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1、精品学习资源专题 2 细胞工程2.2.1 动物细胞培育和核移植技术【课程标准】动物细胞的培育与核移植技术【学习目标】1. 阅读教材 P44-46,说出动物细胞培育的概念及培育过程;2. 阅读教材 P46-P47,说出动物细胞培育的条件及该技术的应用;3. 阅读教材 P47-P48,说出动物核移植的概念及过程;4. 阅读教材 P49-P50,说出体细胞核移植技术的应用前景及该技术存在的问题;【学习过程】1, 简述动物细胞培育的过程,条件及应用;2, 简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程及应用前景;学问点一:动物细胞的培育(一)动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段有、等,其中 是其他动物细
2、胞工程技术的基础;(二)动物细胞培育1 动物细胞培育的含义:从动物机体中取出相关的组织,将其, 然后,放在相宜的培育基中,让这些细胞和;2 动物细胞培育的过程1) 接触抑制2) 原代培育3) 传代培育4) 细胞传代培育一般传至代就不易传下去了,一般来说,传至代左右,增殖就会逐步缓慢,以至于,这时部分细胞的可能发生变化,连续培育就会朝着等同于的方向进展;3. 动物细胞培育的条件 无菌、无毒的环境:对和全部的进行无菌处理;养分:合成培育基中有糖、无机盐、,通常需加入、血浆等; 温度和 pH : 相宜温度: 相宜 pH : 气体环境:主要是和,前者是所必需的,后者的主要作用是维护培育液的;拓展提升
3、1,动物细胞培育时,为什么选用幼龄的动物或组织.2,使组织分散为单个细胞时,能不能用胃蛋白酶?请阐述理由;3,制成细胞悬液的主要的目的是什么?欢迎下载精品学习资源4,请给传代培育下个定义;5, 为什么对动物细胞进行培育时通常要加血清?6,体外培育细胞时需要供应那些物质?7,体外培育的细胞需要什么样的环境条件?学问点二: 动物体细胞核移植技术和克隆动物【学习目标】说出体细胞核移植的过程,明白应用;1 动物核移植概念:将动物的一个细胞的,移入一个已经去掉细胞核的中,使其 并发育成一个 ,这个新的胚胎最终发育为动物个体;2 描述体细胞核移植的过程供体体细胞细胞培育()()注 入()减 中期卵巢卵母细
4、胞去核()与供体遗传基础()的幼体代孕动物()重组胚胎【拓展提升】1,克隆动物与植物细胞的组织培育的原理是相同的吗?说明理由;3, 克隆动物的本质是什么?3 体细胞的核移植是真的将供体的细胞核转入受体的去核的卵母细胞体内吗?4, 在体细胞的细胞核始终到受体卵母细胞之前,为什么必需先去掉受体卵母细胞的核?5 用于核移植的供体细胞一般都选用传代10 代以内的细胞,2.2.2 动物细胞融合和单克隆抗体制备【学习目标】5. 阅读教材 P52,说出动物细胞融合的概念、过程及意义;欢迎下载精品学习资源6. 阅读教材 P52-P54,说出单克隆抗体的制备过程及其应用;【学习过程】一、基础填空(一)动物细胞融
5、合1. 概念:或动物细胞结合形一个细胞的过程,也称细胞杂交;欢迎下载精品学习资源2. 结果:形成;3. 过程:两个或多个细胞灭活的病毒或PEG欢迎下载精品学习资源4. 意义:克服了的不亲和性,利用细胞融合技术而进展起来的技术,为制造单克隆抗体开创了新途径;(二)单克隆抗体1. 抗体产生细胞:成分: 特点:从中分别出的抗体产量低、纯度低、特异性差;2. 单克隆抗体的制备欢迎下载精品学习资源1 过程给小鼠注射特定的抗原蛋白从中分离 B 淋巴细胞未融合细胞灭活病毒融合 欢迎下载精品学习资源欢迎下载精品学习资源培育骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞 欢迎下载精品学习资源欢迎下载精品学习资源挑选培育基小鼠体内培克隆检
6、测养抗体体外培育欢迎下载精品学习资源杂交瘤细胞的特点: 、;单克隆抗体的优点: 、;(三)单克隆抗体的应用1、作为诊断试剂,具有 、的优点;2、用于治疗疾病和运载药物:主要用于治疗、可制成;二、才能提升1. 植物体细胞杂交和动物细胞融合的区分欢迎下载精品学习资源植物体细胞杂交动物细胞融合细胞融合原理细胞膜的流淌性融合过程先使细胞分散开诱导方法结果电激、振动、离心、聚乙二醇应用意义培育植物新品种相同点原生质体融合原理相同;原生质体融合的方法相像植物体细胞杂交和动物细胞融合的主要区分是:2. 单克隆抗体制备的过程中,两次挑选的目的分别是什么?3. B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞放在一起融合时,会有几种融
7、合方式(类型)?4. 杂交瘤细胞具备的特点是什么?5 使用的B 淋巴细胞是指必修三免疫调剂中学到那种细胞?该细胞产生抗体需要哪些细胞器参加?6 制备单克隆抗体时,为什么要选用B 淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行杂交?7 什么是生物导弹?与一般抗癌药物相比,有什么好处?动物细胞工程练习题1, 右图是动物细胞培育的基本过程示意图;请据此回答:(1) 容器 A 中放置的是动物器官或组织;它一般取自;欢迎下载精品学习资源(2) 容器 A 的动物器官或组织第一要进行的处理是,然后用酶处理,这是为了使细胞分散开;这样做的目的是;(3) 培育第一在 B 瓶中进行;瓶中的培育基成分有等;在此瓶中培育一段时间,这时的培
8、育称为;(4) 为了把B 瓶中的细胞分装到C 瓶中,用处理,然后配置成,再分装, 连续培育,称为;(5) 在 C瓶中正常培育了一段时间后,发觉细胞全部死亡;缘由是;. 2 现有 A 和 B 两个肉牛品种,A品种牛的细胞组成可表示为A 细胞核、 A 细胞质, B 品种牛就为 B 细胞核、 B 细胞质;(1)假如要获得一头克隆牛,使其细胞由A 细胞核和 B 细胞质组成,基本步骤是,从A 品种牛体内取出体细胞,进行体外培育;然后再从培育细胞中取出 注入 B 品种牛的 卵母细胞,经过某处刺激和培育后,可形成胚胎,该胚胎被称为 ,将该胚胎移入代孕母牛的中,通过培育可达到目的;( 2 ) 一 般 来 说
9、, 要 想 大 量 获 得 这 种 克 隆 牛 比 较 难 , 原 因 之 一 是 卵 母 细 胞 的 数 量 ;( 3)克隆牛的产生说明 具有全能性;克隆牛的性状主要表现品种牛的特点;由 A、B 两品种杂交得到的牛与克隆牛相比,杂交牛细胞核的遗传物质来自个亲本,细胞质来自 性亲本,克隆牛和杂交牛的遗传物质组成 (相同,不同);3. 下图为细胞融合的示意图,据图回答:(1) 如 A、B 是植物细胞, A、B 到 C 的过程中,常用到的化学试剂是 ;融合完成的标志是;将 D 培育成植株需要应用技术;(2) 如 A、B 用于动物细胞培育,就A、B 一般取自动物的器官或组织;(3) 如该过程用来制备
10、单克隆抗体,在A、B 到 C的过程中,形成的C 有种,用来培育符合要求的D 细胞应当是 ,与常规抗体相比,单克隆抗体的优点是 ;欢迎下载精品学习资源(4) 用病毒作为融合剂是由于病毒的表面含有 能够与细胞膜发生作用,使细胞凝集并发生融合;4. 2003年1月5日18时28分,已在太空漫游 92圈的“神舟四号”运行至主着陆场,随后胜利回收;“神舟四号”飞船上曾进行了B淋巴细胞和骨髓瘤细胞的融合、黄花烟草原生质体和“革新”一号烟草原生质体的融合两个科学试验,在电融合仪内经过160min 后,最终获得胜利;细胞融合技术与传统的有性杂交相比,其优越性在于;动物细胞融合技术最重要的用途是;人工诱导动物细
11、胞融合的技术除物理法、化学法外,仍可用作为诱导剂;依据上述材料,你认为在“神舟四号”飞船上所用的诱导方法是;5. 如下图为某同学依据杂交瘤技术的方法,设计的生产破伤风杆菌抗体的试验方案,据图回答:(1) 该方案能达到预期成效吗? 缘由是;(2) 图 中 为过程 , 常 用作 为诱 导 剂 , 该 细 胞 继 承 了 ,因此不仅能分泌,仍有本事;(3)该过程进行了两次挑选,第一次用,得到了融合的;该细胞的特点是;第二次进行和,最终得到能产生特定抗体的;4破 伤 风 杆 菌 的 抗 体 最 终 可 以 从和 中提取;5 该方案的目的是;6 整个过程所用到的技术的基础是;6 下图表示表示人体内各类血
12、细胞生成的途径;a f表示不同种类的细胞表示有关过程;欢迎下载精品学习资源(1) 造血干细胞形成各种血细胞,需要经受细胞的和过程;成熟红细胞失去全能性的缘由是;(2) 各类血细胞均采自于造血干细胞,但它们的功能各不相同根本缘由是;(3) 图中 f 代表的细胞名称是,需要抗原刺激才能发生的过程有 填数字 ;(4) 效应 B 细胞不能无限增殖,如要大量生产某种抗体,可通过细胞工程中的技术形成杂交瘤细胞;杂交瘤细胞合成抗体的翻译过程需要作为模板;单克隆抗体具有高度的,在疾 病的诊断和治疗等方面具有宽阔的应用前景;7.已知细胞合成 DNA有 D 和 S 两条途径,其中 D 途径能被氨基嘌呤阻断;人淋巴
13、细胞中有DNA的这两种合成途径,但一般不分裂增殖;鼠骨髓瘤细胞中尽管没有S 途径,但能不断分裂增殖,将这两种细胞在试管中混合,加聚乙二醇促融,获得杂种细胞;请回答:(1) 试管中除融合的杂种细胞外,仍有 种融合细胞;(2) 设计一方法 不考虑机械方法 ,从培育液中分别出杂种细胞,并说明原理;方法:;原理:;(3) 将分别出的杂种细胞在不同条件下连续培育,获得A、B、C 三种细胞株;各细胞株内含有的人染色体如下表 “ +”表示有,“ - ”表示无 ,测定各细胞株中人体所具有的五种酶 的活性;结果是:欢迎下载精品学习资源B 株有 a 酶活性; A、B、C 株均有 b 酶活性; A、B 株有 c 酶
14、活性; C 株有 d 酶活性; A、B、 C株均无 e 酶活性;如人基因的作用不受鼠基因影响,就支配a、b、c、d 和 e 酶合成的基因依次位于人的 、和号染色体上;1 答案: 1 胚胎或幼龄动物( 2)剪碎组织胰蛋白使细胞与培育液充分接触(3) 糖、氨基酸、无机盐、动物血清原代培育( 4 )胰蛋白酶细胞悬液传代培育(5)细胞没有发生癌变2 1 细胞核 去核重组胚胎子宫(2) 不足促性腺(3) 动物体细胞核A两 雌不同3 答案: 1 聚乙二醇或 PEG 产生细胞壁植物组织培育或组织培育2动物胚胎或诞生不久的幼龄 33杂交瘤细胞特异性强,灵敏度高4糖蛋白和一些酶4,答案:克服了远缘杂交不亲和的障
15、碍制备单克隆抗体灭活的病毒物理方法5 1 不能 由于没有将抗原注入小鼠体内,无法获得产生此种抗体的效应B 细胞 2 细胞融合 灭活的病毒 或聚乙二醇 双亲细胞的遗传物质特异性抗体在体外培育条件下大量繁 殖 ( 3)特定的挑选性培育基进行挑选杂种细胞快速大量繁衍,能产生专一的抗体克隆化培育和抗体的阳性检测单个的杂交瘤细胞(杂种细胞4 培育液 小鼠腹水 5 制备单克隆抗体( 6)动物细胞培育6 答案: 1 增殖 分裂 分化没有细胞核2基因的挑选性表达3 细胞和4动物 细胞融合 mRNA 信使 RNA特异性7. 1 两2培育液中加入氨基嘌呤,收集增殖的细胞加入氨基嘌呤后,使D 合成途径阻断,仅有 D 合成途径的骨髓瘤细胞及其彼此融合的细胞就不能增殖,但人淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后的杂种细胞可以利用淋巴细胞中的S 途径合成 DNA 而增殖 361278欢迎下载