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1、5月份工作总结5月份工作总结5月份工作总结一田间工作这个月在田间主要帮张师兄测株高，刘师兄育苗和挂牌。二实验室1遗传差异实验(1)发苗5.2号总在育苗盘中发了33个亲本和杂交组合（详见下表）的苗，每个组合五穴，每穴丢三颗种子。CMo17Mo1718白C478478自330C黄早四*A619C48-248-2A619C黄早四黄早四C478C48-2*18白C黄早四Mo17C黄早四*47848-248-2*18白CMo17黄早四C478*自330C48-2C黄早四Mo17478C478*48-2CMo17*48-2黄早四黄早四Mo17C48-2*478黄早四目前在这个扩大后的群体CMo17Mo17
2、C478478C48-248-2C黄早四黄早四C478C48-2*18白C黄早四Mo17C黄早四*47848-218白自330A619C478C48-2*A619C黄早四47848-2*自330黄早四Mo17C48-2*478黄早四478CMo1748-2*18白C478*自330黄早四C48-2C黄早四Mo17478C478*48-2CMo17*48-2黄早四黄早四中，只有以下六个组合C47848-2C48-2*A619待多营取材478*自330待多营取材黄早四478*18白无种子还没有发苗，准备让徐浩师兄帮我取样。478*18白这个组合无种子，暂时待找到种子。（2）DNA提取以下是育苗20
3、天后的生长情况图片图一育苗结果图二育苗结果图三育苗结果图四育苗结果将这33组合中得C48-2和48-2全部提取DNA，其他组合随即选取三株提取DNA,编号如下：组合提取个数编号C48-238S148-234S2A6193S3C48-2*18白3S4C478*18白3S5C黄早四*18白3S6黄早四*18白3S7C478*黄早四3S8C478*Mo173S9C478*48-23S10CMo17*48-23S11CMo17*4783S12CMo17*黄早四3S21C48-2*黄早四3S14C48-2*4783S13C48-2*Mo173S15C黄早四*4783SC黄早四*48-23S17C黄早四*
4、Mo173S18CMo173S19C4783S20C黄早四3S22Mo173S234783S24黄早四3S2518白3S26自3303S27C黄早四*A6193S2848-2*18白3S29CMo17*自3303S30C478*自3303S31C黄早四*自3303S32C48-2*自3303S33选取所提取的部分DNA对其浓度进行测定和1%的琼脂糖电泳检测，结果如下：图五DNA检测结果2RNA提取RNA的提取和DNase处理实验前准备：为防止RNA降解，金属、玻璃器皿180高温处理6h以上，塑料制品用0.1%的DEPC水浸泡处理，高温灭菌后烘干使用，所用试剂溶解液需用0.1%的DEPC水溶解，
5、实验过程中需带灭菌的手套进行。RNA的提取使用Trizol法，步骤严格按照说明书要求进行。（1）取0.1g的叶片于液氮预冷的研钵中，加入液氮，迅速研磨，加入1ml的Trizol覆盖，待液体完全融化后，继续研磨直至液体透明清亮。将液体转入1.5ml离心管，室温放置5min，使其充分裂解，4下12022rpm离心5min；（2）取上清于另一1.5ml的离心管中，加入0.2ml氯仿，充分振荡混匀3040s，室温放置5min，4下12022rpm离心10min；（3）弃沉淀，取上清于另一1.5ml的离心管中，加入等体积的异丙醇，混匀后室温放置510min，4下12022rpm离心10min；（4）弃上
6、清，RNA沉于管底，用75%乙醇洗涤RNA沉淀，温和振荡离心管，悬浮沉淀，4下12022rpm离心3min；（5）尽量弃上清，室温晾干或真空干燥510min，干燥后加入40lDEPC水溶解RNA；（6）RNA的DNase处理。反应体系如表4：表4.PCR反应体系Table4PCRreactionsystem药品RNADNaseI（5U/l）RNase-FreeH20RNasin（40U/l）10DNaseI缓冲液用量10-20g2l加至50l0.5l5l以上成分37温浴30min后，适量的RNase-Free水溶解，并于-70保存。且用核酸蛋白仪测定RNA样品的OD260/OD280值，测定其
7、纯度和浓度。用1.0%琼脂糖凝胶电泳，更换新的0.5%TBE缓冲液，电压140V，快速检测RNA。结果如下图：从图中可以看出RNA提取结果不好，RNA发生降解，主要原因可能是操作的原因，也可能是实验前准备工作没做好，以后一定要花大力气改进，争取提取出可用的RNA。三文献阅读本月由于田间劳动的原因，只读了三篇中文文献，两篇英文文献，中文文献1基因表达调控与选择性剪接机制研究这篇文章是2022年发表在电子学报上的文章，由于当时还没有高通量测序技术，所以是以cds序列通过EST来研究RNA可变剪接的机制以及影响因素，这篇文章的两点就是建立了AsMaIndb并进行了多序列比对算法ASALIGN，没有进
8、行任何实验验证，所以是一片生物信息学文章。由于距现在时间较远，所以实验方法不具备参考价值。2拟南芥SDIR1基因转录的选择性剪接这篇文章是2022年发表在云南植物研究上的一篇文章，他采用PCR及RT-PCR法分别克隆了拟南芥SDIR1基因的DNA和CDNA，并通过序列对比发现了三种转录本，并对已报道的SDRI1基因的序列进行对比，发现三个转录本编码产物不同，并用RT-PCR研究了SDRI1基因的表达量。这篇文章对我研究RNA可变剪接作用很大，我可以参考他的实验方法以及思路，用我们测序的结果和玉米B73的序列设计引物扩增出目的基因，并反转录成cDNA后通过转化测序和B73序列对比，证实发生了可变
9、剪接和发生可变剪接后的编码产物的变化。3小麦光周期基因PPd-B1的选择性剪接分析这篇文章是2022年发表在作物学报上的文章，是我们学校小麦所做的。他们也是通过提取RNA后反转录成cDNA，并通过序列对比研究可变剪接的，实验方法没有公开，不能借鉴，但他们发现同一个基因可以存在多种可变剪接方式，并且将剪接位点具体到第几外显子，还是对我的研究有很大帮助的。英文文献1Genome-wideDetectionandAnalysisofAlternativeSplicingforNucleotideBindingSite-Leucine-RichRepeatsSequencesinRice这篇文章是20
10、22年发表在JournalofGeneticsandGenomics上的，这是一篇生物信息学分析的文章，其中涉及到几个软件，Sim4,AIR,Spidey,BLAT,EST_GENOME,EXALIN,GeneSeqer,MGAlignIt可以识别可变剪接和内含子多态性。他们是从生物信息学角度出发通过不同的数据库建立了HMM（隐马尔科夫模型）然后通过不同软件分析可变剪接。这些软件对我研究可变剪接还是很有意义的。2SurveyofthetranscriptomeofAspergillusoryzaeviamassivelyparallelmRNAsequencing这篇文章是2022年发表在Nu
11、cleicAcidsResearch上的一篇文章，这篇文章和我们的测序报告完全一样，他们也是2022年华大基因测序，测序后根据测序报告对差异表达、可变剪接、新转录本、新外显子、新基因进行了验证，他们设计引物随机选取一个验证成功后即可确定测序报告的正确性，里面有验证的实验方法，值得借鉴。6月份工作计划已经提取出遗传差异实验所需的大部分DNA，并已经合成了AC204515.3-10CGTGTCGTGTGCAATTTCTTGGGTGGGATTGTTTAAGCCTBAC-SSR这个引物，所以要在最快的时间内提取剩余五个组合的DNA，争取在六月份完成遗传差异实验。扩展阅读：生产部5月份工作总结及6月份工
12、作计划生产部5月份工作总结及6月份工作计划一、5月份工作总结1生产部对厂部值班、周检进行跟踪、督促，对存在的问题进行指出、批评。对车间的故障台帐等各种台帐进行检查、考核。完成生产部制度的初次汇编。2调度初步做好了全厂水、电、煤的消耗、甲醇产量的统计台帐，为我们的成本核算提供了初步数据。3和区域销售部相关领导沟通，完成销售前期准备部分工作，成功打通销售流程，进行了液氧和甲醇的充装和销售演练。完成了空分灌区充装安全条件的落实。4给排水：完成了新增外排污水管的改造；对生产用水，污水排放、浓盐水等排放进行合理控制，保证了生产正常运行。5燃料动力：两台锅炉基本实现较长周期运行，保障了生产稳定运行。人员离
13、职较多，及时做了思想工作及招聘、培训。6空分实现了较长周期的稳定运行；氩系统调试合格，产出了合格的氩气；完成产品销售的各项安全工作，实现了液氧、液氮的销售。完成氧泵联锁的调试及投用。7气化：单台气化炉实现了较长周期运行，两台气化炉也初步实现了满负荷运行（20小时左右）。及时停车处理了705两个蒸汽发生器E1503、E1504漏点。8合成：产出了合格的甲醇，系统初步实现了稳定运行；504灌装站投用正常；精馏加压塔再沸器、常压塔水冷器漏点及时进行了检修处理。对精馏常压塔进口管高度进行了改造。正在对804装置进行调试。9质检中心配合全系统开车做好了分析工作；配合人力加紧人员招聘的工作；催促备品配件和
14、化学试剂到货，但此工作进展不顺利，已影响到正常生产。二、6月份工作计划1生产部继续抓好工艺纪律、生产记录、工艺指标、交接班检查、考核工作；对厂部值班、周检进行跟踪、督促。汇总生产部车间台帐目录，对格式、名称等进行规范。2完成生产部制度的汇编审核。完成迷你操作手册的定稿工作，并报采购计划。3打通甲醇销售流程，完成甲醇销售任务。4调度做好生产的组织和协调、调度工作；做好两台气化炉满负荷运行，全系统考核工作；做好6月份停电1天的开停车计划工作。做好全厂水、电、煤的消耗、甲醇产量的统计工作，积累出比较有代表性的数据。5给排水：做好节能降耗工作，保证脱盐水质及水量、保证循环水压力、温度正常，保证消防水正
15、常。污水调试正常，合格排放，同时做好应急预案。6燃料动力：保证2台锅正常稳定运行，降低消耗；完成成品磅协调投运；做好新进员工的安全教育及上岗培训工作。改善现场环境卫生。7空分：保证系统安全稳定运行，产品合格；保证产品销售安全及时。提高负荷，保证气化两台炉满负荷运行。8气化：做好2台气化炉满负荷运行的各项工作，实现2台气化炉满负荷稳定运行。做好节能降耗工作。做好人员四班三倒的工作。9合成：做好全系统满负荷运行的各项工作，实现系统满负荷运行，进行优化。保证甲醇产量和质量。完成804装置开车、正常运行。保证产品销售安全及时。10质检中心：及时做好各项取样、分析工作；做好各产品的分析检验工作。8做好各项安全工作，确保安全零事故。生产部2022-5-第 8 页 共 8 页