《2022年光学显微镜的使用及革兰氏染色.docx》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2022年光学显微镜的使用及革兰氏染色.docx（12页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、精品学习资源光学显微镜的使用及革兰氏染色显微镜是讨论微生物所必不行少的工具；由于显微镜的创造，帮忙人类掀开了微生物世界的秘密；随着科学技术的不断进展，光学显微镜已从利用可见光的范畴扩大到利用紫外光源及非光源的电子显微镜，从而大大地提高了显微镜的放大率和辨论率；当今微生物学试验室中最常用的是一般光学显微镜，无论是观看微生物的个体形状仍是测量微生物细胞大小都必需使用它；因此我们应明白显微镜的构造和原理，以达到正确使用和保养的目的；除暗视野显微镜和相差显微镜可用于观看活的细菌细胞外，其他一般光学显微镜大都用来观看经染色后的细菌细胞，只有经过染色的细胞才能看清其形状和构造；因此各种染色法也是微生物工作
2、者应把握的基本技术；欢迎下载精品学习资源【目的】1 一般光学显微镜的使用欢迎下载精品学习资源1. 明白一般光学显微镜的构造和原理；2. 正确把握使用显微镜的方法；【概述】微生物是肉眼看不见的微小生物，必需借助光学显微镜和电子显微镜，才能观看到；因此，显微镜是讨论微生物最基本和最重要的工具之一；所以，把握显微镜的使用与爱护是进行微生物试验讨论的基本技能；【一般光学显微镜的基本结构】一般光学显微镜由两大部分组成，即机械部分和光学部分；机械部分包括镜座、镜臂、载物台及台上的标本推动器、镜筒、物镜转换盘、升降调剂器等，其主要作用是支 撑、固定镜头、调剂物象焦距、搁置和移动标本；光学系统包括反光镜（或电
3、光源）、光圈、聚光器、物镜、目镜等，作用是收集光源并集合于标本上，然后通过透镜放大成像，使人眼可以辨论在裸眼时不能观察的细节；物镜一般有4、 10、 40、 100（或 90）等几种； 100的是油镜，是微生物试验最常用的物镜；由于目镜多为10，所以使用油镜观看标本时，放大倍数为1000，可以将 1m左右的细菌放大至1mm左右； 1机械装置(1) 镜座和镜臂：它们是显微镜的基本骨架，起稳固和支持显微镜的作用；直筒显微镜的镜臂与镜座之间有一倾斜关节，可使显微镜倾斜肯定的角度便于观看；(2) 镜筒：它是一个金属制的圆筒，其上端安放目镜，下端安装转换器，镜筒的长度是固定的，通常是 160mm；有些显
4、微镜的镜筒长度是可调剂的；(3) 转换器：它是一个用于安装物镜的圆盘，其上可装3-4个物镜；为使用便利，物镜应按低倍到高倍的次序安装；转换物镜时，必需用手按住圆回旋转，勿用手指直接推动物镜，以免使物镜和转换器间的螺旋松脱而损坏显微镜；(4) 镜台：用于安放玻片；镜台上安装有玻片夹或玻片移动器，调剂移动器上的螺旋可使标本前后、左右移动，有些移动器上仍装有刻度标尺，可标定标本的位置，便于重复观看；欢迎下载精品学习资源(5) 调焦装置：调焦装置即安装在镜筒后方两侧的粗螺旋和细螺旋，用于调剂物镜和标本间的距离，使物像更清晰；粗螺旋转一圈可使镜筒升降约10mm，细螺旋旋转一圈可使镜筒升降约 0.1mm的
5、距离2光学系统欢迎下载精品学习资源目镜物镜转换器物镜标本推动器载物台光圈集光器反光镜镜座镜臂粗调剂轮细调剂轮标本推动器旋钮一般光学显微镜的结构欢迎下载精品学习资源(1) 目镜：目镜的功能是把物镜放大的物像再次放大；目镜由两片透镜组成，上面一块为接目透镜，下面一块为聚透镜，两片透镜之间有一光阑；光阑的大小打算了视野的大 小，光阑的边缘就是视野的边缘，故又称视野光阑；由于标本正好在光阑上成像，因此在光阑上粘一小段细发作为指针，可用来指示标本的详细部位；光阑上仍可放置测量微生物大小的目镜测微尺；目镜上标有5x、10 x 、15x 等放大倍数，不同放大倍数的目镜其口径是统一的，可互换位用；(2) 物镜
6、：是显微镜中最重要的部件；物镜有低倍10 x以下 、中倍 20x 、高倍 40- 65x 和油镜 90x以上 等不同的放大倍数；油镜简上刻有“OI”或“ HI ”字样，也有刻一圈 红 线 或 黑 线 为 标 记 的 ， 借 以 区分 于 其 他 物 镜； 物 镜 上 标 有放 大 倍 数 、 数值 孔 径numerical aperture,简写为NA、工作距离 物镜下端至盖玻片间的距离，mm及要求盖玻片的厚度等主要参数；数值孔径系指介质的折射率与镜口角1 2 正弦的乘积，可用NA=nsin /2 表示；式中， n 为物瓷与标本问折射率，为镜口角 通过标本的光线延长到物镜前镜边缘所形成的夹角；
7、显微镜的优劣主要取决于物镜辨论力的大小；所谓辨论力就是显微镜工作时辨论出两点间最小距离 D 的才能； D值愈小说明辨论力愈高；D 值可用以下公式表示；D=0.61 /NA要提高物镜的辨论力有两条途径缩短光的波长；一般光学显微镜的缺点是所用的照明光源不行能超过可见光的波长欢迎下载精品学习资源范畴 约 400 770 ；增大物镜的数值孔径；其影响因素之一是镜口角，当 sin 增大到最大时， 值 90，就是说进入透镜的光线与光轴成90角，这是不行能的，所以sin /2 的最大值总是小于 1；现在所用的油镜其为 60左右；影响数值孔径的另一因素是介质的折射率，不同介质的折射率是不同的，空气的折射率为1
8、.0 ，水的折射率为 1 33，香柏油的折射率为 162，玻璃的折射率为1.5 ；因此，通常在物镜和标本之间加入香柏油作介质就可使数值孔径值增大到1.2 1.4l ；所以，当用数值孔径为1.25的油镜来观看标本时，就能辨论出距离不小于 0.2 m 的物体，而大多数细菌的直径在0.5 m 左右，故在油镜下能看清其细胞形状及某些构造；显微镜的总放大率是指物镜放大率和目镜放大率的乘积；但由于物镜和目镜搭配的不同，其辨论力也不同，例如，在总放大率一样的情形下，采纳数值孔径大的40 倍物镜和10 倍目镜相搭配其辨论力就比数值孔径小的20 倍物镜和 90 倍目镜相搭配时要高些，成效也比较好；(3) 聚光器
9、：聚光器起会聚光线的作用，可上下移动在其边框上刻有数值孔径值；当用低倍物镜时聚光器应下降而当用油镜时就聚光器应升到最高位置；在聚光器的下方安装有 可变光阑 光圈 ，它是由十几张金属薄片组成可放大或缩小用以调剂光强度和数值孔径的大小；在观看较透亮的标本时，光圈宜缩小一些，这时辨论力虽降低，但反差增强，从而 使透亮的标本看得更清晰；但不宜将光圈关得太小，以免由于光干涉现象而导致成像模糊；(4) 反光镜：反光镜安装在聚光器下方的镜座上，它是一个有平、凹两个面的双面镜， 可以在水平与垂直两个方向上任意旋转；其作用是采集光线，并将光线射向聚光器；凹面镜能起会聚光线的作用；因此，未安装聚光器的显微镜及光源
10、较弱时可应用凹面镜，而在光源较强及用聚光器时一般可用平面镜；【材料和器皿】1. 标本金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus及大肠杆菌 Escheri-chiacoli的染色涂片，酿酒酵母 Saccharomyces cerevisias的水封片；2. 仪器：显微镜 有油镜 ；3. 其他：香柏油，二甲苯，擦镜纸等；【方法和步骤】1. 用低倍镜观看酵母菌(1) 调剂光源，将低倍物镜转到工作位置；上升聚光器，可变光阑完全打开，然后转动反光镜采集光源，一般以采集北窗射入的自然光为宜，不宜采纳直射日光；如遇阴天或晚上可用一般日光灯或台灯照明；当用显微镜灯 钨丝灯泡 照明时，因其亮度较强
11、，而且发射光谱中有较多刺激眼睛的红光，故应依据标本染色情形选用绿色、黄绿或蓝绿色滤光器或一面磨砂的有色滤光片， 以减弱光的强度同时又可吸取掉红光，使视野光线柔和，并可爱护眼睛；旋转反光镜，使光线投射到反光镜中心，并调剂聚光器或调剂光圈大小，使视野得到匀称的照明；(2) 调剂聚光器和物镜数值孔径相一样：取下目镜直接向镜筒内观看先将可变光阑缩到最小，再渐渐地打开，使聚光器的孔径与视野的直径一样大，然后再放回目镜；这一操作的目的是使入射光所绽开的角度与镜口角的角度相符合，否就因光因开得太大而超过物镜的数值孔径时，会产生光斑；如光圈收得太小就降低辨论力，从而影响了物像的清晰度；由于各物镜的数值孔径不同
12、，所以每转换一次物镜都要进行调剂；欢迎下载精品学习资源在实际操作中观看者往往只依据视野的亮度和标本明暗对比度来调剂光圈大小，而不考虑聚光器与物镜数值孔径的协作；只要能达到较好的成效，这种调剂法也是可取的；但是，对于使用显微镜的工作者来讲，必需明白这一操作的目的和原理，这样在操作时就能运用自如；(3) 放置标本：上升镜筒将酿酒酵母水封片放在镜台上，用玻片夹夹住然后降下低倍物镜，使其下端接近于玻片；(4) 调焦：转动粗螺旋，使镜筒逐步上升到观察模糊物像时，再转动细螺旋，调剂到物像清晰时为止；(5) 观看观看并绘制酵母菌形状；如要精细观看可转换高倍镜；2. 高倍镜观看(1) 将在低倍镜下找到的合适部
13、位移至视野当中；(2) 转换高倍镜：用手按住转换器渐渐地旋转，当听到“喀嚓”一声即说明物镜已转到正确的工作位置上；(3) 调焦 : 使用齐焦物镜时，只要从低倍镜转到高倍镜再稍调一下细螺旋就欢迎下载精品学习资源可看清物像；如用不齐焦的物镜时，每转换一次物镜都要进行调焦，即先使物镜降至特别靠近玻片的位置，然后再渐渐上升镜筒并细心调剂粗、细螺旋，直至物像清晰为止；(4) 观看：认真地观看酵母菌的结构；3. 用油镜观看细菌(1) 放置标本：将染色的细菌涂片置于镜台上；透镜香柏油玻片油镜原理示意图欢迎下载精品学习资源(2) 找合适的视野：先用低倍镜查找合适的视野，并将欲观看的部位穆到视野中心；(3) 转
14、换油镜：将油镜转到工作位置；(4) 调剂聚光器与油镜数值孔径相一样：只要将聚光器上升到最高位置，可变光光阑开到最大，此时两者的数值孔径即达到一样；(5) 加香柏油：从双层瓶的内层小管中取香柏油1 2 滴加到欲观看部位的涂片上 切勿加多 ，然后将油镜转到工作位置，下降镜头使油镜浸入香柏油中，并从侧面观看使镜头降至既特别接近玻片，又不能与玻片相撞的合适位置；(6) 调焦：从目镜中观看，同时转动粗螺旋 切忌反方向旋转），缓慢地提升油镜至显现模糊的物像时再用细螺旋调剂至物像清晰为止；如按上述操作仍找不到目的物，一种可能是油镜头下降仍未到位，另一种可能是油镜上升太快，以至眼睛捕获不到一闪而过的物像；遇此
15、情形，应重新操作；(7) 观看：认真观看细菌形状并将结果填入表中；4. 显微镜用毕后的处理(1) 上升镜筒取下玻片(2) 清洁显微镜：清洁油镜，先用擦镜纸擦去镜头上的香柏油，再用沾少许二甲苯的擦镜纸擦掉残留的香柏油最终再用洁净的擦镜纸抹去残留的二甲苯；清洁目镜和其他物镜，用擦镜纸擦净其他的物镜和目镜；用松软的绸布螺净机械部分的灰尘；欢迎下载精品学习资源(3) 清洁后应将物镜转成“八”字式，缓慢下降镜筒，使物镜搁在镜台上；将聚光器降到最低位置；反光镜转成垂直状；(4) 去除细菌涂片上的香柏油：加2 3 滴二甲苯于涂片上，使香柏油溶解，再用毛边纸轻轻压在涂片上，吸掉二甲苯和香柏油以免损坏涂片；【记
16、录结果】将观看到的结果记录于下表中低倍高倍油镜放大倍数 放大倍数 放大倍数 酿酒酵母大肠杆菌金黄色葡萄球菌【留意事项】1. 显微镜使用时应当心爱惜，不得随便拆卸，搬动显微镜时应用右手握住镜臂，左手托住底座，使镜身保持直立，并紧靠身体；切忌单手拎提；2. 载物台要放平，以防滴加的香柏油流出玻片，各个镜面切忌用手涂抹，以免手上的油、汗污损镜面，造成日后发霉；3. 用二甲苯接镜头时用量要少，不宜久抹，以防溶解胶粘透镜的树脂；切勿用乙醇擦镜头和支架；4. 因油镜的工作距离甚短，故操作时要特殊谨慎切忌采纳眼睛对着目镜边观看边下降镜筒的错误操作；5. 调剂粗调剂器时，动作要轻，侧面观看镜头和玻片的距离，留
17、意使镜头与玻片不相碰；6. 用擦镜纸擦拭油镜头时，留意手法轻柔，并按同一方向拖拭，防止旋转擦拭，以免损耗珍贵的油镜光学系统；【摸索题】1. 要使视野光明，除光源外，仍可实行哪些措施？2. 使用油镜应留意哪些问题.3. 试列表比较油镜、高倍镜和低倍境在数值孔径、工作距离及物镜镜头的大小等方面欢迎下载精品学习资源的差别；4. 试述影响辨论力的三因素；5. 当物镜由低倍转到油镜时，随着放大倍数的增加，视野的亮度是增强仍是减弱.应如何调剂？2 细菌的涂片及简洁染色法【目的】1. 把握细菌的涂片和简洁染色技术；【概述】细菌的涂片和染色是微生物学试验中的一项基本技术；细菌的细胞小而透亮，在一般光学显微镜下
18、不易识别，必需对它们进行染色，使经染色后的菌体与背景形成明显的色 差，从而能更清晰地观看到其形状和结构；用于生物染色的染料主要有碱性染料、酸性染料和中性染料三大类；碱性染料的离子带正电荷，能和带负电荷的物质结合，因细菌蛋白质等电点较低，当它生长子中性、碱性或弱酸性的溶液中经常带负电荷，所以通常采纳碱性染料 如美蓝、结晶紫、碱性复红或孔雀绿等 使其着色；酸性染料的离子带负电荷，能与带正电荷的物质结合当细菌分解糖类产酸使培育基pH 下降时，细菌所带正电荷增加因此易被伊红、酸性复红或刚果红等酸性染料着色；中性染料是前两者的结合物又称复合染料，如伊红美蓝、伊红天青等；简洁染色法即仅用一种染料使细菌着色
19、；此法虽手续简 便，但般只能显示其形状，不能辨别其构造；染色前必需先固定细菌；其目的有二：一是杀死细菌并使菌体钻附于玻片上，二是增加其对染料的亲和力；常用的有加热和化学固定两种方法；固定时应尽量爱护细胞原有形状，防止细胞膨胀或收缩；【材料和器皿】1. 菌种：大肠杆菌，金黄色葡萄球菌；2. 仪器：显微镜；3. 染料：草酸铵结品紫或石炭复红；4. 材料：载玻片，擦镜纸，二甲苯，香柏油和玻片搁架等；【方法和步骤】1. 涂片：在洁净无油腻的玻片中心放一小滴水 或用接种环挑l 2 滴水 ，用无菌的接种环挑取少量菌体与水滴充分混匀，涂成极薄的菌膜；涂布面积约1 2；2. 固定：手执玻片一端，有菌膜的一面朝
20、上，通过微火3 次 用手指触涂片反面以不烫手为宜 ；待玻片冷却后，再加染料；3. 染色：玻片置于玻片搁架上，加适量 以盖满菌膜为度 结晶紫染色液 或石炭酸复红液 于菌膜部位，染 1 2min；4. 水洗：倾去染色液，用洗瓶中的自来水，自玻片一端轻轻冲洗至流下的水中无染色液的颜色时为止；5；干燥：自然干燥或用吸水纸盖在涂片部位以吸取水分 留意勿擦去菌体 ；6镜检：用油镜观看并绘细菌形状图于记录表中；欢迎下载精品学习资源染色过程示意图7清理：试验完毕，要求清洁显微镜；有菌的玻片用洗衣粉水煮沸后，清洗洁净；【结果记录】将细菌简洁染色和形状观看的结果记录于下表中菌名染色液名称菌体颜色菌体形状（画图）大
21、肠杆菌金黄色葡萄球菌【留意事项】1. 玻片要洁净无油，否就菌浓涂不开；2. 挑菌量宜少，涂片宜薄，过厚就不易观看；【摸索题】1. 涂片为什么要固定 .固定时应留意什么问题？2. 你在涂片染色过程中曾遇到什么问题？试分析其中缘由；欢迎下载精品学习资源3革兰氏染色法【目的】1. 明白革兰氏染色的原理，并把握革兰氏染色方法；2. 熟识革兰染色法在鉴定细菌上的重要意义；【概述】细菌染色法是细菌形状学检查的一项基本技术；由于细菌个体微小，无色半透亮，在一般光学显微镜下不易清晰观看，一般需经染色来增加反差，从而有利于对细菌标本的观 察；染料有带阴离子着色基团的酸性染料和带阳离子着色基团的碱性染料；在一般生
22、理条 件下（ pH 7.4左右），细菌菌体都带负电荷，故用于细菌染色的染料多为带阳离子着色基团的苯胺染料，如美蓝、结晶紫、碱性复红等，它们较易与细菌菌体结合；革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法，1884 年由丹麦医师Gram 创立；革兰氏染色法可将全部的细菌区分为革兰氏阳性菌G+ 和革兰氏阴性菌G- 两大类， 是细菌学上最常用的鉴别性染色法；革兰氏染色法的主要步骤是先用结晶紫进行初染，再加媒染剂碘液，以增加染料与细胞的亲和力，使结晶紫和碘在细胞膜上形成分子量较大的复合物，然后用脱色剂 乙醇或丙酮 脱色，最终用沙黄复染；凡细菌不被脱色而保留初染剂的颜色 紫色 者为革兰氏阳性菌，如被脱
23、色后又染上复染剂的颜色 红色 者为革兰氏阴性菌；该染色法之所以能将细菌区分为G+菌和 G-菌，是由于这两类菌的细胞壁结构和成分的不同所打算的；G-菌的细胞壁中含有较多易被乙醇溶解的类脂质，而且肽聚糖层较薄、交联度低，故用乙醇或丙酮脱色时溶解了类脂质，增加了细胞壁的通透性，使结晶紫和碘的复合物易于渗出，结果细菌就被脱色，再经沙黄复染后就染成红色；G+菌细胞壁中肽聚糖层较厚且交联度高，类脂质含量少，经脱色剂处理后反而使肽聚糖层的孔径缩小，通透性降低，因此细菌仍保留初染时的颜色；革兰染色的原理目前存在三种假说；1） 通透性学说革兰阳性菌细胞壁结构较致密，肽聚糖层厚，脂质含量少，乙醇不易透入；革兰阴性
24、菌细胞壁结构疏松，肽聚糖层薄，含大量脂质，乙醇易渗入；2） 等电点学说革兰阳性菌等电点（pI 23 ）比革兰阴性菌（ pI 45 ）低，在相同pH 条件下，革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多，故与带正电荷的结晶紫染料结合坚固，不易脱色；3） 化学学说革兰阳性菌菌体含大量核糖核酸镁盐，可与碘、结晶紫坚固结合，使已着色的细菌不被乙醇脱色；革兰阴性菌菌体含核糖核酸镁盐很少，故易被脱色；革兰（ Gram）染色法是细菌学中最常用的一种鉴别染色法；用本法不仅可以观看细菌的形状和排列方式，仍可依据染色结果将全部细菌分成革兰阳性菌与革兰阴性菌两大类；不被酒精脱色仍保留紫色者为革兰阳性菌（G+菌），被酒精脱色后
25、复染成红色者为革兰阴性菌（ G菌）；革兰染色法不仅有助于细菌的鉴别，同时仍为分析细菌的致病性和选用抗菌药物供应了依据；在细菌标本染色前，必需将细菌固定在载玻片上，常用的固定方法为加热法，其目的是杀死细菌，且保持原有形状，并使细菌粘附在载玻片上，不致染色时脱落；【材料和器皿】1. 菌种：大肠杆菌斜面菌种一支，金黄色葡萄球菌斜面菌种一支；2. 仪器：显微镜；3. 染色液：草酸铵结晶紫染色液，鲁格Lugol碘液， 95%乙醇， 0 5沙黄染色液；欢迎下载精品学习资源4. 材料：载玻片，香柏油，二甲苯，擦镜纸，毛边纸，染色缸等；【方法和步骤】1. 涂片(1) 常规涂片法：挑l 环水于载玻片上，再用接种
26、环挑取少量的大肠杆菌和金黄色葡萄球菌与玻片上的水滴混合匀称；并涂成薄的菌膜 留意挑取金黄色葡萄球菌的量应少于大肠杆菌 ；(2) “三区”涂片洗在玻片的左、右端各加l 滴水，用无菌接种环挑少量金黄色葡萄球菌与左边水滴充分混合成仅有金黄色葡萄球菌的区域，并将少量菌液延长至玻片的中心；再用无菌的接种环挑少量大肠杆菌与右边水滴充分混合成仅有大肠杆菌的区域，并将少量大肠杆菌液延长至玻片中心，与金黄色葡萄球菌相混合成含有两种菌的混合区 .2. 固定涂片在空气中干燥；手执玻片一端，有菌膜的一面朝上玻片在微火上通过3 次 用手指触涂片反面，以不烫手为宜 ；待冷却后，再加染料；3. 染色（ 1）初染：将玻片置于
27、玻片搁架上，加草酸铵结晶紫染色液 加量以盖满菌膜为度 ，染色 1 2min ；倾去染色液，用自来水当心地冲洗；（ 2）媒染：滴加鲁格碘液，染l 一 2min，水洗；（ 3）脱色：滴加 95乙醇，将玻片稍摇动几下即倾去乙醇，如此重复2 3 次，立刻水洗，以终止脱色；（ 4）复染：滴加沙黄液，染色2 3min, 水洗；最终用吸水纸轻轻吸干；4. 镜检用油镜观看，将结果记录于表中；5. 试验完毕后处理(1) 清洁显微镜：按试验1.1 中方法进行；(2) 清洗染色破扇用洗衣粉水煮沸、清洗、晾干后备用；【结果记录】将革兰氏染色的结果记录于下表中；菌名菌体颜色菌体形状G+或 G-大肠杆菌欢迎下载精品学习资
28、源金黄色葡萄球菌【留意事项】1. 标本片不能涂的太薄或太厚，以免影响结果观看；2. 革兰染色成败的关键在于脱色时间；如脱色过度，革兰阳性菌也可被脱色而被误认为是革兰阴性菌；如脱色时间过短，革兰阴性菌也会被认为革兰阳性菌；脱色时间的长短仍受涂片厚薄、脱色时玻片晃动的快慢及乙醇用量多少等因素影响，难以严格规定；3. 染色过程中勿使染色液干枯；用水冲洗应甩去玻片上的残留以免染色液被稀释而影响染色成效；4. 选用培育18-24h菌龄的细菌为宜；如菌龄太老，由于菌体死亡或自溶常使革兰氏阳性菌转呈阴性反应；【摸索题】1. 革兰氏染色中哪一步是关键.为什么 .你如何掌握这一步.2. 不经复染这一步，能否区分
29、革兰氏阳性菌和阴性菌.3. 固定的目的之一是杀死菌体，这与用自然死亡的菌体进行染色有何不同？【附录】革兰染色液配制：1. 结晶紫染液：称取结晶紫4 8g，溶于 100ml 95% 乙醇中制成饱和液；取20ml 饱和液与 80ml10g/L草酸铵溶液混合即成，过滤后备用；2. 卢格（ lugol ）碘液：先将 2g 碘化钾溶于 10ml 蒸馏水中，再加 1g 碘，待碘全部溶解后再加 300ml 蒸馏水即成；3. 95%乙醇或丙酮乙醇溶液（95%乙醇 70ml 加丙酮 30ml）；4稀释石炭酸复红液：称取4g 碱性复红溶解于100ml 95%乙醇内，即成碱性复红饱和酒精溶液，吸取10ml 饱和液和
30、 90ml50g/L石炭酸水溶液混匀即成石炭酸复红液；量取10ml 石炭酸复红液加 90ml 蒸馏水混匀即成；1.4显微测微尺的使用【目的】把握应用测微尺测量菌体大小的方法；【概述】显微测微尺可用于测量微生物细胞或孢子的大小，它包括镜台测微尺和目镜测微尺两个部件；镜台测微尺是一块特制的载玻片，其中心有一全长为1mm的刻度标尺，等分为100小格，每格长度为0.01mm等于 10m，可用它来校准目镜测微尺每小格的长度；目镜测微尺是一块可放在目镜内的圆形玻片其中心刻有50 等分或 100 等分的小格；每小格的长度随目镜、物镜放大倍数的大小而变动，应预先用镜台测微尺来校准并运算出在某一放大倍数物镜下，目镜测微尺每小格所代表的实际长度，然后才可用它来测量微生物菌体或孢子欢迎下载精品学习资源的大小；欢迎下载