脂或血琼脂（3）纯培养：镜检、串珠实验、生化试验（4）动物实验：将检验材料制成悬浮液或纯培养物给小鼠注射，2436h,小鼠死于败血症。2.血清学实验（1)Ascoli沉淀反应（2）间接血凝试验（3）协同凝集试验（4）串珠荧光抗体检查（5）琼脂扩散实验产气荚膜梭菌一.生化特性：本菌最突出的生化特性是对牛乳培养基的“爆裂发酵” 二.致病性：A型：人气性坏疽和食物中毒B型：羔羊痢疾C
41、型：绵羊猝狙D型：牛毒血肠症E型：犊牛、羔羊肠毒血症 三.微生物学诊断：1.直接涂片镜检：G+大杆菌，并有荚膜2.分离培养：接种血平板，有双层溶血环3.纯培养：引起牛奶爆裂发酵4.动物实验：小鼠、家兔或鸽5.肠毒素检查破伤风梭菌 本病已骨骼肌发生强制性痉挛的症状为特征 一.培养特性：严格厌氧菌，接触氧后很快死亡。普通培养基上即能生长分支杆菌属 主要特点是细胞壁含有大量脂质，不易找色牛分枝杆菌一.培养及生化特性1专属需氧菌，对营养要求严格2.菌落粗糙3.液体培养基中易形成菌膜浮于表面单正股RNA病毒套式病毒目 （Nidovirales)n 冠状病毒科（Coronaviridae)有囊膜 代表病毒
42、 猪传染性胃肠炎病毒 禽传染性支气管炎病毒n 动脉炎病毒科（Arteriviridae) 代表病毒 呼吸与繁殖综合征病毒（猪蓝耳病）其他正股RNA病毒n 微RNA病毒科（Picornaviridae)无囊膜 代表病毒 口蹄疫病毒FMDV口蹄疫病毒属(Aphthovirus) 肠病毒属(Enterovirus)心脏病毒属(Cardiovirus)鼻病毒属(Rhinovirus)肝病毒属(Hepatovirus)n 嵌杯病毒科（Caliciviridae)无囊膜 代表病毒 兔出血症病毒RHDVn 星状病毒科（Astroviridae)n 披膜病毒科（Togaviridae)n 黄病毒科（Flavi
43、viridae)有囊膜 代表病毒 牛病毒性腹泻病毒BVDV 猪瘟病毒CSFV单股DNA病毒n 细小病毒科 (Parvovidae）无囊膜 犬细小病毒 小鹅瘟病毒 猪细小病毒单股线状DNAn 圆环病毒科 (Circoviridae)无囊膜猪圆环病毒单股环状DNA双股DNA病毒n 痘病毒科 (Poxviridae)有囊膜 代表病毒 痘苗病毒 XX痘病毒 鸡痘病毒 口疮病毒n 非洲猪瘟病毒科 (Asfarviridae) 有囊膜 代表病毒 非洲猪瘟病毒ASFVn 虹彩病毒科 (Iridoviridae)n 疱疹病毒科 (Herpesviridae)有囊膜 代表病毒 伪狂犬病病毒 马立克氏病毒 禽传染
44、性喉气管炎病毒 鸭瘟病毒n 腺病毒科 (Adenoviridae)无囊膜 代表病毒 犬传染性肝炎病毒 减蛋综合症病毒n 多瘤病毒科 (Polyomaviridae)n 乳头瘤病毒科 (Papillomaviridae不分节段单负股RNA病毒n 副粘病毒科（Paramyxoviridae）有囊膜代表病毒 新城疫NDV 犬瘟热CDVn 弹状病毒科（Rhabdoviridae）有囊膜代表病毒 狂犬病n 丝状病毒科（Filoviridae)n 波纳病毒科（Bornaviridae) 分节段的负股RNA病毒n 正粘病毒科Orthomyxoviridae有囊膜 代表病毒 禽流感AIVn 布尼病毒科Bunyaviridae n 砂粒病毒科Arenaviridae 双RNA病毒n 呼肠孤病毒科 (Reoviridae)无囊膜 代表病毒 蓝舌病毒 草鱼出血症病毒 轮状病毒n 双RNA病毒科 (Birnaviridae)无囊膜代表病毒 传染性法氏囊病毒IBDV 传染性胰坏死病毒具有反转录过程的病毒n 反转录病毒科（Retroviridae)有囊膜 代表病毒 禽白血病/肉瘤病毒 马传染性贫血病毒 RNA病毒n 嗜肝病毒科(Hepadnaviridae) DNA病毒，感染人。. .jz.